廣東地區(qū)育齡婦女人細(xì)小病毒B19感染篩查結(jié)果分析

何天文　　黃濱梅　　王逾男　　鐘志成　　陳柯藝　　尹愛華★

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廣東地區(qū)育齡婦女人細(xì)小病毒B19感染篩查結(jié)果分析

何天文1，2黃濱梅1，2王逾男1，2鐘志成1，2陳柯藝1，2尹愛華1，2★

［摘要］目的通過(guò)對(duì)廣東地區(qū)育齡婦女人細(xì)小病毒B19（human parvovirus B19,B19）感染篩查結(jié)果進(jìn)行分析，了解廣東地區(qū)育齡婦女人細(xì)小病毒B19感染情況。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)廣東地區(qū)育齡婦女血清中人細(xì)小病毒B19特異性IgM 和IgG抗體，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果廣東地區(qū)育齡婦女血清中人細(xì)小病毒B19特異性IgM 和IgG抗體陽(yáng)性率分別為1.40%（700/50 086）、16.72%（341/2 039）。結(jié)論開展育齡婦女人細(xì)小病毒B19感染篩查工作，對(duì)優(yōu)生優(yōu)育、提高人口素質(zhì)具有非常重要意義。

［關(guān)鍵詞］育齡婦女；人細(xì)小病毒B19；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

人細(xì)小病毒B19（human parvovirus B19，B19）是細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬的成員，是唯一對(duì)人類有致病性的細(xì)小病毒［1-2］。B19感染呈全球分布，全年均可發(fā)生，以冬春季常見，而人群對(duì)B19普遍易感，尤以兒童和孕婦感染多見［3］。B19感染呈非特異性病毒感染癥狀或無(wú)癥狀，可引起多種臨床表現(xiàn)，不同患者可有不同臨床表現(xiàn)，主要可引起傳染性紅斑、急性再生障礙性貧血危象、急性關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛、血小板減少性紫癜等多種疾?。?-5］。而妊娠期婦女感染B19除可發(fā)生上述癥狀外，還可發(fā)生自然流產(chǎn)和垂直傳播給胎兒。胎兒感染B19可無(wú)癥狀，也可發(fā)生貧血、低白蛋白血癥、肝炎、心肌炎，甚至導(dǎo)致宮內(nèi)死胎和非免疫性胎兒水腫［6-9］。本文對(duì)2012年1月至2015年3月就診于廣東省婦幼保健院婦科、產(chǎn)科、生殖健康科和醫(yī)學(xué)遺傳中心進(jìn)行孕前檢查、產(chǎn)前檢查和不孕不育治療的廣東地區(qū)育齡婦女進(jìn)行B19感染篩查，了解廣東地區(qū)育齡婦女B19感染狀況。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象

2012年1月至2015年3月就診于廣東省婦幼保健院婦科、產(chǎn)科、生殖健康科和醫(yī)學(xué)遺傳中心進(jìn)行孕前檢查、產(chǎn)前檢查和不孕不育治療的廣東地區(qū)育齡女性50 086例，其中孕前檢查女性4 298例，產(chǎn)前檢查女性39 929例，不孕不育女性5 859例，年齡在14歲至50歲之間，平均年齡為26.7歲。

1.2儀器與試劑

主要儀器有美國(guó)Thermo公司Multiskan MK3全自動(dòng)酶標(biāo)儀和德國(guó)eppendorf公司5810型臺(tái)式離心機(jī)；人細(xì)小病毒B19特異性IgM和IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）及其質(zhì)控品由德國(guó)維潤(rùn)賽潤(rùn)研發(fā)有限公司提供。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集

采集非抗凝血2 mL，4 h內(nèi)送檢，可置4~8℃保存2周，長(zhǎng)時(shí)間保存則需分離血清后置?20℃保存，避免反復(fù)凍融。

1.3.2B19特異性IgM和IgG抗體檢測(cè)

