乳腺癌毛刺征、微小鈣化與VEGF表達的相關性

李青春，姜浩，劉進才，鐘警，羅光華，秦郁

(南華大學附屬第一醫院放射科，湖南衡陽 421001）

乳腺癌毛刺征、微小鈣化與VEGF表達的相關性

李青春，姜浩，劉進才，鐘警，羅光華，秦郁

(南華大學附屬第一醫院放射科，湖南衡陽 421001）

目的探討乳腺癌X線攝影特征表現與血管內皮生長因子(VEGF)表達的相關性，并分析其臨床意義。方法收集經乳腺鉬靶X線檢查、手術、病理證實的乳腺癌患者，雙盲法按照ACR創立并推薦的BI-RADS，將88例(88/91)分為無鈣化組和微小鈣化組，將55例(55/91)腫塊分為有毛刺組和無毛刺組，用免疫組織化學檢測各組VEGF的表達的水平及其與微小鈣化、毛刺征的關系。結果微小惡性鈣化者40例，占44.0%(40/91)；55例(60.4%，55/91)腫塊患者，邊緣有毛刺征49例，占89.1%；無毛刺腫塊6例，占10.9%。91例乳腺癌組織中HE染色微小鈣化灶表現為成簇分布深色顆粒，VEGF總陽性表達率為79.1%。乳腺癌X線特征表現與VEGF表達的關系中，直接征象、腫塊形狀陽性與陰性差異無統計學意義(P＞0.05)，腫塊邊緣、鈣化情況陽性與陰性差異有統計學意義(P＜0.05)。結論乳腺癌X線攝影特征表現與VEGF表達有一定關聯性，在一定程度上反映VEGF表達狀態，為判斷腫瘤生物學行為、評價患者預后及指導治療提供一定的參考。

乳腺癌；鉬靶X線攝影；血管內皮生長因子

乳腺癌是婦女常見惡性腫瘤之一。我國乳腺癌的發病率和死亡率呈上升趨勢，危害極大。鉬靶X線檢查被公認臨床常規篩查和診斷乳腺癌首選影像學檢查方法。分子生物學標記物的檢測是確診乳腺癌、評估預后和選擇治療方案較為客觀準確的依據，但前提需要手術獲得活體組織標本。近年來認為，研究乳腺癌X線表現與其分子生物學特征之間的關系具有潛在的臨床價值。本研究擬探討乳腺癌X線攝影特征表現與血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth faetors，VEGF)表達的相關性，從影像學角度初步判斷乳腺癌的腫瘤生物學行為，為臨床選擇治療方案及術前評價患者預后提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集我院2005年6月至2009年6月經手術病理證實為乳腺癌91例，其中浸潤性導管癌84例，乳腺黏液癌2例，乳頭濕疹樣癌、乳腺髓樣癌、中高分化腺癌、導管內乳頭狀癌、左乳小管癌分別各1例。術前均進行雙側乳腺鉬靶X線攝影，病例均為女性，年齡28～78歲。

1.2 X線診斷方法采用美國GE公司全數字化乳腺鉬靶X線攝影機，全自動曝光，全部病例均拍頭足位片(CC)和內外斜位片(MLO)。乳腺癌鉬靶X線片均由兩位多年從事影像學診斷醫師共同閱片。參考乳腺影像報告和數據系統(Breast imaging reporting and data system，BI-RADS)的診斷規范[1-2]，將鉬靶片中腫塊分為邊緣毛刺腫塊組及無邊緣毛刺腫塊組，根據鉬靶片中有無鈣化分為微小鈣化組、中間型鈣化組及無鈣化組進行統計分析(因本資料擬以無鈣化組作為對照組，而中間型鈣化病例數較少，故將其舍去，不列入研究范疇)。

1.3 組織細胞學及免疫組織化學分析方法對標本行4%甲醛固定，石蠟包埋，3 μm厚連續切片，分別行HE染色及免疫組化染色。免疫組化染色采用即用型快捷免疫組化染色。本實驗所用VEGF單抗均為鼠抗人單抗(VM-001)工作液，TM染色試劑盒均購自上海太陽生物技術有限公司。VEGF陽性分級標準(按四級法)[3]：陽性細胞數＜25%為弱陽性(+)；25%～50%為中等陽性(++)；＞50%為強陽性(+++)；＜10%為陰性(-)。

