不同離心處理對全自動血型分析系統(tǒng)檢測結(jié)果的影響

王　霞，潘　彤，楊文玲

(天津市血液中心檢驗科，天津 300110)

·經(jīng)驗交流·

不同離心處理對全自動血型分析系統(tǒng)檢測結(jié)果的影響

王霞，潘彤，楊文玲△

(天津市血液中心檢驗科，天津 300110)

摘要:目的探討血型檢測中不同標(biāo)本處理方式對BECKMAN PK7300全自動血型儀檢測結(jié)果的影響。方法選擇100例已知ABO血型標(biāo)本進(jìn)行3種離心處理：即3 000 r/min離心5 min(A組)、3 090 r/min離心10 min(B組)和4 000 r/min離心10 min(C組)，然后再進(jìn)行ABO及Rh血型檢測。結(jié)果A、B兩組ABO及Rh血型正確判讀率均為100%，均未出現(xiàn)錯誤和可疑結(jié)果；C組ABO及RH血型正確判讀率分別為為79%和82%，分別出現(xiàn)可疑結(jié)果21和18例。結(jié)論作為全自動血型檢測系統(tǒng)運行的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，標(biāo)本處理方式的合理選擇會直接影響血型結(jié)果的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞:全自動血型檢測系統(tǒng)；離心處理；ABO血型

ABO血型檢測是獻(xiàn)血者常規(guī)血篩檢測項目之一，已有實驗室開始使用全自動血型檢測系統(tǒng)。目前使用的血型儀多為開放式檢測系統(tǒng)，設(shè)備廠家向用戶推薦部分設(shè)備使用參數(shù)。按照《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》、GBT22576-2008/ISO15189-2007《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》 、ISO/IEC15189-2007《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的認(rèn)可準(zhǔn)則》及《血站技術(shù)操作規(guī)程》(2012版)的要求，血站血篩實驗室在采用一項新的檢測方法，或更換現(xiàn)有檢測方法時，在正式投入使用之前應(yīng)對與檢測相關(guān)的參數(shù)進(jìn)行確認(rèn)。本文以BECKMAN PK7300全自動血型儀為例探討不同標(biāo)本處理方式對血型檢測的結(jié)果是否造成影響。

1資料與方法

1.1一般資料來自本中心無償獻(xiàn)血者EDTA-K2抗凝血液標(biāo)本100例，其中A、B、O及AB型各25例。

1.2儀器與試劑BECKMAN PK7300全自動血型儀(美國貝克曼公司)；標(biāo)準(zhǔn)A、B、O紅細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥)，抗A、抗B和抗D標(biāo)準(zhǔn)抗血清(上海血液生物醫(yī)藥)； BECKMAN PK7300全自動血型分析系統(tǒng)配套使用P3、P4梯形微孔板。

1.3方法在已知血型標(biāo)本中挑選出100例標(biāo)本其中A、B、O及AB各25例，先后進(jìn)行3種離心處理：(1)使用PK7300全自動血型分析系統(tǒng)操作指南中推薦的標(biāo)本離心參數(shù)3 000 r/min離心5 min將此組設(shè)定為A組；(2)考慮到本血站酶免與血型同為一個標(biāo)本管，在保證酶免的離心要求下驗證此離心條件對血型檢測是否有影響，選擇3 090 r/min離心10 min的離心參數(shù)此組設(shè)定為B組；(3)選擇本實驗室最高離心速度即4 000 r/min離心10 min作為對照組設(shè)定為C組，用以驗證指南中提及高速離心影響檢測結(jié)果的結(jié)論。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理利用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用多個獨立標(biāo)本非參數(shù)檢驗的Kruskal-Wallis檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1BECKMAN PK7300全自動血型儀3種離心處理后ABO血型檢測結(jié)果采用BECKMAN PK7300全自動血型儀對3種離心處理后ABO血型進(jìn)行檢測，并對不同組正確判讀率進(jìn)行比較，三組間正確判讀率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1　　3種離心ABO檢測結(jié)果

2.2BECKMAN PK7300全自動血型儀3種離心處理后Rh血型檢測結(jié)果 采用BECKMAN PK7300全自動血型儀對3種離心處理后Rh血型進(jìn)行檢測，并對不同組正確判讀率進(jìn)行比較，三組間正確判讀率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2　　3種離心處理Rh檢測結(jié)果

