康復(fù)新液對(duì)2，4-二硝基氯苯聯(lián)合醋酸誘導(dǎo)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的影響

2016-07-01 08:48:22王朋川張漢超李貴軻張成桂

大理大學(xué)學(xué)報(bào) 2016年4期

王朋川，何　苗，張漢超，李貴軻，4，李　輝，張成桂*

（1.云南省昆蟲(chóng)生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南大理　671000；2.藥用特種昆蟲(chóng)開(kāi)發(fā)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，云南大理　671000；3.大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理　671000；4.四川好醫(yī)生藥業(yè)集團(tuán)，成都　610000）

王朋川1，2，3，何苗1，2，張漢超1，2，3，李貴軻1，2，4，李輝1，2，3，張成桂1，2*

（1.云南省昆蟲(chóng)生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南大理671000；2.藥用特種昆蟲(chóng)開(kāi)發(fā)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，云南大理671000；3.大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000；4.四川好醫(yī)生藥業(yè)集團(tuán)，成都610000）

［摘要］目的：探討中藥康復(fù)新液經(jīng)灌腸給藥對(duì)2，4-二硝基氯苯聯(lián)合醋酸誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎的治療作用。方法：采用灌腸給藥方式對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）模型大鼠進(jìn)行治療，通過(guò)測(cè)定大鼠DAI指數(shù)、臟器指數(shù)，檢測(cè)血清IL-4、IL-10的表達(dá)水平，觀(guān)察結(jié)腸黏膜損傷程度及病理改變來(lái)評(píng)價(jià)康復(fù)新液對(duì)大鼠UC的影響。結(jié)果：陽(yáng)性藥美沙拉嗪及治療藥物康復(fù)新液均能改善UC大鼠結(jié)腸組織的病變程度，修復(fù)腸道受損黏膜，病理組織學(xué)評(píng)分明顯下降并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05），提示灌腸有明顯的治療效果；康復(fù)新液高、中、低劑量組均能不同程度的降低DAI評(píng)分、結(jié)腸指數(shù)，緩解黏膜水腫，提高IL-4（P＜0.01）、IL-10（P＜0.01）的表達(dá)水平。從黏膜損傷及病理組織學(xué)評(píng)分可見(jiàn)康復(fù)新液組促進(jìn)潰瘍面愈合的效果更優(yōu)。結(jié)論：康復(fù)新液對(duì)DNCB聯(lián)合醋酸誘導(dǎo)的UC大鼠有治療作用，可有效促進(jìn)UC大鼠結(jié)腸潰瘍的愈合，能有效的減輕UC大鼠的腹瀉癥狀（DAI評(píng)分降低）。

［關(guān)鍵詞］康復(fù)新液；美沙拉嗪；灌腸；潰瘍性結(jié)腸炎

［DOI］10. 3969 / j. issn. 2096-2266. 2016. 04. 005

潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC）是炎癥性腸病中的一種，其發(fā)病機(jī)制尚未明確，可能與遺傳、免疫、感染、精神、心理等因素有關(guān)，主要表現(xiàn)為連續(xù)性、彌漫性黏膜和黏膜下炎性改變，形成肉眼可見(jiàn)的糜爛和潰瘍〔1〕。目前臨床常用氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑等藥物治療，西藥以美沙拉嗪應(yīng)用最廣〔2〕，但長(zhǎng)期服用會(huì)有耐受、胃腸反應(yīng)等不良反應(yīng)。UC根據(jù)臨床表現(xiàn)屬中醫(yī)的“便血”“泄瀉”“腸風(fēng)”“臟毒”等范疇，我國(guó)自古就有治療“便血”和“泄瀉”的多種中藥藥方，中藥在治療急、慢性UC上也體現(xiàn)了不可比擬的優(yōu)勢(shì)，其中康復(fù)新液具有促進(jìn)機(jī)體創(chuàng)傷愈合、修復(fù)以及改善胃腸黏膜創(chuàng)面微循環(huán)，促進(jìn)肉芽組織增生等療效，且在UC臨床治療中有廣泛的應(yīng)用。UC病變可累及遠(yuǎn)端結(jié)腸，直腸給藥是治療UC直接有效的方法。與口服給藥相比，直腸給藥全身性副作用較小，局部藥物濃度高，更有利于治療。本文采用康復(fù)新液灌腸方式對(duì)UC大鼠進(jìn)行治療，以期觀(guān)察康復(fù)新液的療效，為進(jìn)一步探討其抗UC的機(jī)制及臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，雌雄各半，體重180～220 g，合格證號(hào)：SCXK（湘）2011-0003。

