血清AFP、AFP-L3及GP73三者聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性肝癌診斷中的應(yīng)用探究

劉明浩　姚麗

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·技術(shù)應(yīng)用·

血清AFP、AFP-L3及GP73三者聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性肝癌診斷中的應(yīng)用探究

劉明浩1姚麗2

【摘要】目的 探討和分析血清甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3）、高爾基體蛋白（GP73）三者聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性肝癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法 選取40例肝癌患者（A組）、40例肝臟良性疾病患者（B組）和40例健康志愿者（C組）作為此次研究的對(duì)象，分別采用電化學(xué)發(fā)光法、微量離心柱法和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對(duì)上述對(duì)象血清中AFP、AFP-L3及GP73進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 C組血清均未檢出AFP、AFP-L3、GP73，A組和B組上述指標(biāo)血清含量均明顯高于對(duì)照組（均P＜0.05）；A組AFP-L3和GP73血清檢測(cè)陽性率分別為70%和77.5%，與AFP血清檢測(cè)陽性率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），但顯著低于AFP、AFP-L3和GP73聯(lián)合檢測(cè)的血清陽性率（P＜0.05）；AFP、AFP-L3及GP73三者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度分別為96.4%、88.4%，顯著優(yōu)于上述指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)的敏感度、特異度（均P＜0.05）。結(jié)論 AFP、AFP-L3及GP73三者聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性肝細(xì)胞癌聯(lián)診斷中具有重要意義，提高陽性檢出率的同時(shí)還具有較好的敏感度和特異度。

【關(guān)鍵詞】原發(fā)性肝癌；甲胎蛋白；甲胎蛋白異質(zhì)體；高爾基體蛋白73；診斷價(jià)值

原發(fā)性肝癌（PHC），亦簡(jiǎn)稱肝癌，是指原發(fā)于肝臟或肝內(nèi)膽管系統(tǒng)的癌，臨床常見的惡性腫瘤之一，由于起病隱匿，進(jìn)展迅速，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)常處于病情晚期，治療上十分棘手，病死率極高。研究顯示，與原發(fā)性肝癌密切相關(guān)的肝炎病毒主要為乙型肝炎病毒（HBV），而我國作為乙肝大國，發(fā)病人數(shù)已經(jīng)達(dá)到全球發(fā)病人數(shù)的一半以上［1］。因此盡可能早的準(zhǔn)確診斷對(duì)于后續(xù)的治療、提升患者生存質(zhì)量及改善預(yù)后等都具有十分重要的意義。血清甲胎蛋白（AFP）檢測(cè)對(duì)于原發(fā)性肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值，已經(jīng)為大量臨床實(shí)踐所證實(shí)。其早期診斷意義也為人們所公認(rèn)，但陽性率不是很高，30%～40%的PLC患者呈陰性或低濃度，臨床診斷容易出現(xiàn)漏診或誤診［2］。近年來有研究指出AFP-L3及GP37為重要的腫瘤標(biāo)記物，在PLC的診斷中具有重要意義。本研究旨在探討AFP、AFP-L3及GP37三者聯(lián)合檢測(cè)在PLC診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)整理匯報(bào)如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2012年10月～2014年1月于我院進(jìn)行治療的40例原發(fā)性肝癌患者作為A組，患者作為所有患者均經(jīng)CT、病理及細(xì)胞學(xué)檢查并結(jié)合臨床診斷等均符合原發(fā)性肝細(xì)胞癌臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)［3］。其中男性23例，女性17例，年齡范圍42～78歲，平均年齡（52.8±12.4）歲，Child-pugh分級(jí)均為A級(jí)和B級(jí)。選擇同期入院的肝臟良性疾病患者40例作為B組，其中男性22例，女性18例，年齡范圍41～76歲，平均年齡（52.2±11.7）歲，慢性肝炎例25，肝硬化15例。另選取40例健康志愿者作為C組，其中男24例，女性16例，年齡范圍40～76歲，平均年齡（50.4±10.3）歲。

