VEGF、RANTES、sflt-1及MCP-1在子宮內膜異位癥合并代謝綜合征的表達及意義

胡倩倩，嚴　浩，李　盛

(1.江漢大學附屬醫院婦產科，湖北 武漢 430015；2.湖北省腫瘤醫院婦瘤科，湖北 武漢 430079)

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VEGF、RANTES、sflt-1及MCP-1在子宮內膜異位癥合并代謝綜合征的表達及意義

胡倩倩1，嚴浩2，李盛1

(1.江漢大學附屬醫院婦產科，湖北 武漢 430015；2.湖北省腫瘤醫院婦瘤科，湖北 武漢 430079)

[摘要]目的探究血管內皮生長因子(VEGF)、T細胞表達和分泌的調節性激活因子(RANTES)、血管內皮生長因子可溶性受體(sflt-1)及單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)在子宮內膜異位癥合并代謝綜合征的表達及意義。方法選取2012年1月至2015年4月期間內在江漢大學附屬醫院婦產科接受治療的子宮內膜異位癥合并代謝綜合征240例患者作為研究組，同時選擇輸卵管系膜囊腫、卵巢良性腫瘤或是宮頸病變患者210例作為對照組。研究組患者根據病變部位、大小以及病灶粘連程度，分為Ⅰ～Ⅳ期，Ⅰ～Ⅱ期患者130例，Ⅲ～Ⅳ期患者110例。采用ELISA對患者血清及腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表達表達水平進行檢測，對比不同組別患者各項指標。結果研究組患者血清及腹腔液內VEGF、sflt-1、MCP-1和RANTES表達水平均高于對照組，組間數據差異有統計學意義(血清：t值分別為119.385、32.115、13.521、104.776，腹腔液內：t值分別為94.576、42.023、14.762、35.738，均P=0.000<0.05)；在Ⅰ-Ⅱ期組與Ⅲ-Ⅳ期組指標對比中，前者VEGF、sflt-1和RANTES指標在血清和腹腔液中表達水平均低于后者，數據有顯著統計學差異(血清：t值分別為78.152、6.151、49.337，腹腔液內：t值分別為73.424、8.424、23.385，均P=0.000<0.05)；但MCP-1數據比較無統計學意義(P>0.05)。結論在子宮內膜異位癥合并代謝綜合征與檢測指標包括sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES的表達水平存在密切關系，表明上述因子與疾病發生發展機制存在關聯，因此可以在臨床上將上述指標作為子宮內膜異位癥合并代謝綜合征的輔助檢測生化指標。

[關鍵詞]子宮內膜異位癥；代謝綜合征；血管內皮生長因子可溶性受體；單核細胞趨化蛋白-1；血管內皮生長因子；T細胞表達和分泌的調節性激活因子

在生育年齡婦女中，子宮內膜異位癥發病率較高，主要臨床表現為經量增加、持續性下腹疼痛、性交痛、痛經、經期較長，嚴重時甚至出現患者卵巢功能減退、不孕。有臨床研究報道稱[1]采用生物標志物檢測對子宮內膜異位癥的早期診斷、病情預測、療效評估有重要作用。代謝綜合征患者機體內調節血糖水平機制受到損傷同時存在胰島素抵抗，導致卵巢顆粒細胞瘤相關基因表達障礙，患者出現子宮內膜病變，隨后出現生殖能力降低。有研究結果顯示[2]，子宮內膜異位癥發生機制與血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)存在正相聯系，與血管內皮生長因子可溶性受體(soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1，sflt-1)存在負相聯系[3]。單核細胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1，MCP-1)與機體內炎癥免疫調節機制存在聯系，患者免疫功能異常與子宮內膜異位癥發病機制存在聯系。有研究報道稱患者機體內膜MCP-1表達水平高于正常人群，且在不同時期內表達水平存在差異[4]。T細胞表達和分泌的調節性激活因子(regulated upon activation, normal T cell expressed and secreted，RAN-TES)與機體內炎性反應和細胞生長分化存在關聯。臨床上對子宮內膜異位癥合并代謝綜合征患者上述因子水平間聯系報道較少，本次研究主要探究子宮內膜異位癥合并代謝綜合征患者血清及腹腔液內sflt-1、VEGF、MCP-1、RAN-TES表達水平及臨床意義，報道如下：

