余萍 李雪龍


摘要:為擴大鼠李糖乳桿菌(H0107)在微生態制劑方面的應用,采用對比試驗的方法,通過建立小鼠便秘模型來評價其通便效果。試驗結果顯示:鼠李糖乳桿菌安全性高,2.8 g/kg劑量下連續灌胃7 d無毒性反應,且對便秘模型有一定的通便效果。
關鍵詞:鼠李糖乳桿菌;小鼠模型;對比試驗;通便
中圖分類號:Q93 文獻標識碼:A 文章編號:1674-1161(2016)05-0048-02
近年來,隨著人們健康意識的逐步增強,食品、保健品、醫藥的安全性越來越受到人們關注。目前,含有益生菌的微生態制劑及食品正作為一個新領域逐步被研究和開發。鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)從屬于乳桿菌,具有調節微生態平衡、增強宿主腸道抵抗力、預防和治療腹瀉、消除過敏態的功能,可作為益生菌用于生產微生態制劑和功能性乳制品,在發酵食品領域具有廣泛的應用前景。
通過建立小鼠便秘模型來評價鼠李糖乳桿菌(H0107)的通便效果,為該菌種在微生態制劑方面的應用提供數據支持。
1 材料與方法
1.1 菌種
鼠李糖乳桿菌菌株H0107:分離于嬰兒糞便,研究室保存。
1.2 試驗動物
昆明小鼠(KM)4~5周齡,18~22 g,37只,雄性。
1.3 試劑及儀器
蒸餾水、活性炭粉、鹽酸洛哌丁胺、阿拉伯樹膠、直尺、分析天平、研缽。
1.4 試驗方法
1.4.1 試驗動物分組 根據體重隨機對試驗動物進行分組,分組及給藥方案詳見表1。
1.4.2 試驗步驟 墨汁配置:稱取阿拉伯樹膠100 g,加水800 mL,煮沸至溶液透明,稱取活性炭(粉狀)50 g加至上述溶液中,煮沸3次,溶液涼后加水定容到
1 000 mL,于冰箱(4 ℃)中保存,用前搖勻。
鹽酸洛哌丁胺溶液的配制(濃度0.8 mg/mL):取鹽酸洛哌丁胺顆粒10袋(每袋含鹽酸洛哌丁胺1 mg),溶于12.5 mL水,臨用前配制。
建模:小鼠平衡飼養后,根據方案對動物給藥。給藥7 d后,各組動物禁食16 h,但不禁水。模型對照及鼠李糖乳桿菌組灌胃給予鹽酸洛哌丁胺(8 mg/kg、10 mL/kg)溶液,溶劑對照組給予蒸餾水。
墨汁推進率計算:給鹽酸洛哌丁胺后0.5 h,治療組給予含鼠李糖乳桿菌的墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠),溶劑和模型對照組給墨汁灌胃。25 min后處死小鼠,分離小腸系統(上端至幽門、下端至回盲部的腸管),測量腸管長度為“小腸總長度”,從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”。
墨汁推進率計算公式為:
墨汁推進率(%)=×100%
2 結果與分析
應用SPSS17.0軟件中的One-Way-Anova程序對墨汁推進率進行組間統計學分析。
給予鼠李糖期間,鼠李糖各組試驗動物體重保持增長,未見下降,與溶劑對照組體重增長趨勢相同,且動物未見異常。說明連續7 d在2.8 g/kg劑量下,鼠李糖未表現出毒性,安全性高。
由溶劑及模型對照組墨汁推進率(75%,48%)可知,便秘模型造模成功,但各造模組試驗動物小腸均出現水潴留、腸壁透明現象。此現象的發生,為鹽酸洛哌丁胺的獨特作用還是各造模藥物均會出現,需要后續試驗判斷驗證。
模型對照組、鼠李糖乳桿菌(0.8 g/kg)組、鼠李糖乳桿菌(1.6 g/kg)組、鼠李糖乳桿菌(2.8 g/kg)組的墨汁推進率分別為48%,59%,55%,55%,說明鼠李糖各組對便秘模型都有一定的通便效果。
鼠李糖乳桿菌(H0107)各組之間的墨汁推進率并無統計學差異,未表現出量效關系。這可能是由造模劑量偏大引起的,也可能是由于在0.8 g/kg劑量下,鼠李糖乳桿菌(H0107)已達到最優通便效果造成的,需要后續試驗驗證。
3 結論
通過對鼠李糖乳桿菌(H0107)進行小鼠試驗,證明鼠李糖乳桿菌(H0107)安全性高,2.8 g/kg劑量下連續灌胃7 d,無毒性反應,且對便秘模型有一定的通便效果。試驗結果為鼠李糖乳桿菌(H0107)在保健品及乳制品中的開發奠定良好基礎。
參考文獻
[1] 王玉華,高晶,陳萍,等.鼠李糖乳桿菌不同組分抗氧化活性的研究[J].食品科技,2011(9):27-31.
[2] 李海洋,韓軍岐,徐長亮.鼠李糖乳桿菌乳酸發酵特性及碳氮源研究[J].乳業科學與技術,2012(2):17-20.
[3] 趙乙楨,沈雷,孫亞鏈,等.鼠李糖乳桿菌ZJ225細菌素的分離純化及其特性研究[J].中國食品學報,2015(7):54-60.
Abstract: In order to extend the application range of LGG(H0107) in probiotics field, taking advantage of the contrast test method,in this paper it evaluated the catharsis effect by establishing constipated mice models. The experimental results showed that: LGG is of high safety; There was non-toxic reaction for rats in the dose of 2.8g/kg by gavage for 7 days; Also it had the catharsis effect to models in constipation.
Key words: LGG; mouse model; contrast test; catharsis