1.2藥品與試劑美沙拉嗪灌腸液（莎爾福）（批號(hào)：14J37，規(guī)格：60 g：4 g，德國(guó)福克制藥股份有限公司）；康復(fù)新液（美洲大蠊干燥蟲(chóng)體提取物）（批號(hào)：150327，規(guī)格：100 mL，四川好醫(yī)生攀西藥業(yè)有限責(zé)任公司）。無(wú)水乙醇、丙酮、冰乙酸、甲醛、2，4-二硝基氯苯、異氟烷、水合氯醛、隱血試劑盒；大鼠白細(xì)胞介素-4（IL-4）試劑盒、大鼠IL-10試劑盒（批號(hào)：20151124，欣博盛生物科技有限公司）。

1.3儀器奧地利安圖斯2010酶標(biāo)儀（奧地利安圖斯公司，型號(hào)：201）；醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)（成都泰盟，BI-2000）；電子天平（梅特勒-托利多，EL-104）；電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器有限公司，HWS-24）。

2　實(shí)驗(yàn)方法

2.1模型建立70只SPF級(jí)SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，挑選10只作正常對(duì)照組，剩余60只隨機(jī)分籠，做好標(biāo)記后，大鼠背部脫毛，用2%2，4-二硝基氯苯（DNCB）的丙酮溶液滴于大鼠背部脫毛區(qū)，1次/d，每次0.3 mL/只，連續(xù)14 d，正常飲食飲水。第15天（大鼠禁食不禁水24 h），異氟烷麻醉，用直徑3.0 mm的尼龍導(dǎo)管經(jīng)肛門(mén)插入8 cm處，注入0.1%DNCB乙醇（50%濃度）溶液0.25 mL/只，第16天同部位注入6%醋酸溶液0.7 mL，準(zhǔn)確記時(shí)10 s后用3 mL生理鹽水沖洗，造成DNCB聯(lián)合醋酸誘導(dǎo)的慢性大鼠UC模型〔3〕。

2.2分組及實(shí)驗(yàn)方法造模完成1周后，按照疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）評(píng)分〔4〕分層，剔除極輕度炎癥模型大鼠（以0～3分極輕度炎癥、4～6分輕度炎癥、7～9分中度炎癥、10～12分重度炎癥分層），其余大鼠按炎癥嚴(yán)重程度分層后再隨機(jī)分為模型對(duì)照組（灌腸給予生理鹽水，2.50 mL/kg）；美沙拉嗪灌腸組（0.40 g/kg）；康復(fù)新高、中、低劑量灌腸組（3.00 mL/kg、1.50 mL/kg、0.75 mL/kg）5個(gè)組，正常對(duì)照組（灌腸給予生理鹽水，2.50 mL/kg），各組大鼠10只，雌雄各半。造模完成1周后開(kāi)始給藥，1次/d，連續(xù)14 d。于造模結(jié)束后的第1、4、8、14、21天進(jìn)行DAI評(píng)分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)包括體質(zhì)量下降百分比、糞便性狀、隱血測(cè)試。

末次給藥后第2天，將大鼠用10%水合氯醛溶液（3 mL/kg）腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血、4℃靜置4 h后，3 500 r/min（4℃）離心10 min，取上清液并按試劑盒說(shuō)明測(cè)定IL-4、IL-10含量；取大鼠肝臟、脾臟、胸腺稱(chēng)重并計(jì)算臟器指數(shù)；取結(jié)腸測(cè)結(jié)腸長(zhǎng)度、寬度和結(jié)腸濕重，將取出的結(jié)腸平鋪于白瓷板上，肉眼觀(guān)察結(jié)腸黏膜損傷情況，并進(jìn)行結(jié)腸黏膜損傷評(píng)分（CMDI）（冰上操作），結(jié)腸放于10%中性福爾馬林中固定，常規(guī)石蠟包埋、切片、蘇木素-伊紅（HE）染色，光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察病理切片，并進(jìn)行病理組織學(xué)評(píng)分（HS）〔5〕。

3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1康復(fù)新液對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠DAI分值的影響

造模結(jié)束后多數(shù)大鼠出現(xiàn)大便隱血、腹瀉，但正常組大鼠活動(dòng)、進(jìn)食正常，無(wú)明顯體重減輕和腹瀉的現(xiàn)象，治療前，正常組與各造模組的DAI分值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），各造模組組間DAI分值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，治療期間各組的DAI評(píng)分隨給藥時(shí)間均有降低趨勢(shì)；第4天康復(fù)新液高劑量組的DAI評(píng)分與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），第8、14、21天，模型組DAI明顯高于美沙拉嗪組和康復(fù)新液高、中、低劑量組，第21天美沙拉嗪組的DAI分值與正常組無(wú)異，且與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其次是康復(fù)新液高、中、低劑量組。見(jiàn)表1。

3.2康復(fù)新液對(duì)大鼠臟器指數(shù)的影響各組胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中美沙拉嗪組對(duì)胸腺的免疫功能有抑制趨勢(shì)，而康復(fù)新液各組則顯示促進(jìn)的趨勢(shì)；在肝臟指數(shù)中，康復(fù)新液各組的肝臟指數(shù)較模型組降低，其中中、低劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。康復(fù)新液各組均能降低結(jié)腸指數(shù)，減輕結(jié)腸黏膜水腫現(xiàn)象，其中高、中劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），并且高劑量組效果與美沙拉嗪組相當(dāng)。見(jiàn)表2。

表1　康復(fù)新液對(duì)大鼠DAI分值的影響（n=10，±s）

注：與正常組比較**P＜0.01；與模型組比較#P＜0.05，##P＜0.01；與美沙拉嗪組比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

組別　劑量DAI分值正常對(duì)照組模型對(duì)照組美沙拉嗪組康復(fù)新高劑量組康復(fù)新中劑量組康復(fù)新低劑量組——0.40 g/kg 3.00 mL/kg 1.50 mL/kg 0.75 mL/kg 1 d 0.00±0.00##◆◆7.50±0.71**7.50±1.58**7.60±1.26**7.60±1.26**7.80±1.23**4 d 0.10±0.32##◆◆6.40±2.17**5.90±1.37**4.80±1.87**#5.40±1.71**6.30±2.26**8 d 0.00±0.00##◆◆5.30±2.26**4.60±1.35**4.10±2.28**5.10±2.38**5.30±2.54**14 d 0.90±0.99##◆◆4.10±1.91**3.20±1.14**3.50±1.51**3.10±1.29**3.50±1.58**21 d 1.30±1.06##3.10±2.08**◆1.60±1.17#2.40±1.71**2.40±0.84**2.70±1.57**◆

表2　康復(fù)新液對(duì)大鼠臟器指數(shù)的影響（n=10，±s）

注：與正常組比較**P＜0.01；與模型組比較#P＜0.05，##P＜0.01；與美沙拉嗪組比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

劑量組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組美沙拉嗪組康復(fù)新高劑量組康復(fù)新中劑量組康復(fù)新低劑量組——0.40 g/kg 3.00 mL/kg 1.50 mL/kg 0.75 mL/kg胸腺指數(shù)/（mg/g）1.11±0.18 1.01±0.62 0.94±0.43 1.29±0.50 1.17±0.54 1.09±0.78脾臟指數(shù)/（mg/g）2.47±0.40 2.83±1.17 3.42±1.57 2.92±1.96 3.06±1.06 3.21±1.22肝臟指數(shù)/（mg/g）23.79±1.95##27.91±3.35**◆24.35±2.34#25.50±2.41 23.44±2.20##23.81±3.70##結(jié)腸指數(shù)/（mg/g）5.18±0.22##7.01±0.96**◆◆5.69±0.54##5.57±0.57##5.95±1.70#6.53±1.38**

3.3康復(fù)新對(duì)大鼠結(jié)腸長(zhǎng)、寬及黏膜損傷評(píng)分的影響與正常組相比，模型組大鼠結(jié)腸變粗、長(zhǎng)度明顯縮短；治療藥物組結(jié)腸長(zhǎng)度較模型組長(zhǎng)，其中康復(fù)新液高劑量組結(jié)腸最長(zhǎng)（P＜0.01）。模型組的長(zhǎng)寬比明顯小于正常組，美沙拉嗪組（P＜0.01）和康復(fù)新液各組（P＜0.05）更接近正常組。見(jiàn)表3。