非抗凝血用德國(guó)eppendorf公司5810型臺(tái)式離心機(jī)在3 000 rpm下離心5 min，分離血清；然后采用德國(guó)維潤(rùn)賽潤(rùn)研發(fā)有限公司的B19特異性IgM和IgG抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)已分離血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，使用美國(guó)Thermo公司Multiskan MK3全自動(dòng)酶標(biāo)儀讀取吸光度值（OD值），所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求完成。

1.3.3診斷標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)標(biāo)本檢測(cè)OD值大于試劑盒設(shè)定的cut off值判為陽(yáng)性，標(biāo)本檢測(cè)OD值小等于試劑盒設(shè)定的cut off值判為陰性。

1.3.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，率的比較采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1育齡婦女B19特異性IgM和IgG抗體檢測(cè)結(jié)果

受調(diào)查的廣東地區(qū)育齡婦女中B19特異性IgM 和IgG抗體陽(yáng)性率分別為1.40%（700/50 086）、16.72%（341/2 039），具體見表1。按照診療常規(guī)，孕前進(jìn)行B19的IgG檢測(cè)評(píng)估女性對(duì)B19免疫力情況，而孕期進(jìn)行B19的IgM檢測(cè)對(duì)孕婦篩查B19感染，研究對(duì)象中以孕期女性為主，導(dǎo)致B19特異性IgM和IgG抗體檢測(cè)的基數(shù)不一致。

2.2孕前和孕期女性B19感染情況

根據(jù)是否懷孕分為孕前組及孕期組，比較兩組B19的IgM陽(yáng)性率。孕前組和孕期組B19的IgM陽(yáng)性率分別為2.02%（87/4 298）、1.23%（492/ 39 929）。孕前組B19的IgM陽(yáng)性率比孕期組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），具體結(jié)果見表2。

表1　廣東地區(qū)育齡婦女B19特異性IgM和IgG抗體檢測(cè)結(jié)果Table 1　Detection results of B19 specific IgM and IgG antibodies in women of childbearing age in Guangdong

2.3比較孕期女性與不孕不育女性B19感染情況

分析不孕不育女性B19的的IgM陽(yáng)性率，比較孕期女性與不孕不育女性B19的IgM陽(yáng)性率。不孕不育組B19的的 IgM陽(yáng)性率為 2.07%（121/5 859），比孕期組B19的IgM陽(yáng)性率1.23%（492/39 929）高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），具體結(jié)果見表3。

表2　孕前和孕期女性B19的IgM陽(yáng)性率情況Table 2　The IgM positive rate of B19 in pre?pregnancy and pregnancy women

表3　孕期女性和不孕不育女性B19 IgM陽(yáng)性率情況Table 3　The IgM positive rate of B19 in pregnancy and infertile women

