脂代謝異常實證病人載脂蛋白E基因型分布及與血清胰島素水平的關系

嚴　羽，任煒煒，蔣衛民

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脂代謝異常實證病人載脂蛋白E基因型分布及與血清胰島素水平的關系

嚴羽1，任煒煒1，蔣衛民2

1.南京中醫藥大學(南京 210029)；2.南京中醫藥大學附屬醫院

摘要：目的探討中醫辨證為實證的脂代謝異常病人載脂蛋白E(ApoE)基因型分布及與血清胰島素水平的關系。方法采用全序列基因測序法檢測119例中醫辨證為實證的脂代謝異常病人和100名健康體檢者ApoE基因型，并檢測脂代謝異常病人空腹血糖、胰島素水平，分析其與ApoE基因多態性的相關性。結果中醫辨證為實證的脂代謝異常病人E3/3基因型及ε3等位基因頻率顯著低于健康體檢者(P<0.01)，而E3/4基因型及ε4等位基因頻率則顯著高于健康體檢者(P<0.01)；E3/4+E4/4型空腹胰島素顯著高于E2/2+E2/3型(P<0.05)。結論ε4等位基因可能是中醫辨證為實證的脂代謝異常病人的易感基因，且含ε4等位基因者具有更高的空腹胰島素水平。

關鍵詞：脂代謝異常；載脂蛋白E；基因多態性；胰島素；中醫辨證

載脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)是脂蛋白的結構成分，其具有結合和運轉脂質的功能，在血脂代謝中發揮重要作用[1]。在前期納入的212例脂代謝異常病人的研究中發現，脂代謝異中醫辨證特點與ApoE基因多態性可能相關[2]，同時ApoE基因差異分布在胰島素抵抗病人中同樣存在[3]。本研究進一步探討中醫辨證為實證的脂代謝異常病人ApoE基因分布及與血清胰島素水平的關系。

1資料與方法

1.1研究對象119例中醫辨證為實證的脂代謝異常病人全部選自江蘇省中醫院心臟科門診和住院病人，其中門診病人62例，住院病人57例。脂代謝異常診斷參照《中國成人血脂異常防治指南》2007年版[4]，男54例，年齡 34歲～78歲(50.3歲±12.7歲)，女65例，年齡 45歲～80歲(51.3歲±11.3歲)，所有病例均排除糖尿病糖尿病和繼發性脂代謝異常病人。同時選擇年齡、性別匹配的100名無血緣關系的健康江蘇地區漢族人群(男52例，女48例)，年齡(50.2±15.1)歲。

1.2中醫辨證分型標準參照《中藥新藥臨床研究指導原則》提出的中醫高脂血癥診斷分型標準[5]。

1.3觀察指標及檢測方法采用全序列基因測序法檢測ApoE基因多態性[3]。所有脂代謝異常病人空腹12 h后采集2 mL靜脈血，由江蘇省中醫院檢驗科采用全自動生化儀測定空腹血糖(FBG)和空腹胰島素(FINS)水平。

2結果

2.1脂代謝異常實證病人及健康體檢者ApoE表型分布及等位基因頻率比較119例中醫辨證為實證的脂代謝異常病人檢出三種純合子，分別為E2/2、E3/3、E4/4；三種雜合子分別為E2/3、E2/4、E3/4，100名健康體檢者則未檢出E2/2和E4/4純合子，余純合子和雜合子的檢出則與實證病人相同，脂代謝異常病人及健康體檢者ApoE基因分布符合Hardy-Weinberg(H-W)平衡法則，提示各組數據分布具有群體代表性。實證脂代謝異常病人E3/3基因型及ε3等位基因頻率均顯著低于健康體檢者(χ2=19.58，P<0.01；χ2=24.01，P<0.01)，而E3/4基因型及ε4等位基因頻率則顯著高于健康體檢者(χ2=14.59，P<0.01；χ2=24.6，P<0.01)，說明實證脂代謝異常病人較健康人群ApoE基因型及等位基因分布存在差異。詳見表1。

表1　高脂血癥實證病人及健康體檢者ApoE表型分布及等位基因頻率比較 　例(%)

2.2ApoE不同基因型實證脂代謝異常病人血清血糖、胰島素水平比較因納入樣本有限，檢出的部分基因型含量很低，參照相關文獻[6]將意義相近的基因型進行合并分析，結果E3/4+E4/4基因型FINS水平與E3/3基因型比較差異無統計學意義，但顯著高于E2/2+E2/3基因型(P<0.05)，提示FINS水平含ε4等位基因者顯著高于含ε2等位基因者，而3組FBG比較差異無統計學意義。詳見表2。