正常組大鼠結(jié)腸形態(tài)正常，黏膜光滑平整，皺襞紋理清晰，腸壁未增厚，腸組織間無(wú)黏連，未見(jiàn)黏膜充血、水腫、糜爛及潰瘍等病變。與正常對(duì)照組比較，模型組結(jié)腸黏膜充血、水腫，中、重度腸壁增厚及有重度糜爛、潰瘍，潰瘍呈橢圓形，底部可見(jiàn)少量淡黃色覆蓋物，邊緣充血水腫，模型組結(jié)腸黏膜CMDI顯著升高（P＜0.01）；美沙拉嗪組與模型組比腸黏膜較光滑，輕度充血，無(wú)水腫，結(jié)腸黏膜損傷評(píng)分明顯低于模型組（P＜0.01），模型組與美沙拉嗪組的結(jié)果提示模型復(fù)制成功，可以用于評(píng)價(jià)受試藥物的療效。康復(fù)新液高、中、低劑量組可見(jiàn)少量充血水腫，部分結(jié)腸可見(jiàn)輕度糜爛或潰瘍，其中康復(fù)新液高、中劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3　康復(fù)新液對(duì)大鼠結(jié)腸的影響（n=10，±s）

注：與正常組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較#P＜0.05，##P＜0.01；與美沙拉嗪組比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組美沙拉嗪組康復(fù)新高劑量組康復(fù)新中劑量組康復(fù)新低劑量組劑量——0.40 g/kg 3.00 mL/kg 1.50 mL/kg 0.75 mL/kg結(jié)腸長(zhǎng)度/cm 19.89±0.81##◆◆17.05±1.10**17.97±1.31**18.45±1.24*#17.32±1.27**17.15±2.05**長(zhǎng)寬比/（cm/cm）25.00±2.07##◆17.99±3.98**◆◆22.02±4.41*##21.55±2.17*#21.56±4.18*#21.06±4.64**#CMDI 1.40±0.70##3.10±0.74**◆◆1.90±0.74##2.30±0.48*#2.40±0.87**2.60±1.10**

3.4康復(fù)新液對(duì)大鼠血清IL-4、IL-10含量的影響與正常組相比，模型組大鼠血清IL-4和IL-10的表達(dá)顯著降低（P＜0.01），與模型組比較，美沙拉嗪組和康復(fù)新液高、中、低劑量組大鼠血清IL-4和IL-10表達(dá)均有顯著升高（P＜0.01），其中康復(fù)新液高劑量組大鼠血清IL-4升高最多，見(jiàn)表4。

表4　康復(fù)新液對(duì)大鼠血清IL-4、IL-10含量的影響（n=10，±s）

注：與正常組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較##P＜0.01；與美沙拉嗪組比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組美沙拉嗪組康復(fù)新高劑量組康復(fù)新中劑量組康復(fù)新低劑量組劑量——0.40 g/kg 3.00 mL/kg 1.50 mL/kg 0.75 mL/kg IL-4/（pg/mL）48.46±6.21##24.01±3.84**◆◆41.47±4.22##45.54±3.62##38.91±5.42*##32.75±3.39**##◆IL-10/（pg/mL）58.34±5.88##19.30±4.99**◆◆54.15±7.53##50.78±7.61##45.10±5.71*##◆38.84±2.50**##◆◆

3.5康復(fù)新液對(duì)大鼠結(jié)腸組織HS的影響正常組大鼠結(jié)腸黏膜鏡下觀(guān)察組織形態(tài)正常，腸壁結(jié)構(gòu)清晰，腺體分布均勻，未見(jiàn)充血、水腫、糜爛及潰瘍形成，間質(zhì)少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。模型組鏡下可見(jiàn)黏膜糜爛脫落、充血水腫，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，形成多個(gè)潰瘍?nèi)睋p，病理組織學(xué)評(píng)分明顯高于正常組（P＜0.01）；美沙拉嗪組，康復(fù)新液高、中劑量組結(jié)腸黏膜潰瘍數(shù)目明顯減少，底部可見(jiàn)纖維結(jié)締組織增生，充血水腫明顯減輕，伴少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，病理組織學(xué)評(píng)分明顯下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05），見(jiàn)表5及圖1。

表5　康復(fù)新液對(duì)大鼠結(jié)腸組織HS分值的影響（n=10，±s）

注：與正常組比較**P＜0.01；與模型組比較#P＜0.05，##P＜0.01；與美沙拉嗪組比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

