蒲秀峰,肖新萍,汪霞平
(1.甘肅天水岐黃藥業有限責任公司,甘肅 天水 741018;2.天水市第一人民醫院,甘肅 天水 741018)
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山麥萊中總黃酮含量的測定方法
蒲秀峰1,肖新萍2,汪霞平1
(1.甘肅天水岐黃藥業有限責任公司,甘肅 天水 741018;2.天水市第一人民醫院,甘肅天水 741018)
摘要:山麥萊飲品是由甘肅天水岐黃藥業有限責任公司研發的保健飲品,它繼承了保和丸和山楂丸的組方特點,能消食、導滯、和胃,其主要功效成分為黃酮類。就此對新開發的山麥萊飲品中總黃酮的測定方法予以探討,該法系紫外可見分光光度法 。該檢測方法專屬性、針對性強,結果準確可靠。
關鍵詞:山麥萊保健飲品;總黃酮;測定
隨著生活水平的提高,罹患消化不良和肥胖的人群越來越多。而中醫中藥對消化不良的治療具有較好療效,甘肅天水岐黃藥業有限責任公司聘請名老中醫胡伯虎教授依據中醫藥養生保健的優勢,開發源自中醫食療的有效保健飲品—山麥萊保健飲品。本品處方為山楂、炒麥芽、炒萊菔子、陳皮,其中山楂為君、炒麥芽為臣、炒萊菔子為佐、陳皮為使,該方繼承了保和丸和山楂丸的組方特點,配方合理,既有對古方的繼承又有創新,而且所選藥材都是藥食兩用的材料,本產品能消食、導滯、和胃,且作用平和,功效肯定。其主要功效成分為黃酮類,本文就新開發的山麥萊飲品中總黃酮的測定方法予以探討。該方法系紫外可見分光光度法,用蘆丁對照品配制成梯度標準溶液,山麥紅溶液配制成待測液,采用聚酰胺粉吸附,然后轉入層析柱。先用20ml甲苯洗,甲苯液棄去,然后用甲醇洗脫黃酮,定容至25mL。在360nm波長下,測定梯度標準溶液吸光度,建立標準曲線。再測定待測液吸光度,從標準曲線查出待測液濃度,最后根據配制溶液時的稀釋倍數計算出山麥紅的總黃酮含量。該檢測方法專屬性、針對性強,結果準確可靠;精密度良好;穩定性良好;重復性好;準確度高。
1.1材料
山楂、炒麥芽、萊菔子、陳皮適量,實驗所用藥材均購于天水天森藥業公司,符合2015年版《中華人民共和國藥典》(一部)相關規定。
1.2試劑
蘆丁對照品購于中國藥品生物制品檢定所;聚酰胺粉購于上海中秦化學試劑有限公司;其余試劑為分析純。
1.3儀器
JYT-1架盤藥物天平 (上海光正醫療儀器有限公司馬頭牌);AS系列超聲波清洗機 (天津奧特賽恩斯儀器有限公司);HH-6型智能數顯恒溫水浴鍋(鞏義市予華儀器有限責任公司);干燥器(國營上海醫療廠);BP211D分析天平 (德國賽多利斯公司生產):UV-5300PC型紫外可見分光光度計 (上海元析儀器有限公司)。
2.1樣品的制備
稱取山楂50g,炒麥芽15g,炒萊菔子20g,陳皮10g,加十倍量的水,浸泡2h,超聲煎煮40min,過濾,藥渣再加10倍量水,過濾,合并濾液定容至50mL。
2.2樣品穩定性試驗
取合并濾液測定,得黃酮RSD=0.865%。
2.3樣品測定
稱取10mL的試樣,加乙醇定容至25mL,搖勻后,超聲提取20min,放置,吸取上清液1.0mL,于蒸發皿中,加1g聚酰胺粉吸附,于水浴上揮去乙醇,然后轉入層析柱。先用20mL甲苯洗,甲苯液棄去,然后用甲醇洗脫黃酮,定容至25mL。此液于波長360nm測定吸收值。同時以蘆丁為標準品,測定標準曲線,求回歸方程,計算試樣中總黃酮含量。
2.4標準曲線
精密稱取蘆丁對照品5.0mg,加甲醇溶解并定容至100ml,搖勻,準確吸取該液0mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL于10mL比色管中,加甲醇至刻度,搖勻,于波長360nm下比色測定其吸光度。以濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,制定標準曲線,計算相關系數為R=0.9993,見表1及如圖1所示。

表1 蘆丁濃度與吸光度

圖1 繪制的標準曲線
2.5精密度試驗
取樣品溶液,分別測定6次,得黃酮RSD= 0.8%。
2.6線性范圍
在本實驗條件下,黃酮濃度在0-200ug/mL的范圍內,線性關系良好,R2=0.9993。
X=A×V2×100/V1×M×1000
式中:X——試樣中總黃酮的含量,mg/100g;
A——由標準曲線算得被測液中黃酮量,μg;
M——試樣質量,g;
V1——測定用試樣體積,mL;
V2——試樣定容總體積,mL。
計算結果保留二位有效數字。
黃酮類(flavonoids)是一類廣泛存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)結構的化合物,多以苷類形式存在。本文建立了以紫外光譜法測定山麥萊口服液中總黃酮含量的方法,樣品測定結果表明,超聲提取的方法制備山麥萊口服液該法簡便易行,線性范圍寬、專屬性、針對性強,結果準確可靠。
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