IgG抗-E引起新生兒溶血病1例

覃　濤,黃美容

(1．貴州航天醫院檢驗科，貴州遵義 563000;2．貴州遵義醫學院附屬醫院輸血科，貴州遵義 563000)

·個案與短篇·

IgG抗-E引起新生兒溶血病1例

覃濤1,黃美容2

(1．貴州航天醫院檢驗科，貴州遵義 563000;2．貴州遵義醫學院附屬醫院輸血科，貴州遵義 563000)

本院近期在工作中發現1例由IgG抗-E引起的新生兒溶血病(HDN)，現將其報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料新生患兒，男，G1P1，足月，出生后因“出現皮膚黃染半天”于2013年5月29日急診收入本院新生兒科；外院剖宮產分娩，無輸血史；其母年齡 21歲，既往無妊娠史， 但在6年前，因手術治療曾輸過血，血型為A型，RhD(+)。入院檢查：總膽紅素464.7 μmol/L，直接膽紅素13.4 μmol/L；紅細胞(RBC)2.48×1012/L，血紅蛋白(Hb)108g/L，血細胞比容(HCT)為0.33。臨床醫生征求家屬同意，擬行換血治療，申請O型洗滌紅細胞3 U，AB型血漿200 mL行換血治療。本科接申請單后，立即定血型：玻片法，B型RhD(+)，然后聯系血站，洗滌O型RhD(+)洗滌紅細胞3 U。當收到血站送來的洗滌紅細胞后，值班人員進行交叉配血。鹽水法：主側無溶血，無凝集，次側凝集；凝聚胺配血：主側凝集，次側凝集。復查雙方血型無誤后，通知臨床從外院抽取患兒母親的血液送至本科，進行下述試驗，最終篩選了Rh血型(CcDee或CCDee)的B型懸浮少白細胞紅細胞及AB型新鮮冰凍血漿進行換血，未出現任何輸血不良反應，癥狀得到明顯改善。

1.2試劑抗-D(IgM)、抗-A、抗-B、抗IgG、C3d(上海血液生物醫藥有限責任公司，生產批號：20130130、20121225、20110819)；凝聚胺試劑盒(珠海貝索生物技術有限公司，生產批號：113031)；不規則抗體篩查卡、新生兒ABO/RhD血型鑒定卡、抗球蛋白卡、RH血型抗原檢測卡(單克隆抗體)、篩選細胞、譜細胞(長春博迅生物技術有限責任公司，生產批號：20130202、20121101、20121205、20121201、20135608、20135701)。

1.3方法ABO、Rh血型抗原、IgG檢測(微柱凝膠法)，將被檢者紅細胞用生理鹽水稀釋為0.5%～0.8%的濃度，取50 μL加在相應微柱凝膠卡中，離心觀察結果。

直抗試驗：取患兒紅細胞用生理鹽水充分洗滌6次后，配成2%～5%的懸液，各取1滴懸液分別加入到含2滴抗IgG、C3d多抗、抗C3d單抗、抗IgG單抗、生理鹽水(對照)中，混勻、離心觀察結果。

不規則抗體篩選：將濃度為0.5%～0.8%的篩選細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號分別加入到不規則抗體篩查卡中，在相應孔中再分別加入待測標本：等量的母親的血漿、患兒的血漿、患兒紅細胞放散液，37 ℃孵育15 min，離心觀察結果。

抗體鑒定：將濃度為0.5%～0.8%的譜細胞1～10號分別加入到抗人球蛋白卡中，在相應孔中再分別加入待測標本：等量的母親的血漿、患兒的血漿、患兒紅細胞放散液，37 ℃孵育15 min，離心觀察結果。

效價測定：取等量2 mL與母親血清混勻，37 ℃孵育1 h，用生理鹽水對倍稀釋，分別加入到等量的含有相應抗原的HDN母體效價檢測卡中，37 ℃孵育15 min，離心觀察結果。其中抗-E測定細胞抗原：篩選4份Rh(E)陽性的O型獻血員洗滌紅細胞作為抗原，濃度為0.5%～0.8%?？?B測定細胞抗原：篩選4份Rh(E)陰性的B型獻血員洗滌紅細胞作為抗原，濃度為0.5%～0.8%。

排除試驗：在抗人球蛋白卡中，分別加入A型、B型、O型紅細胞抗原，在對應孔中再分別加入待測標本，等量患兒的血漿、放散液，37 ℃孵育15 min，離心觀察結果。其中，A型、B型、O型為Rh(E)陰性的4人份獻血員洗滌紅細胞。

放散液的制備：將新生兒紅細胞用生理鹽水充分洗滌后，加入等量生理鹽水56 ℃，熱放散8 min，離心取放散液備用。

2結果

2.1血型結果新生兒血型為B型，CcDEe；母親血型為A型，CcDee。

2.2不規則抗體篩查結果新生兒血漿：Ⅰ號、Ⅲ號陽性；新生兒放散液：Ⅰ號、Ⅲ號陽性；母親血漿：Ⅰ號、Ⅲ號陽性。見表1。

2.3直抗結果新生兒IgG，++++；抗IgG、C3d(強陽性)、抗C3d(陰性)；母親IgG，陰性；抗IgG、C3d(陰性)；抗C3d(陰性)。

2.4譜細胞抗體鑒定結果新生兒血漿2、3、4、5、8、10號細胞陽性；新生兒放散液：2、3、4、5、8、10號細胞陽性；母親血漿：2、3、4、5、8、10號細胞陽性。按照譜細胞反應格局，判斷該不規則抗體為抗-E。見表2。

