貝那普利抗氧化作用對(duì)血管損傷小鼠血管重構(gòu)的影響

姜麗杰　劉少奎

【目的】 目的 探索不同劑量的貝那普利對(duì)于血管損傷小鼠血管重構(gòu)的影響。方法 選取200只8周齡雄性C57BL/6小鼠， 在小鼠的股動(dòng)脈外套上聚乙烯套管， 造成血管損傷， 隨機(jī)分成正常對(duì)照組、手術(shù)對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組、貝那普利低劑量組和貝那普利高劑量組， 每組40只。分別于第14、28天取其股動(dòng)脈， 檢測(cè)內(nèi)膜、中膜面積及血管壁上超氧陰離子自由基（O2-）含量。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)第14、28天手術(shù)對(duì)照組增生內(nèi)膜面積明顯大于貝那普利高劑量組和貝那普利低劑量組（P<0.05）， 且三組組內(nèi)第28天增生內(nèi)膜面積明顯大于第14天（P<0.05）。五組中膜面積對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。股動(dòng)脈血管壁上O2-含量：第14天正常對(duì)照組和假手術(shù)對(duì)照組含量最低， 手術(shù)對(duì)照組含量最高；第28天除手術(shù)對(duì)照組外， 其余四組含量均有一定降低（P<0.05）， 而手術(shù)對(duì)照組含量較第14天顯著升高（P<0.05）。結(jié)論 貝那普利具有抗氧化作用， 能延緩血管內(nèi)皮損傷后的血管內(nèi)膜增生速度， 進(jìn)而抑制損傷血管的重構(gòu)。

【關(guān)鍵詞】 貝那普利；超氧陰離子自由基；抗氧化；血管內(nèi)皮

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.217

新近有研究指出心血管疾病的進(jìn)展與氧化應(yīng)激有顯著相關(guān)性[1]。目前， 對(duì)于活性氧的研究主要集中在動(dòng)脈粥樣硬化上， 而在內(nèi)膜增生導(dǎo)致的血管重塑的研究尚少。本研究為今后在臨床中更合理和有效地應(yīng)用貝那普利提供理論及實(shí)踐依據(jù)。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 實(shí)驗(yàn)分組、模型制作：取8周齡雄性C57BL/6小鼠200只， 隨機(jī)分成正常對(duì)照組、手術(shù)對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組、貝那普利低劑量組以及貝那普利高劑量組， 每組40只。其中貝那普利低劑量組的劑量為2 mg/（kg·d）；貝那普利高劑量組則為4 mg/（kg·d）。實(shí)驗(yàn)第14、28天隨機(jī)處死20只， 每組4只。將小鼠置于顯微鏡操作臺(tái)上， 將股動(dòng)脈與周圍組織分離， 在分離的股動(dòng)脈鞘外， 套上聚乙烯套管。剪取所需約2 mm長(zhǎng)的股動(dòng)脈標(biāo)本， 制成切片， 用于病理學(xué)檢測(cè)。

1. 2 方法 O2-測(cè)定：各組取6條2 mm長(zhǎng)股動(dòng)脈環(huán)放于Krebs-HEPES緩沖液中， 37℃孵育30 min。再將其放入裝有2 ml含250 μmol/L光澤精Krebs-HEPES緩沖液的閃爍瓶中， 用液閃儀進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 形態(tài)學(xué)分析 新生內(nèi)膜：實(shí)驗(yàn)后第14 、28 天正常對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組小鼠均未出現(xiàn)新生內(nèi)膜， 其余三組均出現(xiàn)新生內(nèi)膜， 且實(shí)驗(yàn)后第28 天明顯大于第14 天（P<0.05）；手術(shù)對(duì)照組的新生內(nèi)膜面積明顯大于貝那普利低劑量組和貝那普利高劑量組（P<0.05）。五組實(shí)驗(yàn)第14、28天的中膜面積對(duì)比， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2. 2 O2-含量變化 實(shí)驗(yàn)后第14、28天， 正常對(duì)照組的股動(dòng)脈O2-含量分別為：（1725.09±111.96）、（1581.37±247.55）nmol/

（mg·min）；假手術(shù)對(duì)照組分別為：（1822.10±117.50）、（1556.50±

187.72）nmol/（mg·min）；手術(shù)對(duì)照組分別為：（5742.57±121.12）、（7694.14±246.83）nmol/（mg·min）；貝那普利低劑量組分別為：（3681.07±301.18）、（2455.09±223.82）nmol/（mg·min）；貝那普

利高劑量組分別為：（3491.74±247.02）、（2455.09±223.82）nmol/

（mg·min）；第14、28天， 手術(shù)對(duì)照組含量高于其余四組（P<0.05）；正常對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組的含量較低。組內(nèi)第14、28天對(duì)比， 除手術(shù)對(duì)照組外， 其余四組均為第14天的含量更高（P<0.05）。

3 討論

國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道， 采用聚乙烯套管制作血管損傷模型， 在制造損傷的部位會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重炎癥， 第14天后會(huì)產(chǎn)生新內(nèi)膜， 第28天后則會(huì)出現(xiàn)內(nèi)膜明顯增生。人體動(dòng)脈硬化內(nèi)膜病變可能與上述病理變化具有顯著相關(guān)性[2， 3]。本研究中， 手術(shù)對(duì)照組第14、28天的血管內(nèi)膜增生面積高于貝那普利高劑量組和貝那普利低劑量組（P<0.05）， 而正常對(duì)照組第14、28天均未產(chǎn)生增生內(nèi)膜， 表明貝那普利可以有效抑制血管內(nèi)膜增厚。由于血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移是動(dòng)脈硬化的首要必備條件， 所以可以認(rèn)為血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）是血管重構(gòu)的重要因素， 合理控制AngⅡ?qū)τ谝种蒲苤貥?gòu)具有重要意義。本次檢測(cè)股動(dòng)脈O2-含量從高到低依次為手術(shù)對(duì)照組、貝那普利高劑量組、貝那普利低劑量組、正常對(duì)照組、假手術(shù)對(duì)照組；第14、28天只有手術(shù)對(duì)照組含量成增長(zhǎng)趨勢(shì)， 可見對(duì)小鼠用藥可以在一定程度上抑制活性氧的產(chǎn)生， 從而減輕氧化過激反應(yīng)。因此作者推測(cè)：活性氧在損傷血管的重塑過程中起著重要作用。活性氧的產(chǎn)生、釋放與內(nèi)皮損傷有關(guān)， 是內(nèi)皮損傷造成內(nèi)皮功能失調(diào)， 導(dǎo)致活性氧的產(chǎn)生和釋放， 而過量的活性氧又會(huì)對(duì)血管重構(gòu)、動(dòng)脈粥樣硬化起到一定的推動(dòng)促進(jìn)作用。

參考文獻(xiàn)

[1] 袁曉華， 劉士瑩， 曹麗， 等.貝那普利對(duì)高血壓合并糖耐量低減患者血管舒張功能的影響.山東醫(yī)藥， 2010， 50（8）：29-31.

[2] 李元梅.貝那普利對(duì)早期糖尿病腎病患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的影響.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)， 2009， 12（12）：1049-1050.

[3] 曹建雷， 熊世熙， 宋陳芳， 等.卡托普利與貝那普利對(duì)糖尿病大鼠心肌間質(zhì)重構(gòu)的影響.山東醫(yī)藥， 2008， 48（42）：13-15.

[收稿日期：2015-12-30]