1資料與方法

1.1納入標準

①研究對象均符合2007年中華醫學會婦產科學分會子宮內膜異位癥協作組制定《子宮內膜異位癥的診斷與治療規范》中的子宮內膜異位癥的診斷標準[5]，具備相關臨床表現和影像學診斷資料；②患者年齡不超過50歲；③BMI超過25kg/m2；④空腹血糖水平高于6.1mmol/L；⑤本研究經患者及其家屬知情同意并簽署知情同意書，并經醫院倫理委員會批準。

1.2排除標準

①存在肝腎疾病、惡性腫瘤；②有服用免疫抑制劑、性激素及非甾體類抗炎藥服用史；③近6個月內哺乳或妊娠史；④精神疾病、風濕、類風濕或其他免疫疾病。

1.3一般資料

選擇2012年1月至2015年4月期間因子宮內膜異位癥入江漢大學附屬醫院接受腹腔鏡手術治療的240例患者作為研究組，具有典型臨床體征及病理診斷結果等依據，并符合納入標準及排除標準。患者年齡在16～45歲范圍內，平均年齡(33.7±9.21)歲；月經初潮平均年齡(13.2±3.67)歲，月經平均周期(27.6±4.78)d，月經持續時間(7.2±1.23)d；平均孕次(1.1±0.12)次；體重指數(BMI)為(29.2±5.12) kg/m2；CA125陽性患者155例，占64.58%；出現子宮肌瘤合并癥患者62例，占25.83%；痛經患者126例，占52.5%；出現非經期下腹痛患者42例，占17.5%；存在性交痛患者6例，占2.5%。根據患者病變大小、位置以及粘連狀況，將子宮內膜異位癥劃分為Ⅰ～Ⅳ期，Ⅰ～Ⅱ期患者130例，Ⅲ～Ⅳ期110例。對照組患者選擇輸卵管系膜囊腫、宮頸病變以及卵巢良性腫瘤等病例，共210例；年齡范圍13～48歲，平均年齡(34.2±9.32)歲；月經初潮平均年齡(13.5±3.45)歲，月經平均周期(27.8±4.34)d，月經平均天數(7.1±2.31) d；平均孕次(1.2±1.12)次；BMI為(28.6±3.24) kg/m2；CA125陽性患者38例，占18.10%。兩組患者在年齡(t=0.571，P=0.568>0.05)、初潮年齡(t=0.889，P=0.374>0.05)、月經周期(t=0.462，P=0.644>0.05)、月經時間(t=0.583，P=0.560>0.05)、孕次(t=1.374，P=0.170>0.05)以及體重指數(t=1.461，P=0.145>0.05)等指標對比，數據無統計學差異，兩組均衡可比。

1.4觀察指標

腹腔及血清檢測 ①腹腔液：采用負壓方式將患者腹腔液吸引出來，腹腔液無血液污染，取腹腔液5mL置于無菌離心管中，在轉速2 500r/min下進行15min離心，后取離心樣本的上清液將其置于-70℃下保存備用；②血清：患者清晨空腹抽取5mL軸正中靜脈血，同樣在轉速2 500r/min下進行15min離心，后取離心樣本的上清液將其置于-70℃下保存備用；③指標檢測的操作方法：檢測主要采用ELISA法進行，結果測定方法為在450nm波長下，檢測各反應孔OD值大小，根據吸光值可在坐標上對應其相應濃度。