3　討論

B19感染呈全球分布，全年均可發(fā)生，而人群對(duì)B19普遍易感，尤以兒童和孕婦感染多見。B19感染呈非特異性病毒感染癥狀，而大部分感染者無(wú)明顯的臨床癥狀，在妊娠婦女B19感染可發(fā)生垂直傳播會(huì)導(dǎo)致胎兒發(fā)生不良結(jié)局。胎兒感染后可發(fā)生貧血、非免疫性水腫、竇性心肌炎、胸腔積液、抗磷脂綜合癥等，是胎兒發(fā)生流產(chǎn)和水腫的重要原因［10］。B19病毒抗體檢測(cè)是進(jìn)行B19病毒感染臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查的主要方法，通常使用商用ELISA試劑盒、Western blot或免疫熒光法針對(duì)B19病毒特異IgM、IgG抗體進(jìn)行檢測(cè)［11］。而ELISA方法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)和不需要特殊設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)，是臨床B19感染篩查主要方法。本實(shí)驗(yàn)室采用進(jìn)口ELISA試劑篩查B19感染，分析了2012 年1月至2015年3月就診于廣東省婦幼保健院婦科、產(chǎn)科、生殖健康科和醫(yī)學(xué)遺傳中心進(jìn)行孕前檢查、產(chǎn)前檢查和不孕不育治療的進(jìn)行B19感染篩查的廣東地區(qū)育齡女性50 086例，B19的IgM和IgG抗體陽(yáng)性率分別為 1.40%（700/50 086）、16.72%（341/2 039）。本研究的B19的IgM陽(yáng)性率較文獻(xiàn)報(bào)道6.72%低［12］，可能原因?yàn)椴煌赜蜿?yáng)性率不同還有檢測(cè)方法的差別造成。而分組統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，孕前組B19的IgM陽(yáng)性率比孕期組高，不孕不育組B19的IgM陽(yáng)性率比孕期組高。B19感染可能與不孕不育具有相關(guān)性，需要進(jìn)一步研究探討。相關(guān)文獻(xiàn)也曾報(bào)道過(guò)，B19可能是除TORCH感染之外造成孕婦復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要病原體之一［13］，可能是由于免疫缺陷的孕婦不能產(chǎn)生特異性抗體來(lái)清除B19病毒，病毒的持續(xù)感染導(dǎo)致習(xí)慣性流產(chǎn)。相關(guān)文獻(xiàn)還指出，體內(nèi)B19 IgG為陽(yáng)性的人群對(duì)細(xì)小病毒B19有一定的免疫能力，在感染B19后可迅速被機(jī)體清除，血清中B19 IgG抗體為陰性的人群易受細(xì)小病毒B19的感染［14］。但有約50%的孕婦在感染細(xì)小病毒B19后，不產(chǎn)生特異性的中和抗體，而且有10%~50%的B19 IgG抗體陽(yáng)性者對(duì)細(xì)小病毒B19的再次感染無(wú)保護(hù)能力。由此可推測(cè)，這可能與細(xì)小病毒B19表面外露區(qū)域氨基酸殘基的高度變異使病毒逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)的監(jiān)控有關(guān)。歐美有研究報(bào)道，在細(xì)小病毒B19感染的流行期，其中3%~8%的孕婦存在急性感染，胎盤垂直傳播率為33%~51%，有5%~16%的感染孕婦出現(xiàn)了嚴(yán)重胎兒發(fā)病和死亡，傳染源主要為2~7歲急性感染兒童，呼吸道傳播為主，還有血制品、母嬰垂直傳播［15］。

因此育齡婦女B19感染越來(lái)越多地引起臨床醫(yī)生的關(guān)注，對(duì)育齡婦女進(jìn)行B19感染篩查以便及早發(fā)現(xiàn)高危人群，針對(duì)高危人群進(jìn)行及時(shí)處理和干預(yù)，預(yù)防出生缺陷，對(duì)優(yōu)生優(yōu)育、提高人口素質(zhì)具有非常重要意義。

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2.廣東省衛(wèi)生廳婦幼代謝與遺傳病醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東，廣州511442★通訊作者：尹愛華，E?mail：yinaiwa@126.com

何天文和黃濱梅為共同第一作者

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（81000255）

作者單位：1.廣東省婦幼保健院醫(yī)學(xué)遺傳中心，廣東，廣州511442

Screening results on human parvovirus B19 infection in women of childbear?ing age in Guangdong area

HE Tianwen1，2，HUANG Binmei1，2，WANG Yunan1，2，ZHONG Zhicheng1，2，CHEN Keyi1，2，YIN Aihua1，2★
（1.Medical Genetics Center of Guangdong Women and Children Hospital，Guangzhou，Guangdong，China，511442；2.Maternal and Children Metabolic?Genetic Key Laboratory of Guangdong，Guangzhou，Guang?dong，China，511442）

［ABSTRACT］ObjectiveTo analyze the screening results and investigate the pathology of human parvovirus B19 infection in women of childbearing age in the Guangdong region.MethodsAn enzyme linked immunosorbent assay was used to detect the specific IgM and IgG antibodies of human parvovirus B19 in women of childbearing age in Guangdong.ResultsThe positive rates of specific IgM and IgG antibodies of human parvovirus B19 among the subjects were 1.40%(700/50 086)and 16.72%(341/2 039)respectively.

ConclusionIt is very important to carry out the screening of human parvovirus B19 infection in women of childbearing age and newborn for healthy child rearing and to improve the quality of life for the population.

［KEY WORDS］Women of childbearing age;Human parvovirus B19;Enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)