組別　劑量HS評(píng)分正常對(duì)照組模型對(duì)照組美沙拉嗪組康復(fù)新高劑量組康復(fù)新中劑量組康復(fù)新低劑量組——0.40 g/kg 3.00 mL/kg 1.50 mL/kg 0.75 mL/kg上皮細(xì)胞評(píng)分0.30±0.67##◆◆3.50±0.53**◆◆2.30±0.48**##2.60±0.52**#2.60±0.52**#2.90±0.74**炎細(xì)胞浸潤(rùn)評(píng)分1.10±0.32##◆◆3.40±0.52**◆2.30±0.48**#2.60±0.52**#2.90±0.57**3.10±0.63**◆總分1.40±0.70##◆◆6.90±0.88**◆◆4.60±0.85**##5.20±0.63**#5.50±0.97**6.00±0.74**

圖1　康復(fù)新液對(duì)大鼠結(jié)腸病理組織的影響

4　討論

康復(fù)新液高、中、低劑量組均能在一定程度上降低UC大鼠的DAI評(píng)分、結(jié)腸指數(shù)，緩解結(jié)腸黏膜水腫現(xiàn)象，減輕炎癥、緩解黏膜水腫、修復(fù)潰瘍效果較優(yōu)，美沙拉嗪、康復(fù)新液經(jīng)灌腸給藥后能直接改善UC大鼠結(jié)腸組織病變程度，修復(fù)腸道損傷黏膜，減輕結(jié)腸的炎癥反應(yīng)。因IL-4具有抑制炎癥的特性，臨床研究發(fā)現(xiàn)UC患者IL-4分泌量減少，其對(duì)炎癥反應(yīng)的抑制作用減弱，自身免疫平衡遭到破壞，導(dǎo)致UC的發(fā)生發(fā)展〔6〕，實(shí)驗(yàn)中模型組IL-4含量明顯降低，其變化趨勢(shì)與臨床相符。康復(fù)新液各組都有升高IL-4的趨勢(shì)，且高劑量組表達(dá)水平高于美沙拉嗪組接近正常組，表現(xiàn)出增強(qiáng)抑制炎癥的作用。而IL-10主要由Th2型細(xì)胞分泌，研究〔7〕表明，UC患者活動(dòng)期的血清及黏膜組織的IL-10水平較正常對(duì)照組低，且和疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。實(shí)驗(yàn)中康復(fù)新液各組都能升高IL-10含量，其中高劑量組表達(dá)水平與美沙拉嗪相當(dāng)。

UC的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，根據(jù)其臨床表現(xiàn)屬中醫(yī)的“便血”“泄瀉”“腸風(fēng)”“臟毒”等范疇〔8〕。目前該病的臨床治療分為手術(shù)治療與非手術(shù)治療兩種〔9〕，但UC的治療總體以非手術(shù)治療為主，作為新一代的氨基水楊酸制劑美沙拉嗪由于療效確切而成為治療UC最常用的藥物〔10〕。本研究將臨床治療UC的中藥康復(fù)新液經(jīng)灌腸治療UC大鼠，以美沙拉嗪作為陽(yáng)性對(duì)照，觀(guān)察康復(fù)新液的治療效果，豐富了中藥灌腸治療UC的研究?jī)r(jià)值。研究表明康復(fù)新液具有祛腐生肌、改善胃腸黏膜創(chuàng)面微循環(huán)的作用，可加速機(jī)體病損組織修復(fù)再生，抑菌抗炎、消除水腫和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能〔11〕。通過(guò)灌腸給藥，提高了局部藥物濃度，延長(zhǎng)藥物在腸腔內(nèi)停留時(shí)間，更能充分發(fā)揮康復(fù)新液的作用。康復(fù)新液可通過(guò)提高模型大鼠血清IL-4和IL-10表達(dá)水平，起到抑制炎癥的作用，而美沙拉嗪主要通過(guò)抑制前列腺素和白三烯的形成達(dá)到抗炎目的〔12〕，二者在對(duì)緩解UC的癥狀都體現(xiàn)了各自的效果和優(yōu)勢(shì)，臨床治療中合理運(yùn)用能優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)地提高和改善UC患者的生活質(zhì)量。本文作者正開(kāi)展康復(fù)新液抗UC大鼠的機(jī)制研究，為臨床中藥灌腸治療UC的應(yīng)用提供依據(jù)。

［參考文獻(xiàn)］

〔1〕中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)炎癥性腸病學(xué)組.炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)（2012年·廣州）〔J〕.中華內(nèi)科雜志，2012，51（10）：818-831.

〔2〕譚啟文.潰瘍性結(jié)腸炎的藥物治療〔J〕.內(nèi)科，2009，4 （4）：610-612.

〔3〕李瑞東.化濁抑潰安腸湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清NO、TNF-ɑ含量及IL-6活性的影響〔J〕.中成藥，2009，31 （6）：934-935.

