雅培ARCHITECT c16000全自動生化分析儀血清指數在生化檢測中的應用

黃 燚，劉 丹(.四川省醫學科學院·四川省人民醫院檢驗科，四川 成都 6007；.四川大學華西醫院呼吸內科，四川 成都 6004)

雅培ARCHITECT c16000全自動生化分析儀血清指數在生化檢測中的應用

黃 燚1，劉 丹2
(1.四川省醫學科學院·四川省人民醫院檢驗科，四川 成都 610072；2.四川大學華西醫院呼吸內科，四川 成都 610041)

目的 探討血清指數在辨別血清樣本溶血、黃疸和脂血等常見干擾中的作用。方法 收集臨床常規檢測的血清樣本1733例，經肉眼辨別無溶血、黃疸和脂血，通過雅培ARCHITECT c16000全自動生化分析，采用生理鹽水法檢測1733例樣本的溶血、黃疸和脂血的干擾指數。結果 在1733例經肉眼未發現溶血、黃疸和脂血的血清樣本中，126例血清指數偏高。其中溶血50例，黃疸76例，未檢測出樣本脂血指數偏高。126例干擾樣本中，50例樣本的丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、鎂(Mg2+)、二氧化碳(CO2)檢測受溶血影響，黃疸和脂血均未對肉眼辨別無干擾的樣本檢測產生影響。結論 通過全自動生化儀檢測血清指數判定溶血、黃疸和脂血經濟、高效，是生化檢測中有效的判定常見干擾的方法。

雅培；全自動生化分析儀；血清指數；干擾

實驗室檢測指標受多種因素影響，其中，溶血、黃疸和脂血樣本是檢測中常見的干擾因素，對檢測產生嚴重影響，干擾結果判讀。Romero等報道由溶血導致的樣本拒收占分析前不合格樣本的36.2%[1]，Jane等報道門診不合格樣本中，18.1%是由于溶血導致[2]。盡管近年來自動化分析和臨床檢驗技術不斷提高，檢測錯誤仍在不斷發生。Plebani等研究表明68.2%的檢測錯誤是由于分析前因素導致。影響檢驗分析前因素眾多，不同患者的生理或病理狀態對檢驗結果都會造成影響。另外，檢驗樣本的采集和運輸等也會對檢測指標產生不同的影響[3]。現有國內臨床實驗室對于樣本質量的判斷主要還是依靠肉眼，其中最常見的即對于溶血、黃疸和脂血樣本的判斷。溶血、黃疸和脂血樣本對檢測結果會產生嚴重干擾[4]，肉眼判斷樣本質量可以在很大程度上過濾有效信息并反饋給臨床，給臨床醫生對于檢驗結果判讀提供幫助。然而，Glick等報道肉眼判斷血清溶血、黃疸和脂血結果是不可靠的[5]。在國內大型醫院檢驗樣本量逐年增加的背景下，肉眼判斷樣本質量也會大大增加檢驗工作者的工作量。因此，自動化的、快速的對于血清干擾的判斷是臨床自動化工作的趨勢。本研究利用全自動生化分析儀自帶的血清指數，對1733例血清樣本進行評估，并將血清指數的自動檢測和實驗室信息系統(LIS)進行關聯，通過雙向通訊自動檢測樣本血清指數。

1 材料與方法

1.1 材料 選取2016年5月在四川省醫學科學院·四川省人民醫院申請的門診、住院和體檢常規生化樣本1733例，均為早晨空腹靜脈血。按照標準操作規程采集于4.0 ml BD血清真空采血管(BD，Franklin Lakes，NJ，USA)中，待樣本凝集后，3000 rpm離心5分鐘，離心后血清樣本經生化檢驗組工作人員經過肉眼判定排除溶血、黃疸和脂血干擾。