2.5效價檢測母親血漿中抗-E效價為1∶256，抗-B效價小于1∶2。

2.6排除試驗游離試驗無抗A、抗B抗體，放散試驗無抗A、抗B抗體。

2.7配血結果明確抗-E導致HDN而引起配血不合，排除ABO系統導致HDN后，篩選Rh(E)陰性的B型紅細胞(CcDee或CCDee)，進行交叉配血。結果：鹽水法，主次側無溶血，無凝集；采用凝聚胺法及抗人球蛋白法，主側，無溶血無凝集，次側凝集(由于直抗強陽性)。輸血后，未出現任何輸血不良反應。

表1　　患兒血漿、紅細胞放散液及母親血漿抗體與篩選細胞反應格局

表2　　患兒血漿、紅細胞放散液及母體血漿抗體與譜細胞反應格局

3討論

HDN是指母胎血型不合所致的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病，胎兒從父方遺傳所獲血型抗原為母方所缺乏，分娩過程中該胎兒血型抗原進入母體，使母體產生抗該血型抗原的抗體(IgG類)[1]。當母體再次妊娠時，抗該血型抗原的抗體(IgG類)可通過胎盤進入胎兒血液循環，使胎兒在宮內或出生后發生大量紅細胞破壞，出現一系列溶血性征象的疾病。在本病例中，母親為G1P1，血型為A型(非O型)，RhD陽性，在產前檢查時，很容易就排除了由于母子血型不合導致的HDN。但是產婦曾有輸血史，需要引起重視，若在產前檢查時，進行不規則抗體篩選，就會發現不規則抗體，并鑒定，然后進行夫妻雙方Rh 5個抗原檢測，定期監測抗-E的效價。母嬰血型不合的免疫性溶血病可以進行早期檢查，早期發現，并采用相應的干預治療，必要時行宮內輸血、及時剖宮產、產后新生兒換血等多項措施協同作用才能有效防治新生兒溶血病[2]。所幸，通過實驗及時篩選出配合的血液給予換血，無輸血不良反應，經臨床進一步治療，患兒病情好轉。

在排除試驗中，分別篩選Rh(E)陰性的A、B、O型細胞抗原，做了新生兒血樣的游離和放散試驗，均未檢出抗A抗體和抗B抗體。同時，用Rh(E)陰性的B細胞抗原，檢測母親血清抗B效價，抗B效價小于1∶2。所以最終選用Rh(E)陰性的B型少白細胞的紅細胞配血。次側交叉配血中，由于患兒紅細胞已經被母體的抗-E致敏，直抗試驗為++++，所以在檢測IgG類抗體的聚凝胺方法及抗人球蛋白方法中，次側凝集是由致敏在胎兒紅細胞上的抗-E與胎兒本身的E抗原造成，并非是與獻血員不相合造成的。因此，直抗陽性的患兒紅細胞次側配血常出現凝集，不作配血禁忌考慮，只要主側配血相合即可進行輸血[3]。

由于Rh血型抗原表位是多肽，在胎兒出生時已發育成熟，與相應的IgG抗體親和力較強，嚴重的HDN病例多由Rh血型抗體引起，在HDN的發病方面，Rh血型抗體較ABO血型抗體更為重要[4]。Rh血型系統主要抗原有D、C、c、E和e抗原，以D抗原的抗原性最強。近年來，我國實行Rh(D)相容性輸血，絕大多數患者都能接受同型血液輸注，因輸血所致同種免疫性抗-D越來越少，然而抗-E已逐漸成為最多見的經輸血產生的Rh血型抗體[5]。因此，為了減少Rh引起的同種免疫，有必要在輸血前、獻血員獻血時進行Rh 5個抗原的檢測，并同型輸注；產前檢測時，對有輸血史、妊娠史、流產史的孕婦，有必要進行孕婦不規則抗體篩選、夫妻雙方ABO、Rh 5個抗原的鑒定，并定期監測其效價。

參考文獻

[1]胡麗華．臨床輸血學檢驗[M]．3版．北京：人民衛生出版社，2012：194.

[2]馬印圖，劉芳，李振奇，等．母嬰血型不合新生兒溶血病早期干預治療的臨床研究[J]．醫學研究雜志，2010，39(8)：87-90．

[3]中華人民共和國衛生部醫政司．全國臨床檢驗操作規程[M]．3版．南京：東南大學出版社，2006．

[4]Marion ER,Ragnhid O,Marsh WL.The clinical significance of alloantibodies of blood group system[J].Semin Hematol,2000,37(2):197-203.

[5]吳遠軍，吳勇，陳寶嬋，等．Rh血型抗體的檢測及結果分析[J]．細胞與分子免疫學雜志，2008，24(6)：604-606．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.070

文獻標識碼：C

文章編號：1673-4130(2016)10-1446-02

(收稿日期：2016-02-15)