東方百合‘索邦’基于噴霧式植物反應(yīng)器的AtCKX3基因轉(zhuǎn)化1)

張倩　　　　　　　杜運鵬　畢彧　陳緒清　張秀海　　　　楊秀云

(山西農(nóng)業(yè)大學，太谷縣，030801)　(農(nóng)業(yè)基因資源與生物技術(shù)北京市重點實驗室(北京市農(nóng)林科學院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心))　(山西農(nóng)業(yè)大學)

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東方百合‘索邦’基于噴霧式植物反應(yīng)器的AtCKX3基因轉(zhuǎn)化1)

張倩杜運鵬畢彧陳緒清張秀海楊秀云

(山西農(nóng)業(yè)大學，太谷縣，030801)(農(nóng)業(yè)基因資源與生物技術(shù)北京市重點實驗室(北京市農(nóng)林科學院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心))(山西農(nóng)業(yè)大學)

摘要以東方百合‘索邦’鱗片為試材，采用噴霧式植物反應(yīng)器(即開放式培養(yǎng))手段，進行外源基因AtCKX3的轉(zhuǎn)化，并對除草劑草丁膦(PPT)質(zhì)量濃度篩選、轉(zhuǎn)化效率進行了研究。以生長情況一致的百合幼苗為材料進行草丁膦質(zhì)量濃度的篩選，結(jié)果表明：8.5 mg·L-1為‘索邦’草丁膦篩選的臨界質(zhì)量濃度；將農(nóng)桿菌侵染后的鱗片在噴霧式反應(yīng)器中培養(yǎng)，誘導出不定芽及生根后進行移栽，并對轉(zhuǎn)化植株幼苗進行草丁膦篩選。對抗性植株進一步進行PCR檢測和PCR-Southern雜交檢測，結(jié)果表明：采用噴霧式植物反應(yīng)器培養(yǎng)，一方面，可有效提高轉(zhuǎn)化效率，縮短培養(yǎng)時間，轉(zhuǎn)化率為0.29%左右；另一方面轉(zhuǎn)化苗移栽成活率更高，達75%。

關(guān)鍵詞百合；噴霧式植物反應(yīng)器；遺傳轉(zhuǎn)化；AtCKX3基因

百合(Lilium spp.)，百合科百合屬多年生草本球根植物，是世界六大鱗莖作物之一[1]，被廣泛應(yīng)用于切花、盆花和園林綠地，可觀賞，亦可食用和藥用，具有較大的經(jīng)濟價值。優(yōu)良百合新品種選育主要依賴于常規(guī)雜交，但遠緣雜交出現(xiàn)受精障礙現(xiàn)象十分普遍[2]。……