1.4 統計學方法將乳腺癌X線攝影特征表現與VEGF的表達分別進行對照研究，應用SPSS 13.0統計軟件包進行統計分析，采用χ2檢驗進行相關性分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 鉬靶X線攝影特征表現微小惡性鈣化者40例，占44.0%(40/91)，其中單純微小鈣化17例(圖1)，腫塊及局限浸潤致密影合并微小鈣化23例(圖2)；中間型鈣化者3例(3.3%，3/91)；無鈣化者48例(52.7%，48/91)。55例(60.4%，55/91)腫塊患者，邊緣有毛刺征49例(圖2)，占89.1%；無毛刺腫塊6例，占10.9%。

2.2 組織細胞HE染色及免疫組化染色檢測VEGF表達情況91例乳腺癌組織中，HE染色微小鈣化灶表現為成簇分布顆粒深色(圖1、圖2b)，VEGF總陽性表達率為79.1%(72/91)(圖2)。

圖1 女，35歲，右乳導管內癌

圖2 女，50歲，右乳浸潤性導管癌

2.3 乳腺癌X線特征表現與VEGF表達的關系直接征象、腫塊形狀陽性與陰性差異無統計學意義(P＞0.05)，腫塊邊緣、鈣化情況陽性與陰性差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 乳腺癌鉬靶X線特征表現和VEGF表達的關系

3 討論

3.1 乳腺癌X線特征表現及臨床意義惡性鈣化一般表現微小多形性、線樣或分支樣鈣化，多呈區域性、簇狀、段樣及線樣分布，是乳腺癌特征性X線表現之一。曹志堅[4]報道乳腺X線檢查中鈣化出現率為40%～50%，90%的乳腺導管原位癌是經鉬靶X線篩查發現的，而最常見的X線征象就是單純微小鈣化。本組研究中微小鈣化40例，占44.0%，與文獻報道相符。絕大部分文獻報道認為微小鈣化是診斷乳腺癌可靠指征，診斷正確率可達90%。本組X線顯示微小鈣化的病例中診斷乳腺癌的正確率達95%，由此可見乳腺微小鈣化灶對乳腺癌準確診斷意義顯著。腫塊是乳腺癌最基本、最常見的直接征象，文獻報道腫塊X線顯示率為68%～79%[4]，本研究中腫塊占60.4%，與文獻報道基本相符。其中腫塊邊緣毛刺征象是鉬靶X線診斷乳腺癌的又一重要征象，對鑒別診斷乳腺良惡性腫瘤具有重要的臨床意義。毛刺征的病理特征為癌細胞直接向外浸潤腫塊周圍間質、導管、淋巴管和供血血管形成毛刺。有學者報道腫塊邊緣表現為毛刺者惡性可能性為81%～97%，且乳腺癌病變容易向周圍組織浸潤且容易引起淋巴和血行轉移[5]。

3.2 VEGF表達的臨床意義VEGF具有強有力的促血管生成及淋巴管生成作用[6-7]，可以促進腫瘤組織血管及淋巴管新生，增強血管及淋巴管通透性，利于腫瘤細胞擴散和轉移，促使腫瘤患者病情進展與轉移。因此VEGF也是乳腺癌非常有價值預后指標之一，VEGF表達水平高的乳腺癌預后較差。

3.3 乳腺癌X線攝影特征表現與VEGF表達的相關性本組研究發現乳腺癌腫塊邊緣“毛刺征”與癌細胞中VEGF表達密切相關，結合史春穎等[8]文獻報道，因此提示有毛刺的腫塊較邊界清楚而無毛刺的腫塊浸潤轉移早，預后差。究其原因，可能與表現為“毛刺征”的腫塊，能分泌更多血管活性物質，誘導腫瘤新生血管和淋巴管的形成，促使腫瘤細胞容易向乳腺導管、血管及淋巴管轉移有關，從而更進一步解釋了乳腺癌“毛刺征”的形成機制。目前，國內外報道乳腺癌鈣化征象與VEGF表達相關性的文獻不多。而本組研究結果顯示，無鈣化組VEGF陽性表達率高于微小鈣化組VEGF陽性表達率，從而初步提示含有微小鈣化的癌灶分泌血管活性物質的能力相對無鈣化癌灶較弱，誘導新生血管的形成相對較差，癌灶局部較容易缺少血供，相比容易壞死，引起磷酸鈣鹽沉積，從而進一步證實了壞死細胞礦化論在鈣化形成機制中的假設[9]。