表2　不同ApoE基因型FBG、FINS水平比較(±s)

3討論

脂代謝異常是動脈粥樣硬化性疾病重要的風險因素，而胰島素抵抗及代償性的高胰島素血癥是高脂血癥常合并伴有的代謝異常，兩者的重疊發生則更進一步增加了心血管事件的風險。深入研究脂代謝異常和胰島素抵抗兩者復雜的相關性是臨床積極控制代謝紊亂的迫切需求。作為脂蛋白配體、結構與功能蛋白的載脂蛋白E，由于不同等位基因所編碼的3種異構體具有不同的與其自身受體及低密度脂蛋白(LDL)受體的結合能力，對脂質代謝發揮著重要影響[7]。國內不同種族人群研究結果均顯示：高脂血癥病人與同種族健康人群存在ApoE基因型及等位基因分布的差異[8]，而對江蘇漢族胰島素抵抗人群進行研究也發現，ApoE基因可能是胰島素抵抗重要的易感基因[3]，Dembinskakiec等[9]研究結果提示在高胰島素血癥病人中E4/3基因型的頻率明顯高于正常胰島素水平組。

脂代謝異常是西醫學概念，中醫古代文獻一般以“膏濁”“血濁”“痰濁”記載，如《靈樞·逆順肥瘦》有曰：“……此人重則氣澀血濁”，中醫臨床辨證多從虛實論治，且以實證居多。脂代謝異常雖與后天飲食、運動等生活方式密切相關，但其發生與遺傳背景也具有重要關系，探尋中醫虛實辨證的遺傳學基礎也將對進一步提高中醫的臨床療效具有重要意義。本研究采用了較以往免疫印跡、雙相電泳等方法更為可靠的全序列基因測序法，檢測119例中醫辨證為實證的脂代謝異常病人及100名健康體檢者ApoE基因型，并分析不同基因分布者血糖及胰島素水平，結果可以發現含ε4等位基因的實證脂代謝異常者空腹胰島素水平顯著高于含ε2等位基因者，提示含ε4等位基因的中醫辨證為實證的脂代謝異常病人可能具有更為明顯的胰島素抵抗特點。本研究為在冠心病、脂代謝異常、胰島素抵抗等疾病表現為實證的病人中尋找共同的遺傳學基礎提供了可能，當然，由于時間有限，且測序法經費高昂等原因，納入的總體樣本含量偏小，因此得出的初步結論是否可靠還有待于今后大樣本人群研究的證實。

參考文獻：

[1]Saito H，Dhanasekaran P，Baldwin F，et al.Effects of polymorphism on the lipid interaction of human apolipoprotein E[J].J Biol Chem，2003，278(42)：40723-40729.

[2]蔣衛民，朱長樂，劉健，等.212例高脂血癥患者中醫證候特點與ApoE基因多態性的相關性分析[J].中華中醫藥雜志，2012，27(5)：1458-1460.

[3]顧萍，蔣衛民，王堅.載脂蛋白E基因多態性與高血壓胰島素抵抗的相關性研究[J].中華實用診斷與治療雜志，2009，23(3)：214-216.

[4]中國成人血脂異常防治指南制定聯合委員會.中國成人血脂異常防治指南[J].中華心血管病雜志，2007，35(5)：390-413.

[5]中華人民共和國衛生部.中藥新藥臨床研究指導原則[M].北京：人民衛生出版社，2002：85-89.

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[8]錢凈，胡大春，趙曉麗，等.昆明地區漢族人群載脂蛋白E基因多態性頻率分布及與高脂血癥患者關系的研究[J].實驗與檢驗醫學，2010，28(2)：107-110.

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(本文編輯郭懷印)

基金項目：江蘇省自然科學基金資助課題(No.BK20131456)；江蘇省中醫藥局資助課題(No.LZ13030)；江蘇高校優勢學科建設工程資助項目(No.PAPD)

通訊作者：蔣衛民，E-mail：jwm0410@163.com

中圖分類號：R589R259

文獻標識碼：B

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.11.022

文章編號：1672-1349(2016)11-1252-02

(收稿日期：2016-01-16)

·心血管病臨床觀察/研究·