離心法和虹吸法制備冷沉淀凝血因子的比較

王振財

（朝陽市中心血站，遼寧 朝陽 122000）

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離心法和虹吸法制備冷沉淀凝血因子的比較

王振財

（朝陽市中心血站，遼寧 朝陽 122000）

【摘要】目的 研究比較離心法和虹吸法制備冷沉淀對凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纖維蛋白原）含量。方法 將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋按照統計學原理袋數相同對照組和觀察組。對照組冰凍血漿使用離心法監測凝血因子，觀察組冰凍新鮮血漿使用虹吸法進行檢測，比較兩種檢測方法結果。結果 檢測結果顯示，虹吸法制備的Ⅷ因子含量多余離心法制備的含量，數據符合統計學差異（P ＜0.05）；與此同時，離心法檢測制備的Fbg含量均多于虹吸法制備的含量，數據符合統計學差異（P＜0.05）。結論 在檢測冷凍血漿凝血因子的時候，采用虹吸方法進行制備，質量標準更優于離心制備方法。虹吸制備方法操作簡單，受到人為因素比較少，儀器操作少，因而虹吸制備冷沉淀將取代離心方法，質量更值得信賴。

【關鍵詞】離心法；虹吸法；凝血因子

在醫學逐步發展的過程中，冷沉淀因子制備越來越受到重視，同時臨床使用量也在不斷增多。在治療甲型血友病、纖維蛋白原與血管型血友病方面具有明顯的效果。臨床所指的冷沉淀凝血因子是新鮮冰凍血漿在3 ℃左右融化后產生的血漿冷沉淀蛋白部分而冷上清則是冷沉淀制備過程中應當去除掉的血漿上清［1］。受到多種因素的影響，Ⅷ因子活性不強，半衰期非常容易失活。因而，選用較為可靠的制備方法非常重要。本文將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋為研究對象。研究比較離心法和虹吸法制備冷沉淀對凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纖維蛋白原）含量。

1 資料與方法

1.1 一般資料：將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋為研究對象。按照統計學原理袋數相同對照組和觀察組。兩組新鮮冰凍血漿并存在差異。

1.2 方法。虹吸法：觀察組血漿使用虹吸方法進行檢測。將新鮮冰凍的冷凍血漿放置在4T.6C型低溫恒溫循環水浴槽中，將空聯袋懸掛在箱的外面，并且要保持兩袋之間有一定的距離。在冰凍新鮮血漿逐漸融化的時候，受到虹吸的作用，融化的血漿會逐漸流向空袋中，隨后就會剩余（42±7）mL的白色結晶顆粒，而這些就是冷沉淀。在經過熱合后將其低溫保存進行備用。

離心法：對照組血漿采用離心的方法。將冰凍新鮮血漿放置在4 ℃冰箱中逐漸融化12～15 h。血漿在血漿袋中逐漸融化直至有小冰塊的時候將其取出，隨后采用低溫離心。離心操作10 min，離心轉速保持每分鐘2500轉，溫度控制在2 ℃。使用轉移袋經過無菌操作后將上層冷上清血漿分出，留下25 mL的血漿進行冷沉淀，經過熱合后進行低溫儲存使用。

1.3 統計學分析：本次實驗操作中所產生的數據都經過SPSS17.0的統計學處理。采用t檢驗原理來對資料比進行分析，產生的數據統一用χ2檢驗，檢驗結果的數據P＜0.05，差異具有統計學意義。

2 結 果

見表1。

表1 離心法與虹吸法制備冷沉淀凝血因子結果比較（±s）

表1 離心法與虹吸法制備冷沉淀凝血因子結果比較（±s）

離心法　　虹吸法　t　PⅧ因子含量　82.38±2.81　105.97±15.71　17.89　?。?.05 Fbg 含量　149.97±4.12　92.56±3.79　4.25　?。?.05

3 討 論

對臨床診療來說，冷沉淀制品質量的優劣將直接影響臨床治療效果。因而，在臨床治療的過程中選用合適的制備方法非常重要。從近年來臨床研究比較兩種方法的檢測結果與分析，就會發現虹吸制備方法相對比離心制備方法更具有優勢。在比較兩種方法檢測指標的時候發現，虹吸法制備的Ⅷ因子含量多余離心法制備的含量，數據符合統計學差異（P＜0.05）；與此同時，離心法制備的Fbg含量均多于虹吸法制備的含量，數據符合統計學差異（P＜0.05）。在分析的時候就會發現，離心方法制備冷沉淀是制備出速凍的血漿，隨后將新鮮冰凍血漿放到一定溫度范圍的冰箱過夜，在冷沉淀結晶后，進行離心分層。隨后就將血漿排除，剩下的就是結晶冷沉淀。血站制備冷沉淀的時候使用該種方法的不足之處表現在冰箱內溫度并不是恒定不變的，很難保證在制備的過程中，冰箱溫度一直都處于該范圍。溫度不斷波動，促使凝血因子活性降低，致使得出率下降。將冰凍血漿放置在冰箱過夜，時間較長就會有蛋白析出，這樣也會降低凝血因子得出率，同時還會對其活性造成一定影響。而虹吸法制備冷沉淀保證例在恒溫的狀態下，并且整個融化的過程中保證水分與血漿的充分接觸。CT-4T.6C水浴式低溫融化箱使用獨特循環水流在保證溫度均勻的情況下，還可以快速溶解。因為冷沉淀會在2～6 ℃會結晶，析出特性。因而，虹吸法就是利用這一特點，從新鮮冰凍血漿中進行提取沉淀。正是基于此，對于析出的沉淀而言，恒定溫度就是關鍵性的因素。與此同時，由于冷沉淀凝血因子并不是非常的穩定。因而在提取的時候時間越短越好［2］。

綜上所述，在制備冷凍血漿凝血因子的時候，采用虹吸方法進行制備，質量標準更優于離心制備方法。虹吸制備方法操作簡單，受到人為因素比較少，儀器操作少，因而虹吸制備冷沉淀將取代離心方法，質量更值得信賴。

參考文獻

［1］ 徐利強，李建，周忠英，等.冷沉淀凝血因子制備工藝改良［J］.中國生化藥物雜志，2011，32（12）:145-146.

［2］ 楊江存，理芒會，于青，等.新鮮冰凍血漿融化后不同放置時間凝血因子的變化［J］.中國輸血雜志，2013，18（22）:211-212.

中圖分類號：R457.1

文獻標識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）02-0031-01