1.5統計學方法

2結果

2.1 血管內皮生長因子、血管內皮生長因子可溶性受體表達情況

檢測結果顯示，研究組患者血清及腹腔液內VEGF、sflt-1表達水平均高于對照組，組間數據差異有統計學意義(血清：t值分別為119.385和32.115，腹腔液內：t值分別為94.576和42.023，P=0.000<0.05)；在Ⅰ-Ⅱ期組與Ⅲ-Ⅳ期組指標對比中，VEGF和sflt-1指標在血清和腹腔液中表達水平均低于后者，數據有顯著統計學差異(血清：t值分別為78.152和6.151，腹腔液內：t值分別為73.424和8.424，P=0.000<0.05)，見表1。

表1　　兩組VEGF、sflt-1表達情況差異

注：*與對照組比較，P<0.05；#與Ⅲ～Ⅳ期比較，P<0.05。

2.2 單核細胞趨化蛋白-1、分泌的調節性激活因子表達情況

研究組患者MCP-1、RANTES在血清和腹腔液內表達水平均顯著高于對照組患者，數據有統計學差異(血清：t值分別為13.521和104.776，腹腔液內：t值分別為14.762和35.738，P=0.000<0.05)；Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期數據比較，RANTES指標在血清和腹腔液中表達水平均低于后者，數據有顯著統計學差異(血清：t=49.337，腹腔液內：t=23.385，P=0.000<0.05)；但MCP-1數據比較無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2　　兩組MCP-1、RAN-TES表達情況差異

注：*與對照組比較，P<0.05；#與Ⅲ～Ⅳ期比較，P<0.05。

3討論

3.1子宮內膜異位癥研究意義

在育齡期婦女中，子宮內膜異位癥是一種常見多發病，雖然屬良性疾病，但同時存在遠處轉移、種植等惡性病變的特質，因此，子宮內膜異位癥患者往往出現不孕、疼痛等伴隨表現，對其正常生活狀態造成嚴重影響[6-8]。目前，臨床上對子宮內膜異位癥的發病機制并不了解，多項研究報道稱其病理學上主要是隨激素變化造成患者異位內膜組織出現周期性出血，伴內膜周圍組織存在粘連或是增生，在患者內膜病變區內，存在紫褐色小泡或是斑點，進一步發展，可能出現紫藍色實質性包塊、結節等。子宮內膜異位癥合并代謝綜合征患者由于機體內出現血脂紊亂癥狀，同時伴胰島素抵抗，對卵巢分泌功能造成嚴重影響，機體內激素分泌失調，使得患者臨床表現更加顯著。有相關研究結果顯示，子宮內膜異位癥發病機制與患者基因表達、炎性介質合成和分泌以及組織血供存在密切關系[9-11]。本研究主要檢測子宮內膜異位癥合并代謝綜合征患者血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表達水平，探究上述因子在疾病發病過程中存在臨床意義。

3.2 血管內皮生長因子、血管內皮生長因子可溶性受體表達情況

在子宮內膜異位研究機制中，血管形成是重要研究方向，而生物學研究機制中，VEGF與sflt-1能夠有效促進患者機體內子宮內膜間質細胞增殖。有研究報道稱對34例子宮內膜異位癥患者臨床研究結果顯示在分泌期和增生期VEGF表達水平失去原有正常的周期性變化，呈顯著高表達狀態，組織病理學研究結果表明子宮內膜異位癥患者異位組織常存在微血管密度增加表現[12]。本次研究結果顯示子宮內膜異位癥患者機體內sflt-1和VEGF表達水平顯著高于對照組患者，且病理水平在Ⅲ～Ⅳ期患者表達高于Ⅰ～Ⅱ期患者，數據均有顯著統計學差異(P<0.05)，這一研究結果表明sflt-1與VEGF與子宮內膜異位癥發病密切相關，且隨病情越嚴重，表達水平越高。