1.2 方法 將肉眼判斷無干擾的血清樣本在雅培ARCHITECT c16000全自動生化分析儀上利用生理鹽水法檢測血清指數。通過LIS自動將待測血清樣本的檢測指令發送到生化分析儀，分別將5.3 μl血清與200 μl生理鹽水混合檢測，儀器通過檢測7個波長的吸光度，利用自帶的計算公式求出血清指數。其中溶血指數的界值為0.3 Index，黃疸指數的界值為34.2 Index，脂血指數的界值為0.57 Index，血清指數的結果也可以用1+、2+、3+和4+表示，對應關系如表1所示。

表1 血清溶血、黃疸和脂血指數檢測值的換算

血清指數與干擾樣本濃度的相關性：將洗滌紅細胞加生理鹽水稀釋，反復凍融離心取上清，制作血紅蛋白溶液，利用XN1000血常規流水線(Sysmex，Kobe，Japan)檢測血紅蛋白濃度，收集混合嚴重黃疸和嚴重脂血樣本，利用ABBOTT c16000生化儀檢測血清總膽紅素(TBIL)水平。收集正常對照混合血清，按不同比例混合血紅蛋白溶血和黃疸樣本。計算血清指數和血紅蛋白和TBIL濃度的相關性，脂血指數即通過生化儀直接檢測樣本濁度。

2 結果

2.1 血清樣本的一般情況 在1733例肉眼判斷無干擾的血清樣本中，通過血清指數檢測發現，127例樣本的血清指數增高，其中溶血50例，黃疸76例，未檢測出樣本脂血指數偏高。溶血和黃疸樣本分別占總樣本量的2.89%和4.39%；在所有存在干擾的樣本中，溶血樣本占39.68%，黃疸占60.32%。

2.2 血清指數的相關性驗證 將血紅蛋白溶血檢測后稀釋到7.2 g/L作為原液，嚴重黃疸血清TBIL濃度為251.7 μmol/L，嚴重脂血血清甘油三酯濃度為10.29 mmol/L，將三種干擾樣本按不同比例稀釋，分別檢測不同濃度干擾樣本的溶血指數、黃疸指數和脂血指數，見表2。利用回歸方程分別計算樣本濃度和血清指數的相關性后顯示，溶血指數和血紅蛋白濃度的相關系數r=0.9991，黃疸指數和TBIL濃度的相關系數r=1.0000，脂血指數和甘油三酯濃度的相關系數r=0.9997，見圖1。分析黃疸指數和黃疸樣本的血清TBIL和直接膽紅素(DBIL)水平可見，103例肉眼可見和肉眼未見的黃疸樣本血清TBIL、DBIL和黃疸指數的相關系數r=0.9892；r=0.9827，見圖2。

表2 不同濃度干擾樣本中各項指標檢測結果

2.3 干擾與生化檢測結果的關系 本實驗室采用中生雅培試劑，在常用生化檢測項目中，不對檢測產生明顯影響的干擾物濃度，見表2。溶血樣本對血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門氨酸氨基轉移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、TBIL、DBIL、Mg、CO2檢測產生影響，也會導致K+濃度增高；脂血樣本對TBIL和DBIL檢測產生影響。利用回歸方程，參照表3將干擾物濃度換算為血清指數后發現：在1733例肉眼判斷無干擾的樣本中，利用溶血指數判定，50例樣本的ALT、AST、LDH、TBIL、DBIL、Mg2+、CO2檢測受血紅蛋白影響；利用黃疸指數判定，23例樣本的高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測受膽紅素(BIL)影響；利用脂血指數計算，未發現檢測受脂血濁度的影響。

圖1 血紅蛋白溶液及混合血清與溶血指數、黃疸指數和脂血指數的相關性驗證 a：溶血指數；b：黃疸指數；c：脂血指數

圖2 103例黃疸樣本血清總膽紅素、直接膽紅素和黃疸指數的相關關系散點圖 a：總膽紅素；b：直接膽紅素

表3 常用生化檢測試劑的方法學和抗干擾能力

3 討論

溶血、黃疸和脂血是臨床檢驗最常見的干擾。在臨床檢驗分析前環節，樣本溶血在不合格和拒收樣本比例中占36.2%～70%[1，2，6]。本研究中，溶血樣本占所有受干擾樣本的39.68%，黃疸樣本占60.32%。

溶血是紅細胞膜破壞后血紅蛋白由細胞內釋放到細胞外造成的，通常要通過分離血清或血漿才能通過肉眼識別。當血紅蛋白濃度超過0.3 g/L時，通過肉眼可以根據血清或血漿的顏色變化判斷是否溶血。然而，肉眼判斷帶有一定的主觀性和個體差異，容易將輕度溶血樣本漏檢。溶血對多種檢測項目的準確度造成影響，如血清K+、Na+、Ca2+、Mg2+、BIL、LDH、TP、AST、ALT、γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)等[7，8]。在本實驗中，按檢測試劑的干擾實驗數據，在1733例樣本中，50例樣本ALT、AST、LDH、TBIL、DBIL、Mg2+、CO2的檢測受溶血影響。由于紅細胞內K+含量遠高于血清，50例樣本的血清K+檢測也受溶血影響。

血清TBIL在17.1～34.2 μmol/L，而肉眼看不出黃疸時，稱隱性黃疸；當血清TBIL濃度超過34.2 μmol/L時，稱為顯性黃疸。通過檢測103例黃疸樣本的血清TBIL、DBIL和黃疸指數，進一步驗證了血清BIL和黃疸指數具有良好的相關性。在本研究使用的各種常規生化試劑中，干擾實驗抗黃疸的cut-off值均高于隱性黃疸水平，故在肉眼辨別無干擾的樣本中，未發現其受黃疸影響。

在脂血樣本中，常規檢測項目只有BIL檢測直接受脂血影響，本研究的納入樣本中同樣未發現樣本檢測受脂血影響。臨床上，最常見的導致脂血的原因主要是飲食、酒精攝入、糖尿病、高甘油三酯血癥、慢性腎衰竭、胰腺炎等。本研究發現混合的嚴重脂血血清與脂血指數具有良好的相關性。脂血指數即檢測血清樣本的濁度而非血清甘油三酯的濃度，脂血的干擾機制有光散射、不可溶的物質增多導致濁度增加和樣本內物質的極性與非極性增加三種，主要由乳糜微粒(CM)和極低密度脂蛋白(VLDL)導致。因此，在在臨床檢測中，通過濁度推算甘油三酯濃度是不可信的[9，10]。本研究在評估脂血指數的相關性時旨在利用樣本濁度評價其與儀器脂血指數(濁度)檢測的相關性。

通過全自動生化儀檢測血清指數判定溶血、黃疸和脂血經濟、高效，是生化檢測中有效的判定常見干擾的方法。

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Application of serum indices of ABBOTT c16000 automated analyzer in biochemistry detection

HUANGYi1，LIUDan2
(1.ClinicalLaboratory,SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople’sHospital,Chengdu610072，China；2.DepartmentofRespiratoryandCriticalCareMedicine,WestChinaHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041,China)

Objective To evaluate the role of serum indices in distinguishing the disturbance by hemolysis, lipemia and icterus of serum samples. Methods We collected 1,733 serum samples without hemolysis, lipemia and icterus identified by naked eye, and then analyzed serum indices of hemolysis, lipemia and icterus on ABBOTT ARCHITECT c16000 autoanalyzer using the Saline protocol. Results One hundred and twenty seven samples with interferences that could not be detected previously by naked eye were detected. These samples included 50 samples with hemolysis and 76 with icterus. Among the 126 samples interfered, 50 samples were influenced by hemolysis when determined serum ALT, AST, LDH, TBIL, DBIL, Mg2+, CO2, while none of the samples was influenced by icterus or lipemia when determined routine chemistry parameters. Conclusion Automated analyzers should be used for exclusion of pre-analytical errors induced by hemolysis, lipemia and icterus instead of visual detection.

ABBOTT； Automated analyzer； Serum index； Interference

四川省醫學科院·四川省人民醫院博士基金資助項目(編號：30305030563)

R446.11

A

1672-6170(2016)05-0077-04

2016-05-09；

2016-06-24)