鳳丹牡丹ANS(PoANS)基因克隆、特性及表達1)

李果　李厚華　張延龍　辛轉霞　　　　魏新翠　　　　唐豆豆

(西北農林科技大學，楊凌，712100)　　　　　　　(濟南市學大教育培訓學校)　　(西北農林科技大學)

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鳳丹牡丹ANS(PoANS)基因克隆、特性及表達1)

李果李厚華張延龍辛轉霞魏新翠唐豆豆

(西北農林科技大學，楊凌，712100)(濟南市學大教育培訓學校)(西北農林科技大學)

摘要通過RT-PCR技術，從鳳丹牡丹花瓣中克隆出編碼ANS基因的cDNA序列，并對其進行生物信息學分析。對不同開花階段的鳳丹花瓣進行實時熒光定量及總花青素質量分數測定，構建原核表達載體PET-28a-ANS，并轉化大腸桿菌BL21感受態，經IPTG誘導進行體外表達。結果表明：該序列編碼區域共1 065 bp，編碼354個氨基酸，其蛋白相對分子質量為40 475.5 ，亞細胞定位為細胞質的可能性最大；表達分析顯示，ANS基因表達水平與不同開花時期的總花青素質量分數及花色相關，原核表達得到相對分子質量約為44 000的ANS-His-tag融合蛋白，與預測蛋白大小相一致。

關鍵詞鳳丹牡丹；ANS基因；表達分析；原核表達

鳳丹牡丹(Paeonia ostii‘feng dan’)是中國傳統的藥用植物和新興的油料作物[1]，具有很高的經濟價值，同時也是現代觀賞牡丹的主要原始親本之一[2-3]。鳳丹花色主要為白色或淺粉色，單瓣花，在栽培演化進程中受其他種或品種群的影響較小[2]。

決定植物組織顏色的花青素(anthocyanidins)是類黃酮代謝途徑中的重要產物[4]。花青素合成酶基因(Anthocyanidin synthase)是花青素合成途徑中的一個重要基因，它能夠催化無色花青素合成有色花青素[5],花青素能夠使植物呈現藍、紫、粉、紅等顏色[4]。ANS基因最初通過轉座……