胃癌患者乳腺癌易感基因1與X射線修復交叉互補基因1的表達及其奧沙利鉑輔助化療效果分析

陳 艷，嚴必中，陳 平，宋俊彪，胡 平，卞偉剛

(江蘇省鹽城市第一人民醫院，江蘇 鹽城 030000)

胃癌患者乳腺癌易感基因1與X射線修復交叉互補基因1的表達及其奧沙利鉑輔助化療效果分析

陳 艷，嚴必中，陳 平，宋俊彪，胡 平，卞偉剛

(江蘇省鹽城市第一人民醫院，江蘇 鹽城 030000)

目的 探討胃癌術后乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1，BRCA1)及X射線修復交叉互補基因1(X-ray repair cross complementing gene 1，XRCC1)表達及其奧沙利鉑輔助化療效果。方法 選取74例術后病理診斷為胃癌患者，均予奧沙利鉑輔助化療。采用免疫組化法檢測病理標本中BRCA1和XRCC1的蛋白表達情況。結果 74例患者胃癌組織內XRCC1 及BRCA1蛋白表達的陽性率分別為18.9%(14/74)、29.7%(22/74)；BRCA1與XRCC1表達呈正相關(r=0.264，P= 0.012)；BRCA1及XRCC1蛋白表達陽性患者化療有效率以及3年無病生存率(diseasefree survival，DFS)和總生存期率(overall survival，OS)均低于蛋白表達陰性患者，差異均有統計學意義(P< 0.05)。BRCA1和XRCC1蛋白的表達及腫瘤分化程度是胃癌患者術后化療3年OS的獨立因素。結論 胃癌患者BRCA1和XRCC1蛋白的表達是影響患者預后的關鍵因素，且影響術后輔助化療的治療效果。臨床上，可根據其表達水平選取化療藥物。

胃癌；BRCA1；XRCA1；奧沙利鉑；輔助化療；相關性分析

胃癌是中老年人好發的常見腫瘤之一，其發病隱匿，患者多無臨床癥狀，發現時大部分為晚期胃癌[1]。目前胃癌的治療還是以手術切除為主的綜合治療，化療作為主要的輔助治療方式。隨著基因組學研究的深入，越來越多的人認為，基因的改變及變化在胃癌的發生發展過程中占主導地位[2]，相關基因表達的高低決定著患者胃癌發病率的高低及其發病后的藥物敏感性以及術后生存率。有學者在胃癌標本中發現胃癌術后乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1，BRCA1)和X射線修復交叉互補基因1(X-ray repair cross complementing gene 1，XRCC1)的蛋白表達較正常胃組織高，但其表達高低對奧沙利鉑輔助化療的療效以及患者遠期預后的報道尚不多見。本研究對74例胃癌患者的BRCA1和XRCC1蛋白的表達進行檢測，探討其與奧沙利鉑輔助化療效果的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2011年3月至2014年5月在我院行胃癌根治術的患者74例，其中男43例，女31例，年齡43～67[(52.3±5.8)歲]；其中管狀腺癌21例，印戒細胞癌12例，乳頭狀腺癌24例，腺鱗癌3例，黏液腺癌14例。

1.2 化療方案 所有患者在診斷為胃癌的7 d內由同一醫師行胃癌根治術，并于術后予以奧沙利鉑+卡培他濱方案化療，第1天按患者的體表面積給予奧沙利鉑(江蘇奧賽康藥業股份有限公司提供，國藥準字H20064296)130 mg/m2靜注2 h；按患者體表面積給予卡培他濱(Hoffmann-La Roche Inc提供，國藥準字J20080101)1250 mg/m2，2次/天，早晚各一次，連續服用兩周，停藥一周，按此劑量3周重復一次，記為一個周期。所有患者均按此方法治療兩個周期。接受治療后，采用電話或門診的方法對所有患者隨訪3年。

1.3 檢測方法 采用免疫組化法對所有患者術后胃癌組織標本中的BRCA1和XRCC1蛋白的表達進行檢測。以PBS液代替一抗作為陰性對照。XRCC1抗體購自上海安研生物有限公司，規格：0.1 ml，0.2 ml；濃度：1 mg/ml；BRCA1抗體購自上海瑞齊生物科技有限公司，蛋白分子量81/205 Da，濃度：1 mg/ml；免疫組化試劑盒購自上海經科化學科技有限公司。

