孫蕊,王學群,李朝陽,李洪飛,賈鵬禹
(黑龍江八一農墾大學,大慶163319)
高效液相色譜法測定木糖母液及發酵液中單糖含量
孫蕊,王學群,李朝陽,李洪飛,賈鵬禹
(黑龍江八一農墾大學,大慶163319)
建立了木糖母液及其酵母發酵液中葡萄糖和半乳糖含量的高效液相色譜測定方法。測定方法基于鉛配位體交換色譜分離模式,色譜分離柱采用Sepax Carbomix Pb-NP5(300×7.8 mm ID,5 μm,8%交聯度)色譜柱,柱溫75℃;流動相采用超純水(100%),泵速0.55 mL·min-1;示差折光檢測器溫度30℃;木糖母液樣品采用固相萃取脫色前處理,母液的發酵液樣品采用乙腈沉淀蛋白前處理。在最終的方法條件下,葡萄糖和半乳糖組分在25 min內完成基線分離,在0.2~10.0 mg·mL-1濃度范圍內呈現良好的線性關系,方法檢測限分別為0.124 mg·mL-1和0.115 mg·mL-1。儀器系統簡單,方法重現性好,結果準確。
葡萄糖;半乳糖;木糖母液;發酵液;高效液相色譜法
木糖由酸水解玉米芯等天然半纖維素經凈化、結晶等工藝制成,一般用做加氫生產木糖醇的初級產品。木糖企業在制得結晶木糖的同時,離心分流出大量木糖結晶后殘液(木糖母液),以往母液被廉價出售用于生產焦糖色素[1,6]。近年來,模擬移動床(SMB)色譜分離成為木糖母液中單糖高效回收利用的重要技術[2-5],該技術手段不但可得到高純木糖,同時可得到高純、高附加值的阿拉伯糖,現已實現技術轉化并達到規模化生產。木糖母液中除了含有木糖和阿拉伯糖以外,還含有葡萄糖和半乳糖等雜糖組分,葡萄糖的存在增加了糖液的黏度,影響料液傳質速度[6-7],同時雜糖組分增加了模擬移動色譜分離難度,所以在回收利用木糖母液之前一般采用酵母發酵去除母液中的葡萄糖[6],也有報道有些酵母也可同時去除母液中的半乳糖[8];……