〔4〕周天羽，張威，林庶如，等.重組人小腸三葉因子對(duì)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用〔J〕.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，37（12）：1288-1290.

〔5〕易文，覃慧林，石孟瓊，等.四逆散對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠NF-κB激活及MIF和細(xì)胞因子表達(dá)的影響〔J〕.中藥材，2015，38（7）：1476-1480.

〔6〕WEST G A，MATSUURA T，LEVINE A D，et al. Interleukin- 4 in inflammatory bowel disease and mucosal immune reactivity〔J〕. Gastroenterology，1996，110（6）：1683-1695.

〔7〕張曉博，楊憲武，黨惠姣，等.潰瘍性結(jié)腸炎患者血清和結(jié)腸組織白細(xì)胞介素8和白細(xì)胞介素10的表達(dá)〔J〕.臨床薈萃，2010，25（3）：210.

〔8〕李乾構(gòu)，周學(xué)文，單兆偉.實(shí)用中醫(yī)消化病學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：446.

〔9〕張聲生.潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)診療共識(shí)意見(jiàn)〔J〕.中華中醫(yī)藥雜志，2010，25（6）：891-895.

〔10〕明荷，謝寒，何可.康復(fù)新液聯(lián)合美沙拉嗪治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效及對(duì)患者炎性因子和氧化應(yīng)激水平的影響〔J〕.世界華人消化雜志，2015，23（4）：684-688.

〔11〕焦春香，劉光明，周萍.天然藥物康復(fù)新的研究進(jìn)展〔J〕.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19（11）：2623-2624.

〔12〕次仁央宗，徐曉蓉，劉占舉.氨基水楊酸制劑的藥理學(xué)與臨床應(yīng)用〔J〕.臨床藥物治療雜志，2011，9（2）：33-37.

（責(zé)任編輯李楊）

Effect of Kangfuxin Solution to Ulcerative Colitis Rat Model Made by Treatment of 2，4-Dinitrochlorobenzene Combined with Acetic Acid

Wang Pengchuan1，2，3，He Miao1，2，Zhang Hanchao1，2，3，Li Guike1，2，4，Li Hui1，2，3，Zhang Chenggui1，2*
（1. Yunnan Provincial Key Laboratory of Entomological Biopharmaceutical R&D，Dali，Yunnan 671000，China；2. National-Local Joint Engineering Research Center of Entomoceutics，Dali，Yunnan 671000，China；3. College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan 671000 China；4. Good Doctor Pharmaceutical Group，Chengdu 610000，China）

〔Abstract〕Objective: To explore the effect of Kangfuxin solution through enema adimistration to ulcerative colitis rat model，which was made by the treatment of 2，4-dinitrochlorobenzene combined with acetic acid. Methods: Ulcerative colitis rats were treated by enema adimistration. For evaluating the effect of Kangfuxin solution on ulcerative colitis rats，the damaged intestinal mucosa and pathological changes were observed through the determination of DAI，viscera index of rats，the expression level of serum IL-4 and IL-10. Results: It was showed that positive medicine mesalazine and Kangfuxin solution both can improve the UC rats colon tissue lesions，repair the damaged intestinal mucosa，decrease histologic grade markedly（P＜0.01 or P＜0.05）and the effect of enema is obvious. The different doses of Kangfuxin solution can reduce DAI score，colon index and inflammation，alleviate mucosal edema and enhance IL-4（P＜0.01）and IL-10（P＜0.01）expression level. The effect of alleviating mucosal edema and promoting healing of ulcer surface of Kangfuxin group was improved. Conclusion: Kangfuxin solution plays an active role in treating the inflammation of UC rats which is induced by 2，4-dinitrochlorobenzene and acetic acid，promoting the healing of UC rats colon ulcer and reducing the diarrhea of UC rats（DAI score lower）.

〔Key words〕Kangfuxin；mesalazine；enema；ulcerative colitis

［中圖分類(lèi)號(hào)］R285

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A

［文章編號(hào)］2096-2266（2016）04-0017-05

［基金項(xiàng)目］國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81360679）；云南省昆蟲(chóng)生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室基金資助項(xiàng)目（2015DG030）

［收稿日期］2016-01-11［修回日期］2016-03-07

［作者簡(jiǎn)介］王朋川，碩士研究生，主要從事潰瘍性結(jié)腸炎藥理學(xué)研究.

*通信作者：張成桂，副教授，博士.

大理大學(xué)學(xué)報(bào)2016年4期