1.2方法

患者準(zhǔn)備空腹10～12 h；避免情緒緊張；停止服用可能影響檢測(cè)結(jié)果的藥物。靜脈取血3～5 ml于肝素真空采血管。運(yùn)送過程中不要?jiǎng)×艺饎?dòng)，避免過大的溫度變化。血液標(biāo)本采集后應(yīng)盡快（0.5 h內(nèi)）以2 500～3 000 r/min離心5～8 min，分離血清后上機(jī)檢測(cè)。如標(biāo)本不能及時(shí)檢測(cè)，置于-80℃保存。AFP采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，免疫化學(xué)發(fā)光儀（i 2 000）及配套試劑由雅培公司提供，（+）：≥20μg/L，（-）：＜20μg/L。AFP-L3采用微量離心柱法，試劑盒由南京英科新創(chuàng)生物技術(shù)公司提供，（+）：≥10%，（-）：＜10%。GP73采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)，試劑盒由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供，（+）：≥150 μg/L，（-）：＜150 μg/L。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，正態(tài)計(jì)量數(shù)據(jù)用（±s）表示，正態(tài)資料組間比較采用t檢驗(yàn)，樣本率的比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1不同組別血清AFP、AFP-L3、GP73檢測(cè)結(jié)果比較

C組血清均未檢出AFP、AFP-L3、GP73，A組和B組上述指標(biāo)血清含量均明顯高于C組（均P＜0.05），具體詳見表1。

2.2不同組別血清檢測(cè)陽性率比較

A組AFP-L3和GP73血清檢測(cè)陽性率分別為70%和77.5%，與AFP血清檢測(cè)陽性率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但低于AFP、AFP-L3和GP73聯(lián)合檢測(cè)的血清陽性率（P＜0.05），具體詳見表2。

2.3不同檢測(cè)方法敏感度、特異性比較

AFP、AFP-L3及GP73三者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度分別為96.4%、88.4%，顯著優(yōu)于上述指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)的敏感度、特異度（均P＜0.05），具體詳見表3。

3　討論

PHC是我國常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，其死亡率僅次于胃癌和食管癌。自20世紀(jì)70年代開始以血清甲胎蛋白和超聲顯像的篩選廣泛開展，對(duì)早期肝癌的診斷有了較大進(jìn)步。早期診斷是檢出適于根治的早期患者，進(jìn)而延長(zhǎng)生存的有效手段和重要關(guān)鍵點(diǎn)。臨床AFP檢測(cè)經(jīng)受了時(shí)間考驗(yàn)，仍然是經(jīng)典的篩檢、診斷和考察療效、預(yù)后判斷的可靠指標(biāo)。但存在敏感度、特異性較低的問題，因此尋找其他腫瘤標(biāo)志物對(duì)肝癌患者進(jìn)行診斷至關(guān)重要［4］。

