復方安神膠囊中梔子苷的質量控制研究

楊宇峰，段秀俊，裴妙榮，劉娜娜

（山西中醫學院，山西太原030024）

復方安神膠囊中梔子苷的質量控制研究

楊宇峰，段秀俊，裴妙榮，劉娜娜

（山西中醫學院，山西太原030024）

目的：建立復方安神膠囊中梔子苷的質量控制方法。方法：采用高效液相色譜法（HPLC），色譜柱為Diamonsil C18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流動相為甲醇－水（15∶85）；檢測波長238 nm；流速1.0mL/min；柱溫30℃。結果：梔子苷進樣量在0.17μg～3.4μg范圍為線性關系良好，r=0.999 95，平均加樣回收率為100.01%，RSD=1.60%（n=6）。結論：該方法重現性好，專屬性強，結果準確，可用于復方安神膠囊中梔子苷的質量控制。

復方安神膠囊；質量控制；梔子苷；HPLC

復方安神膠囊由夜交藤、酸棗仁、梔子、當歸等藥味組成，具有養肝、寧心、安神、斂汗作用，可用于治療虛煩不眠、驚悸怔忡、煩渴、虛汗等。該膠囊是醫院制劑，為了控制其質量，保證臨床用藥效果，實驗建立了梔子活性成分梔子苷的HPLC含量測定方法，現報道如下。

1 實驗材料

1.1 實驗儀器

Waters2695高效液相色譜儀，METTLER（梅特勒）-AB135-S十萬分之一電子分析天平［梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司］、Bs2245萬分之一電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限責任公司）、KQ3200E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 藥物與試劑

復方安神膠囊（批號110614，110615，110617，規格0.5 g/粒，自制），陰性對照膠囊為自制。梔子苷標準品（供含量測定用，批號110749-200714）購自中國藥品生物制品檢定所。甲醇為色譜純（天津四友精密化學品有限公司），水為哇哈哈純凈水，其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱為Diamonsil（鉆石）C18柱（150mm× 4.6mm，5μm）；流動相為甲醇－水（15∶85）；檢測波長238 nm；流速1.0mL/min；柱溫30℃；理論塔板數以梔子苷峰計應不少于1 500。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備精密稱定梔子苷對照品，加甲醇制成每1mL含0.136 mg的溶液，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品內容物0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40 kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 陰性對照溶液的制備按復方安神膠囊的處方比例和生產工藝制備缺梔子的陰性膠囊，并按供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液［1-6］。

2.3 專屬性實驗

分別精密吸取上述對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，結果陰性無干擾，結果見圖1。

圖1 復方安神膠囊HPLC色譜圖

2.4 系統適用性考察

2.4.1 線性關系考察取梔子苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.34 mg的溶液，做為對照品母液，精密量取母液0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.8 mL、1.0 mL、1.6mL、2.0 mL儲備液于2 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別吸取上述對照品溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以梔子苷的進樣量（μg）為橫坐標，峰面積值為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程為Y=609 651X-3 590，（r=0.999 95），表明梔子苷在0.17μg~3.4μg進樣范圍內線性關系良好。

2.4.2 精密度實驗精密吸取對照品溶液（0.136 mg/mL）10μL，重復進樣6次，記錄峰面積值，結果RSD為0.70%，表明方法精密度良好。

2.4.3 穩定性實驗精密吸取同一供試品溶液，分別于0 h、2 h、4 h、8 h、10 h、12 h各進樣10μL，記錄峰面積值，結果RSD為1.44%，表明供試品溶液在12 h內穩定。

2.4.4 重復性試驗取同一批號樣品（批號110614） 6份，精密稱定，按2.2.2項下方法制備供試品溶液，按2.1項下方法進行測定，計算含量，結果平均含量為2.42mg/g，RSD為1.62%，表明方法的重復性良好。

2.4.5 加樣回收率分別取已知含量的樣品（批號110614）6份，每份0.25g，精密稱定，分別精密加入梔子苷對照品適量，按2.2.2項下方法制備供試品溶液，按2.1項下方法進行測定，計算回收率，結果見表1，表明方法的準確度良好。

表1 梔子苷加樣回收率測定

2.4.6 樣品測定取3批樣品（批號110614，110615，110617），每批2份，測定樣品中的梔子苷含量，結果見表2。

表2 樣品中梔子苷含量測定

3 討論

因苷類成分在中藥化學成分中具有典型性與廣泛性的特點，實驗選擇了梔子苷做為含量測定的指標性成分，選擇甲醇-水做為流動相系統，對流動相比例進行了篩選，結果以甲醇：水為15∶85時分離效果良好，陰性無干擾。

梔子苷屬環烯醚萜苷，對酸很敏感，其苷鍵極易被酸水解，生成的苷元很不穩定，在提取溶劑的選擇及流動相的選擇過程中應盡可能避免酸性，以防止對苷穩定性的影響。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：231.

［2］伏建峰，蘇春，史清海，等.HPLC法測定梔子中梔子苷的含量［J］.西北國防醫學雜志，2012，33（5）：501-503.

［3］嚴安定，張永，高建.RP-HPLC法同時測定不同品種梔子及梔子金花丸中梔子苷［J］.中成藥，2012，34（5）：965-967.

［4］王偉影，范蕾.不同采收時期及干燥方法對梔子中梔子苷含量的影響［J］.中國藥師，2012，15（6）：811-813.

［5］筆雪艷，劉曉鳳，張清波.HPLC法測定清開靈泡騰片中梔子苷的含量［J］.中國藥房，2011，22（3）：240-241.

［6］吳紅娟，王清波，譚朝陽，等.不同來源梔子中梔子苷含量測定［J］.湖南中醫藥大學學報，2010，30（5）：35-37.

（編輯：翟春濤）

Study of the quality control of geniposide in Fufanganshen capsules

Yang Yufeng，Duan Xiujun，PeiMiaorong，Liu Nana
（Shanxi College of TCM，Taiyuan Shanxi030024）

Objective：To establish the methods for quality control of geniposide in Fufang anshen capsulse.Methods：HPLC was used at 30℃on a Diamonsil C18column（150mm x 4.6mm，5μm）.Themobile phase consisted ofmethanol and waters（15∶85）and the flow rate was 1.0 mL/min.Results：The linear relationship was good as the injection volume at 0.17μg～3.4μg，r=0.999 95，the average recovery rate was 100.01%，RSD=1.60%（n=6）.Conclusion：The method was highly reproducible，specific and accurate and can be used to control the quality of Fufanganshen capsule.

Fufang anshen capsule；quality control；geniposide；HPLC

R285.5

A

1671-0258（2016）06-0022-02

楊宇峰，助教，E-mail：18636173685@163.com

段秀俊，副教授，碩士生導師，E-mail：dxjzhyxy@163.com