3討論

血型的正確鑒定是血站檢驗科最重要的常規(guī)檢測之一，因為血型正確與否關(guān)系到受血者的生命安全[1]。血站質(zhì)量手冊中明確規(guī)定提供給臨床的血液制品ABO及RH血型正確率必須為100%。國內(nèi)大多數(shù)血站以往普遍采用U型微板聯(lián)合酶標(biāo)儀的檢測方法，但該法的缺點是過程繁瑣且易受人為及外界因素的影響[2]。如反應(yīng)環(huán)境的溫濕度、離心力大小及震蕩強(qiáng)度等，使結(jié)果出現(xiàn)偏差從而造成嚴(yán)重的事件。目前多種血型自動化檢測系統(tǒng)受到關(guān)注，BECKMAN PK7300以其自動化程度高、標(biāo)準(zhǔn)化、檢測通量大及能實現(xiàn)批量化[3-4]檢測等優(yōu)點受到用戶的青睞。BECKMAN PK7300全自動血型檢測儀加樣精密度高、血型結(jié)果有原始圖像記錄跟蹤，保證檢測結(jié)果的可靠性和可溯性、有效降低工作強(qiáng)度、防止人為錯誤、提高實驗效率和正反定型判讀準(zhǔn)確性及節(jié)約試劑成本等優(yōu)點。

本研究在儀器使用前確認(rèn)研究中在儀器用戶指南中注意到推薦的標(biāo)本離心條件有3種：(1)轉(zhuǎn)子半徑15 cm轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心5 min；(2)轉(zhuǎn)子半徑20 cm轉(zhuǎn)速2 500 r/min離心5 min；(3)轉(zhuǎn)子半徑30 cm轉(zhuǎn)速2 000 r/min離心5 min。為此本課題對3 000 r/min離心5 min的離心條件進(jìn)行確認(rèn)。試驗結(jié)果顯示此離心條件下ABO及RH血型正確判讀率均為100%。考慮到本血站的體采科的留樣現(xiàn)狀無法改變，在保證酶免檢測的離心要求下驗證此離心條件是否影響全自動血型儀的血型檢測，因此對3 090 r/min離心10 min的離心方式來進(jìn)行驗證及確認(rèn)，試驗結(jié)果顯示ABO及Rh血型正確判讀率均為100%。以上2種離心方法的檢測結(jié)果均達(dá)到血型定性試驗正確判讀率大于95%的可接受標(biāo)準(zhǔn)。為此確定3 090 r/min離心10 min作為本實驗室血型檢測的標(biāo)本處理方法。此外，也對4 000 r/min離心10 min的檢測結(jié)果ABO及RH正確判讀率分別為79%和82%的原因進(jìn)行了分析，可能是由于高速離心使血細(xì)胞壓得過緊以至于細(xì)胞吸樣受到阻礙，導(dǎo)致細(xì)胞加注過少再進(jìn)行稀釋后從而影響結(jié)果判讀。3種離心處理的正確判斷率比較雖然無統(tǒng)計學(xué)差異，但4 000 r/min離心10 min的正確判讀率未達(dá)到血型定性試驗判讀率的要求，而且與指南推薦的參數(shù)差異較大因此離心條件不適用。綜上所述，全自動血型檢測中標(biāo)本處理方式對檢測結(jié)果起到關(guān)鍵作用，應(yīng)遵照廠商指南中推薦條件進(jìn)行驗證，若當(dāng)試驗參數(shù)有所變化時應(yīng)做好檢測系統(tǒng)與標(biāo)本前處理條件的確認(rèn)與優(yōu)化，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

參考文獻(xiàn)

[1]Kumar US,Ghosh K,Gupte SS,et al.Role of HLA antigens in Rh (D) alloimmunized pregnant women from Mumbai,Maharashtra,India[J].J Biosci,2002,27(2):135-141.

[2]陳顯，劉洲君，朱紹汶，等．全自動血型儀在血型檢測中的應(yīng)用[J]．臨床輸血與檢驗，2014，16(3)：250-252．

[3]謝敬文，嚴(yán)康峰，馬偉文，等．?dāng)?shù)字全自動血型儀在無償獻(xiàn)血者血型檢測中的應(yīng)用[J]．中國輸血雜志，2006，19(1)：36-37．

[4]李俊杰．手工與自動血型儀檢測ABO血型方法的比較[J]．中國實用醫(yī)藥，2011，6(8)：242-243．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.061

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)10-1433-02

(收稿日期：2016-02-03)