表1　不同組別血清AFP、AFP-L3、GP73檢測(cè)結(jié)果比較

表2　不同組別血清檢測(cè)陽性率比較［n（%）］

AFP是一種癌胚相關(guān)蛋白，是在人和動(dòng)物胚胎發(fā)育過程中所特有的一種蛋白質(zhì)。出生后及正常人血清中沒有或僅有微量AFP［5］。但在部分良性肝病、生殖系統(tǒng)畸胎瘤、胃腸道部分惡性腫瘤甚至妊娠時(shí)也可升高。AFP是一種糖蛋白，不同來源的AFP其糖鏈的組成和構(gòu)型存在差異，即異質(zhì)體［6］。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)慢性肝病患者血清中的大部分AFP分子均不能與小扁豆凝集素（LCA）結(jié)合，而肝細(xì)胞癌產(chǎn)生的AFP異質(zhì)體（AFP-L3）與小扁豆凝集素結(jié)合的比例很高，某些卵黃囊腫瘤和轉(zhuǎn)移性肝癌患者血清中AFP也可以升高，其AFP-L3基本上可與小扁豆凝集素結(jié)合。因此與AFP聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于鑒別細(xì)胞良惡性病變，具有較好的診斷鑒別意義。此外，AFP-L3用于HPC的診斷不受影像學(xué)陰性結(jié)果的于擾，有助于影像學(xué)對(duì)占位性疾病的鑒別（良惡性、肝內(nèi)肝外性、轉(zhuǎn)移性）和監(jiān)視低濃度AFP患者病情進(jìn)展［7］。GP73是存在于高爾基體的一種跨膜蛋白。在正常人肝組織中，GP73主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，而肝細(xì)胞表達(dá)很少甚至不表達(dá)。不管是由病毒是由非病毒原因引起的肝病患者中，GP73水平均顯著上調(diào)。研究證實(shí)其在HPC早期診斷中具有較好的特異度和敏感度，可分別達(dá)69%和75%，優(yōu)于AFP檢測(cè)［8-9］。本研究結(jié)果表明，肝癌患者血清中AFP、AFP-L3及GP73含量顯著高于良性肝病和健康人群（P＜0.05），且三者的聯(lián)合檢測(cè)陽性率高于AFP陽性率，敏感度特異度提高至96.4%、88.4%。

表3　不同檢測(cè)項(xiàng)目敏感度、特異性比較

綜上所述，AFP、AFP-L3及GP73三者聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性肝細(xì)胞癌聯(lián)診斷中具有重要意義，提高陽性檢出率的同時(shí)還具有較好的敏感度和特異度。

參考文獻(xiàn)

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【中圖分類號(hào)】R373

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1674-9308（2016）17-0038-03

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.17.023

作者單位：1 湖北省襄陽市職業(yè)病防治院檢驗(yàn)科，湖北 襄陽 441021；2 湖北省襄陽市中心醫(yī)院普外科，湖北 襄陽 441021

Diagnostic Value of The Combination With Detection of AFP，AFP-L3 and GP73 in Primary Liver Cancer

LIU Minghao2YAO Li21 Clinical Laboratory， The Prevention and Treatment of Occupational Diseases of Xiangyang City， Xiangyang Hubei 441021， China， 2 Department of General Surgery， The Central Hospital of Xiangyang City， Xiangyang Hubei 441021， China

［Abstract］Objective To investigate and analyze the application value of combined detection of serum alpha （AFP）， alpha fetal protein （AFP-L3） and Golgi protein （GP73） in the diagnosis of primary hepatic cancer. Methods We Selected 40 cases of HCC patients （group A）， 40 cases of benign liver disease patients（group B）and 40 cases of healthy volunteers （group C）as the research object. The serum levels of AFP， AFP-L3 and GP73 were detected by electrochemical luminescence， micro column and enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）. Results AFP， AFP-L3， GP73 were not detected in the serum of patients with C group.But group A and B were significantly higher than those in the control group， and the difference was statistically significant （P＜0.05）. The positive rates of AFP-L3， GP73 in group A were 70%and 77.5%. Compared with the positive rate of AFP serum detection， the difference was statistically significant （P＜0.05）. But significantly lower than the positive rate of AFP，AFP-L3 and GP73，the difference was statistically significant （P＜0.05）. The sensitivity and specificity of the combined detection of AFP，AFP-L3 and GP73 were 96.4%，88.4%，they were better than those of the above indexes，the difference was statistically significant （P＜0.05）. Conclusion The combined detection of AFP，AFP-L3 and GP73 had important significance in the diagnosis of primary hepatic cancer， which could significantly improve the patient positive test results， while ensure a better sensitivity and specificity. ［Key words］ Primary hepatocellular cancer， AFP， AFP-L3， Golgi protein 73， Diagnostic value