綜上所述，乳腺癌鉬靶X線攝影片上“微小鈣化征”和“毛刺征”在預測乳腺癌的惡性程度、微脈管形成和預后等方面具有潛在價值。但必須指出的是，目前本研究組病例數有限，未考慮乳腺癌X線特征表現與不同病理類型乳腺癌之間的關系，因此尚需追蹤大量乳腺癌病例，予以進一步研究證實乳腺癌X線特征表現與及其分子生物學之間的關系。

[1]American College of Radiology(ACR).Breast imaging and reporting and data system(BI-RADS)[M].4thed.Reston:American College of Radiology,2003:1-259.

[2]安彥虹,葉兆祥,李弋,等.乳腺影像報告和數據系統在國人女性乳腺癌篩查中的應用價值[J].中華放射學雜志,2011,45(4): 353-357.

[3]于霞,孟菲,徐海龍,等.乳腺癌X線攝影惡性鈣化征象與其預后因素的相關性分析[J].實用放射學雜志,2008,24(6):821-823.

[4]曹志堅.乳腺癌鉬靶X線表現特征(118例分析)[J].放射學實踐, 2009,24(1):34-42.

[5]Kessar P,Perry NV,Innicombe SJ,et al.How significant is detection of ductal carcinoma in situ in a breast screening programme[J]. Clinical Radiology,2002,57(9):807-814.

[6]DuffS E,Jeziorska M,Rosa DD,et al.Vascular endothelial growth faetors and receptore in coloretal cancer:implications for anti-angiogenic theray[J].Eur J Caneer,2006,42(1):112-117.

[7]Reeves KW,Ness RB,Stone RA,et al.Vascular endothelial growth factor and breast cancer risk[J].Cancer Causes Control,2009,20 (3):375-386.

[8]史春穎,陳穎.乳腺癌X線特征與VEGF-C表達及腫瘤腋窩淋巴結轉移的相關性研究[J].臨床放射學雜志,2008,27(6): 792-795.

[9]Fondrinier E,Lrimier G,Guerin-Boblet V.Breast microcalcification: Multivariate Analysis of radiologic and clinical factors for carcinoma[J].Worrld J Surg,2002,26:290-297.

Correlation among the mammographic features and the expression of VEGF in breast carcinoma.

LI Qing-chun,JIANG Hao,LIU Jin-cai,ZHONG Jing,LUO Guang-hua,QIN Yu.Department of Radiiology,the First Hospital Affiliated to University of South China,Hengyang 421001,Hunan,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation among the mammographic features and the expression of VEGF in breast carcinoma.MethodsNinty one cases of breast cancer underwent mammography and operation, all of them were proved by pathologic examination.According to BI-RADS,88(88/91)cases were divided into two groups,nonmicrocalcification group and microcalcification group,and 55(55/91)masses were divided two groups, spiculation group and nonspiculation group.The correlations between expression of VEGF and microcalcification or spiculation were studied.ResultsExpression of VEGF in masses with spicular margin was higher than those without spiculation(χ2=3.985).Expression of VEGF in foci without calcification was significantly higher than the foci with malignant calcifications(χ2=15.643).ConclusionThe mammographic features of the breast carcinoma had correlation with expression of VEGF,which refleted the expression of VEGF in breast carcinoma.Thus the biological behavior can be assessed by mammographic features,which provide information for prognosis and therapy.

Breast carcinoma;Mammography;Vascular endothelial growth factors

R737.9

A

1003—6350（2014）11—1621—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.11.0628

2013-12-31)

湖南省自然科學基金(編號：12JJ3116)；衡陽市科技局科技發展計劃資助項目(編號：2011KS27)。

李青春。E-mail：prime_li@163.com