3.3 單核細胞趨化蛋白-1、分泌的調節性激活因子表達情況

臨床上對MCP-1研究較為充分，主要與機體內免疫、炎癥調控存在密切關系。MCP-1表達水平提高，能夠對VEGF表達起到正相調節作用，主要能夠誘導機體內皮細胞遷移，使其參與血管生成這一生理活動中[13]。RANTES主要在機體內發揮激活T細胞，趨化、激活白細胞等生理作用。有相關研究結果表明，子宮內膜異位的炎癥嚴重程度和疼痛評分與RANTES表達水平存在正相關關系(P<0.05)。這一結果表明，子宮內膜破碎后產生的碎片進入患者腹腔內，產生炎癥反應與RANTES表達水平增加存在聯系。本研究表明，子宮內膜異位癥組MCP-1和RANTES水平均較對照組高(P<0.05)，Ⅲ～Ⅳ期RANTES水平高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05)，而MCP-1間差異無統計學意義(P>0.05)。

綜上所述，子宮內膜異位并發代謝綜合征與機體內sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表達水平存在密切關系，與患者疾病發生發展存在關聯，因此，可以在臨床上將上述指標作為子宮內膜異位癥合并代謝綜合征檢測指標。

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[專業責任編輯：張忠明]

[收稿時間]2015-11-23

[作者簡介]胡倩倩(1980-)，女，主治醫師，主要從事婦產科臨床相關工作。

[通訊作者]李盛，副主任醫師。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.04.016

[中圖分類號]R725.1

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-5293(2016)04-0463-03

Expression and significance of VEGF, RANTES, sflt-1 and MCP-1 in patients with endometriosis associated with metabolic syndrome

HU Qian-qian1, YAN Hao2, LI Sheng1

(1.Department of Obstetrics and Gynecology, Affiliated Hospital of Jianghan University, Hubei Wuhan 430015, China;2.Department of Gynecologic Oncology, Cancer Hospital of Hubei, Hubei Wuhan 430079, China)

[Abstract]Objective To explore the expression and significance of vascular endothelial growth factor (VEGF), soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1(sflt-1), regulated upon activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES) and MCP-1 in patients with endometriosis associated with metabolic syndrome. Methods From January 2012 to April 2015, 240 cases of patients with endometriosis combined with metabolic syndrome who received treatment in Affiliated Hospital of Jianghan University were selected as study group, while 210 cases of patients with tubal cyst, ovarian benign tumor or cervical lesions were selected as control group. According to lesion site, size and adhesion degree, patients in the study group were divided into groups of stage Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ. There were 130 patients at stage Ⅰ-Ⅱ and 110 patients at stage Ⅲ-Ⅳ. The expression levels of RANTES, MCP-1, VEGF and sflt-1 in the serum and peritoneal fluid of patients were detected by ELISA, and the expressions of them were compared among different groups. Results The expression levels of RANTES, MCP-1, sflt-1 and VEGF in the study group were higher than those in the control group, and the differences were statistically significant (tserumvalue was 119.385, 32.115, 13.521 and 104.776, respectively, tperitoneal fluidvalue was 94.576, 42.023, 14.762 and 35.738, respectively, all P=0.000<0.05). The expressions of sflt-1, RANTES and VEGF in serum and peritoneal fluid of patients at stage I-II were significantly lower than those of patients at stage Ⅲ -Ⅳ (tserumvalue was 78.152, 6.151, and 49.337, respectively,tperitoneal fluidvalue was 73.424, 8.424 and 23.385, respectively, all P=0.000<0.05), but there was no significant difference in MCP-1 (P>0.05). Conclusion There is a close relationship between sflt-1, MCP-1, VEGF and RANTES levels with endometriosis combined with metabolic syndrome, which indicates that these factors are associated with the pathogenesis of the disease.

[Key words]endometriosis; metabolic syndrome; vascular endothelial growth factor soluble receptor; monocyte chemotactic protein 1(MCP-1); vascular endothelial growth factor (VEGF); regulated upon activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES)