CD4+T細胞及淋巴細胞亞群在小兒哮喘與肺炎中的水平及臨床意義

李文良，高　亮

(1.山東省東營市廣饒縣中醫院兒科，山東 東營 257300;2.廣饒縣婦女兒童醫院兒科，郵編，257300)

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CD4+T細胞及淋巴細胞亞群在小兒哮喘與肺炎中的水平及臨床意義

李文良1，高亮2

(1.山東省東營市廣饒縣中醫院兒科，山東 東營 257300;2.廣饒縣婦女兒童醫院兒科，郵編，257300)

[摘要]目的探究CD4+T細胞及淋巴亞群在小兒哮喘與肺炎中的水平及臨床意義。方法選取東營市廣饒縣中醫院兒科自2013年9月至2015年9月收治的34例哮喘患兒作為哮喘組,33例肺炎患兒作為肺炎組，另選擇同時期的正常體檢小兒30例作為對照組，3組均在早晨空腹情況下抽取靜脈血5mL，并于3小時內進行標本處理，后采用流式細胞技術檢測外周血中CD4+T細胞內細胞因子T細胞輔助細胞(Th)1、Th2、Th17及外周血中CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞的水平。結果與對照組相比，哮喘組CD4+CD25+FOXP3+、CD4+IL-4+Th1及CD4+IL-17+Th17細胞百分比均增加明顯，差異均具有統計學意義(t值分別為5.34、5.89、6.11，均P<0.05)。與對照組相比，肺炎組CD4+CD25+FOXP3+細胞百分比降低，差異具有統計學意義(t=4.56，P<0.05)。與肺炎組相比，哮喘組CD4+CD25+FOXP3+、CD4+IL-4+Th1、CD4+IL-17+Th17細胞百分比均增加，差異均具有統計學意義(t值分別為6.12、6.45、6.39，均P<0.05)。與對照組相比，哮喘組淋巴細胞水平降低，單核細胞、嗜酸性粒細胞水平升高，差異均具有統計學意義(t值分別為5.34、5.26、5.19，均P<0.05)。與對照組相比，肺炎組單核細胞水平升高，差異具有統計學意義(t=4.99，P<0.05)。與肺炎組相比，哮喘組嗜酸性粒細胞水平升高，差異具有統計學意義(t=5.29，P<0.05)。結論CD4+T細胞及淋巴細胞亞群檢測在診斷與鑒別小兒哮喘與肺炎疾病時具有重要臨床意義，為臨床治療提供參與依據。

[關鍵詞]CD4+T細胞；淋巴細胞亞群；小兒哮喘；小兒肺炎

小兒哮喘及肺炎作為小兒呼吸系統常見病，其發生發展均受到了免疫系統的影響，隨著對T細胞輔助細胞(Th)17研究的不斷深入，人們開始將CD4+T細胞分為4個亞群，分別為Th1、Th2、Th17及調節性T細胞，并發現以上4類亞群在小兒免疫系統方面起到了重要作用，其中Th1及Th2免疫反應可能對氣道產生保護作用或促進過敏反應、炎癥的發生[1-2]。為了解CD4+及淋巴細胞亞群在小兒哮喘及肺炎中水平的異同，我們對此展開研究，并將結果總結報告如下。

1資料與方法

1.1研究對象

選取東營市廣饒縣中醫院兒科自2013年9月至2015年9月収治的34例哮喘患兒作為哮喘組及33例肺炎患兒作為肺炎組，哮喘組中男20例，女14例，年齡在3至8歲之間，平均年齡為(5.9±1.3)歲，肺炎組中男22例，女11例，年齡在4至7歲之間，平均年齡為(5.5±1.5)歲。納入及排除標準：均符合中華醫學兒科學會呼吸學組制定的支氣管哮喘/肺炎診斷標準。排除于試驗2周內使用過免疫調節藥物的患兒；排除合并嚴重心肺肝腎疾病的患兒；排除自身免疫性疾病、血液性疾病、傳染性疾病的患兒；由患兒的監護人簽署了關于本次試驗的知情同意書[3]。另選擇同時期的正常體檢小兒30例作為對照組，其中男20例，女10例，年齡在2至9歲之間，平均年齡為(5.6±1.5)歲。納入及排除標準：于試驗前2周內身體健康，各項生命體征及指標正常；排除嚴重心肺肝腎疾病、自身免疫性疾病、血液性疾病、傳染性疾病的患兒；并由患兒的監護人簽署了關于本次試驗的知情權同意書。3組一般資料無明顯差異，具有可比性。

1.2方法

早晨空腹采用肝素鈉抗凝負壓真空采血管抽取靜脈血5mL，并于3小時內進行標本處理，采用流式細胞技術檢測外周血中CD4+T細胞內細胞因子Th1、Th17及外周血中CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞的水平。所用儀器、試劑及試劑盒均由美國BD公司提供。

1.3統計學方法

采用SPSS 18.0統計軟件對本次研究所取得的數據進行分析，計量資料以均數±標準差的形式對數據進行表示，采取t檢驗，各組試驗組間給予方差分析，以P<0.05代表有統計學意義。

2結果

2.1各組外周血調節性T細胞(Treg)、Th1及Th17細胞百分比對比

與對照組相比，哮喘組CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞、CD4+IL-4+Th1及CD4+IL-17+Th17細胞百分比均增加明顯，差異均具有統計學意義(t值分別為5.34、5.89、6.11，均P<0.05)。與對照組相比，哮喘組CD4+IFNγTh1細胞百分比無明顯差異(P>0.05)。與對照組相比，肺炎組CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞百分比降低，差異具有統計學意義(t=4.56，P<0.05)。與肺炎組相比，哮喘組CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞、CD4+IL-4+Th1、CD4+IL-17+Th17細胞百分比均增加，差異均具有統計學意義(t值分別為6.12、6.45、6.39，均P<0.05)。與肺炎組相比，哮喘組CD4+IFNγTh1細胞百分比無明顯差異(P>0.05)。見表1。

表1　各組外周血Treg、Th1及Th17細胞百分比對比

注：與對照組相比，*P<0.05；與肺炎組相比，#P<0.05。

2.2各組外周血常規檢測結果對比

與對照組相比，哮喘組淋巴細胞水平降低，單核細胞、嗜酸性粒細胞水平升高，差異均具有統計學意義(t值分別為5.34、5.26、5.19，均P<0.05)。與對照組相比，哮喘組白細胞、中性粒細胞水平均無明顯差異(均P>0.05)。與對照組相比，肺炎組單核細胞水平升高，差異具有統計學意義(t=4.99，P<0.05)。與對照組相比，肺炎組白細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞水平均無明顯差異(均P>0.05)。與肺炎組相比，哮喘組嗜酸性粒細胞水平升高，差異具有統計學意義(t=5.29，P<0.05)。與肺炎組相比，哮喘組白細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞水平均無明顯差異(均P>0.05)。見表2。

表2　各組外周血常規檢測結果對比±S)

注：與對照組相比，*P<0.05；與肺炎組相比，#P<0.05。

3討論

3.1 CD4+T細胞及淋巴細胞在哮喘及肺炎發生發展中的作用

隨著醫療技術的不斷發展，對免疫學的相關研究也不斷深入發現包括呼吸系統在內的各個部位發生的炎癥反應均與免疫反應相關，由于支氣管哮喘本身就為一種由多種細胞介導的氣道慢性炎癥反應，其中CD4+T細胞在其發生發展過程中起到了重要的作用[4-6]。另由于小兒免疫系統相比于成人存在特殊性，且相關研究報道較少。本次研究結果顯示，哮喘組的Th17較肺炎及正常對照組相比均明顯升高，提示Th17在哮喘發病中占有重要地位，也有研究報道認為Th17可對小兒哮喘的發生發展起到主導型作用[7]。另外，本次研究結果顯示，哮喘組較正常對照組相比CD4+、CD25+Treg水平升高，但并無明顯差異，推測其原因可能是部分哮喘組患兒存在家族或自身過敏史[8]。

3.2 CD4+T細胞及淋巴細胞在小兒哮喘、肺炎及正常對照組中的差異

在本研究中，肺炎組與哮喘組中Th1的水平并無明顯差異，與正常組CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞百分比降低，但與肺炎組相比，哮喘組CD4+CD25+FOXP3+調節性T細胞、CD4+IL-4+Th1、CD4+IL-17+Th17細胞百分比增加，結果提示，Th17上調的趨勢相比于哮喘組并不明顯，調節性T細胞的變化與哮喘的發生發展呈現出反方向的趨勢，但由于體內細胞與細胞、細胞與因子、因子及因子之間存在較為復發的變化，同時也有部分細胞因子在受到病原體刺激后表現為分泌時項的改變，從而出現了上述結果。

3.3血常規檢查在在小兒哮喘、肺炎診斷中的重要性

另外，在以往的臨床工作中，絕大多數臨床醫師僅重視白細胞、紅細胞、血小板、淋巴細胞而忽略了單核細胞、嗜酸性粒細胞的水平。但本研究結果顯示，哮喘組、肺炎組患兒與正常對照組的血常規結果也存在明顯差異，表現為與對照組相比，哮喘組淋巴細胞水平降低，單核細胞、嗜酸性粒細胞水平升高；與對照組相比，肺炎組單核細胞水平升高；與肺炎組相比，哮喘組嗜酸性粒細胞水平升高?？梢?，單核細胞、嗜酸性粒細胞與哮喘及肺炎的發生及發展同樣具有一定的相關性，對于炎癥性疾病及過敏性疾病的疾病同樣具有突出的臨床意義[9-10]。這就需要臨床醫師結合患者的病情及其血常規結果及免疫學結果共同對疾病作出合理的分析與判斷，以便為下一步臨床治療提供重要的科學基礎[11]。

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[專業責任編輯：侯偉]

[收稿日期]2015-12-01

[作者簡介]李文良(1975-)，男，主治醫師，主要從事兒科疾病的診療工作。

[通訊作者]高亮，副主任醫師。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.07.025

[中圖分類號]R725.6

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-5293(2016)07-0861-03

CD4+T cells and lymphocyte subsets levels in children with asthma and pneumonia and their clinical significance

LI Wen-liang,Gao Liang

(1.Department of Pediatrics, Dongying City Guangrao County Hospital, Shandong Dongying 257300, China;2.Department of Pediatrics, Guangrao women and children’s Hospital，257300)

[Abstract]Objective To probe into and analyze CD4+ T cells and lymphocyte subsets levels in children with asthma and pneumonia and their clinical significance. Methods From September 2013 to September 2015 34 children with asthma were selected in asthma group and 33 children with pneumonia in pneumonia group from Dongying City Guangrao County Hospital. At the same period another 30 normal children taking physical examination were chosen in control group. Before breakfast 5mL blood were sampled from venous for all cases in three groups in the morning and processed within 3 hours. Then flow cytometry was used to detect Th1, Th2 and Th17 in CD4+T cells and levels of CD4+CD25+ FOXP3+ in peripheral blood. Results Compared to the control group, cell percentages of CD4+CD25+FOXP3+ , CD4+IL-4+Th1 and CD4+ IL-17+Th17 increased in the asthma group with significant differences (t value was 5.34, 5.89 and 6.11, respectively, all P<0.05). Compared to the control group, CD4+CD25+FOXP3+ cell percentage decreased in the pneumonia group with significant difference (t= 4.56, P<0.05). Compared to the pneumonia group, in the asthma group CD4+ CD25+ FOXP3+ , CD4+ IL-4+Th1, CD4+ IL-17+Th17 cell percentages increased with significant differences (t value was 6.12, 6.45 and 6.39, respectively, all P<0.05). Compared to the control group, lymphocyte levels dropped, monocytes and eosinophils levels increased in the asthma group with significant differences (t value was 5.34, 5.26 and 5.19, respectively, all P<0.05), and monocytes levels increased in the pneumonia group with significant difference (t=4.99, P<0.05). Compared to the pneumonia group, eosinophil levels increased in the asthma group with significant difference (t= 5.29, P<0.05).Conclusion CD4+T cells and lymphocyte subsets detection is of great importance in the diagnosis and identification of pediatric asthma and pneumonia disease, which provides basis for clinical treatment.

[Key words]CD4+T cells; lymphocyte subsets; childhood asthma; pediatric pneumonia