1.4 結果判定 ①BRCA1和XRCC1蛋白表達陽性的判斷標準[3]：陽性細胞是指在顯微鏡下觀察到細胞核內有棕黃色顆粒的細胞。細胞核內見明顯棕褐色顆粒記為3分，棕黃色顆粒記為2分，淡黃色顆粒記為1分，無顆粒沉著記為0分；任意選取5個高倍鏡視野，所觀察到的陽性細胞所占同類細胞的百分比>75%記為4分，在51%～75%之間記為3分，在26%～50%之間記為2分，在5%～25%之間記為1分，< 5%記為0分。將兩項得分的乘積作為最終得分，≥ 2分為蛋白表達陽性，0～1分陰性。②化療療效及預后評價[4]：疾病進展(PD)：出現了新病灶或在原有病灶基礎上增加例20%；疾病穩定(SD)：原有病灶大小沒有明顯增加或減少；部分緩解(PR)：原有病灶減少30%；完全緩解(CR)：原有病灶基本或全部消失。有效率(RR)=CR+PR。總生存期率(overall survival，OS)是指從患者術后開始藥物治療的時間至患者死亡時間，3年無病生存率(diseasefree survival，DFS)是指無病生存的比率[5]。

1.5 統計學方法 采用SPSS 20.0 統計軟件包進行分析。相關性采用Spearman 秩和相關分析；采用Kaplan-Meier 法進行生存分析；多因素分析采用 COX 回歸模型。P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 BRCA1和XRCC1在胃癌患者術后的表達 胃癌組織中的BRCA1和XRCC1免疫組化檢測結果見圖1、圖2。BRCA1、 XRCC1蛋白表達陽性率分別為29.7% (22/74)和18.9%(14/74)。BRCA1和XRCC1的蛋白表達均為陽性者有8例(10.81%)，均為陰性者有46例(62.16%)，BRCA1蛋白陽性而XRCC1蛋白陰性者有14例(18.92%)，BRCA1蛋白陰性而XRCC1蛋白陽性者有6例(8.11%)，二者表達呈正相關(r=0.264，P= 0.012)。

圖1 BRCA1蛋白在胃癌中的表達 a：陰性；b：陽性(SP ×200)

圖2 XRCC1蛋白在胃癌中表達 a：陰性；b：陽性 (SP ×200)

2.2 臨床療效 BRCA1蛋白表達陽性與陰性患者有效率比較，差異有統計學意義(P= 0.03)；XRCC1蛋白表達陽性與陰性患者有效率比較，差異亦有統計學意義(P= 0.04)，見表1。

表1 胃癌術后BRCA1和XRCC1蛋白表達與化療療效

2.3 生存狀況 BRCA1和XRCC1蛋白表達陽性患者3年DFS和OS均明顯低于表達陰性的患者，差異有統計學意義(P< 0.05)，見表2。

表2 化療后3年生存狀況[n(%)]

2.4 化療后3年OS的Cox多因素分析 腫瘤分化程度及胃癌患者BRCA1和XRCC1蛋白表達陽性均是化療后3年OS的危險因素，見表3。

表3 化療后3年OS的Cox多因素分析

3 討論

胃癌是我國目前發病率最高的惡性腫瘤之一，其發生與發展是在多種因素的調控下進行的，起病隱匿，早期診斷率低，預后較差，其五年生存率與其他惡性腫瘤相比也較低。在有的國家，針對40歲以上男性，通過在常規體檢中加入胃鏡檢查以提高其早期診斷率，取得了較好的效果[6]。奧沙利鉑作為目前較為常用的化療藥物，主要通過阻礙DNA的復制過程，引起腫瘤細胞的凋亡，其對于控制病灶發展、緩解患者癥狀具有較好的效果。但不同人群對化療藥物的敏感性也不同，對有些患者，行胃癌根治術后輔以奧沙利鉑的作用效果遠不能達到預期療效，其療效具有個體差異性。本研究就探討了胃癌術后BRCA1和XRCC1的表達與奧沙利鉑輔助化療效果的相關性。

