東方次睪吸蟲PCR檢測方法的建立及初步應用

那璐，高俊峰，2，仇建華，李榮，邵志輝，張艷，王春仁

（1.黑龍江八一農墾大學動物科技學院，大慶163319；2.黑龍江省獸醫科學研究所）

東方次睪吸蟲PCR檢測方法的建立及初步應用

那璐1，高俊峰1，2，仇建華1，李榮1，邵志輝1，張艷1，王春仁1

（1.黑龍江八一農墾大學動物科技學院，大慶163319；2.黑龍江省獸醫科學研究所）

為了快速準確地檢測鴨、犬等動物東方次睪吸蟲的感染情況，根據GenBank中發表的東方次睪吸蟲ITS序列設計一對特異性引物，以糞便樣品中蟲卵DNA為模板，優化PCR反應條件，經過敏感性、特異性和重復性實驗，建立檢測動物糞便中東方次睪吸蟲蟲卵的方法。結果，陽性樣品可擴增得到260 bp的特異性條帶，華支睪吸蟲、卷棘口吸蟲、纖細背孔吸蟲DNA樣品檢測均為陰性，檢測到的最低蟲卵數為0.031 25個/克糞便，表明研究建立的PCR檢測方法具有較高的特異性和靈敏性。臨床檢測87份鴨糞樣本，其中6份為陽性，陽性率為6.9%，結果顯示大慶地區鴨子存在東方次睪吸蟲感染，所建立的方法適合于鴨子及其他家禽東方次睪吸蟲的檢測。

東方次睪吸蟲；PCR檢測方法；建立；應用

東方次睪吸蟲（Metorchis orientalis）隸屬于后睪科（Opisthorchiidae）、次睪屬（Metorchis），主要寄生于雞鴨等禽類的膽管和膽囊內，也可寄生于犬、貓，人也有感染的報道［1-2］。該病主要流行于我國，福建、黑龍江、安徽等10多個省區有感染的報道［1-4］。動物感染后會出現膽囊高度腫大，肝膽區疼痛、腹痛、腹瀉、體重減輕、消瘦、貧血等癥狀，嚴重時會導致死亡，給畜牧業造成很大經濟損失。

目前對該病的診斷主要是傳統的形態學觀察，通過對蟲體和蟲卵進行形態鑒定來確診。……