XRCC1是一種作用于DNA的動物基因，位于19號染色體的長臂(q13.2-q13.3)其蛋白分子通過堿基切除修復而在DNA修復中發揮重大作用[7]。有報道稱，在患有肺癌、胃癌、神經系統腫瘤的患者中，其XRCC1的蛋白表達異常。方航榮指出[8]，相比較于正常組織，XRCC1蛋白的胃癌組織中的表達更高，差異具有統計學意義。這可能是由于腫瘤在發病過程中，由于某些基因發生異常而造成了大部分細胞的DNA受損，從而使XRCC1的表達上調來修復受損的DNA。其水平可以反映腫瘤組織對鉑類藥物所致DNA損傷修復的能力。袁張斌認為[9]，XRCC1表達水平較低的患者，輔助奧沙利鉑化療的近期療效較好。

BRCA1是位于1號染色體上的一種抑癌基因，其表達產物作用于DNA并參與同源重組修復。其蛋白表達的高低可影響作用于腫瘤細胞DNA對化療藥物的敏感性。有報道稱[10]，在乳腺癌、胃癌以及卵巢癌中，BRCA1 mRNA的表達高低與鉑類藥物的療效以及患者遠期生存率有一定的相關性。

在本研究中，BRCA1和XRCC1的蛋白表達呈正相關(r=0.248，P=0.006)，說明兩者在胃癌患者起協同作用，共同影響著患者的預后。數據表明，BRCA1和XRCC1蛋白表達陰性患者服用奧沙利鉑的治療有效率高于表達陽性的患者(P< 0.05)，這說明可以根據患者BRCA1和XRCC1的蛋白表達來指導用藥。并且BRCA1和XRCC1的蛋白表達陽性與陰性患者化療3年的DFS和OS比較差異有統計學意義。并且經過Cox多因素分析證實BRCA1和XRCC1表達狀況均是化療后3年OS的危險因素，說明了BRCA1和XRCC1的蛋白表達對患者的遠期預后也有一定的影響。

綜上所述，胃癌患者術后組織內BRCA1和XRCC1蛋白的表達是影響患者預后的關鍵因素，也影響著術后輔助化療的治療效果，在臨床上可根據其表達水平選取化療藥物。

[1] 董云，李志革.ERCC1、BRCA1在非小細胞肺癌的表達與順鉑耐藥的研究進展[J].現代腫瘤醫學，2010，18(5)：1037-1041.

[2] 李巖.胃癌腫瘤標志物及臨床意義[J].實用醫院臨床雜志，2011，8(1)：11-15.

[3] 楊蘭，鄧穎，胡洪林，等.奧沙利鉑分別聯合卡培他濱及5-氟尿嘧啶/亞葉酸鈣治療晚期胃癌的療效觀察[J].實用醫院臨床雜志，2015，12(2)：79-81.

[4] 王晉，張羽，馮崗，等.RKIP在胃癌中表達的意義[J].實用醫院臨床雜志，2010，7(4)：118-119.

[5] 李文駿，向華，馬慶波.DNA 修復基因 XRCC1的194 位點多態性與晚期非小細胞肺癌鉑類化療敏感性關系的Meta分析[J].中國全科醫學，2011，14(6)：2417-2420.

[6] 顧術東，茅國新，張曙.晚期胃癌 ERCC1 和 BRCA1 表達與鉑類化療療效及預后關系[J].現代腫瘤醫學，2013，21(11)：2525-2528.

[7] Kim JW，Cho HJ，Kim M，et al.Differing effects of adjuvant chemotherapy according to BRCA1 nuclear expression in gastric cancer[J].Cancer ChemotherPharmacol，2013，71(16)： 1435-1443.

[8] 方航榮，鄭建云，劉冰，等.DNA修復基因 XRCC1、MGMT 在胃癌中表達的研究[J].現代腫瘤醫學，2013，21(2)：377-380.

[9] 袁張斌.晚期胃癌組織切除修復交叉互補基因 1 表達與奧沙利鉑化療近期療效的相關性研究[J].實用醫院臨床雜志，2014，11(1)：89-91.

[10]梁發，謝忠.ERCC1、BRCA1 在胃癌中的研究進展[J].齊齊哈爾醫學院學報，2011，32(2) ： 262-264.

R735.2

A

1672-6170(2016)01-0038-03

2015-11-22；

2015-12-15)