益母草復方止血作用的實驗研究

何丹丹李 超（ 江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇 南京 0046； 江蘇濟川制藥有限公司，江蘇 泰興 5400）

益母草復方止血作用的實驗研究

何丹丹1李 超2
（1 江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇 南京 210046；2 江蘇濟川制藥有限公司，江蘇 泰興 225400）

目的 研究益母草復方止血作用。方法 采用斷尾法和玻片法分別測定小鼠出血時間，凝血時間；測定凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血酶（APTT）、凝血酶時間（TT）、纖維蛋白原（FIB）凝血四項。結果 益母草復方高劑量組（4.68 g/kg），與對照組比較能小鼠凝血時間及出血時間。結論 益母草復方具有止血作用。

益母草；凝血時間；出血時間；凝血四項

產(chǎn)后子宮內(nèi)膜慢性炎癥是產(chǎn)婦產(chǎn)后復舊不全的主要原因，表現(xiàn)為產(chǎn)后腹痛、惡露不絕等。益母草復方由益母草、川芎、桃仁、路路通等7味中藥組成，具有祛瘀生新，止血安宮的功效，臨床治療產(chǎn)后惡露不盡，子宮出血等有顯著效果。本實驗對益母草復方止血作用進行研究，探討其作用效果，為進一步開發(fā)應用提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實驗動物：ICR清潔級雌性小鼠，體質(zhì)量（20±2）g，上海斯萊克實驗動物有限責任公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（滬）2013-0005。

1.2藥物與試劑：益母草復方浸膏，江蘇省中西醫(yī)結合醫(yī)院制劑室制備；阿司匹林，南京制藥廠，批號140416；宮血寧，云南白藥集團股份有限公司，批號：20130810；云南白藥，云南白藥集團股份有限公司，批號20120123；二甲苯，上海久億化學試劑有限公司，批號：20070601；水合氯醛，成都市科龍化工試劑廠，批號：20121108。

1.3實驗器材：毛細玻璃管（內(nèi)徑1 mm）、載玻片、秒表、針頭、濾紙、剪刀；電子天平、血小板聚集儀（LG-R-808血液流變分析儀，北京中勤世帝科學儀器有限公司）

1.4方法

1.4.1小鼠凝血時間測定：ICR雌性小鼠，按體質(zhì)量隨機分為生理鹽水組、宮血寧組0.10 g/kg、益母草復方高中低劑量組（4.68、1.56、0.52 g/kg）5組，每日灌胃給藥一次，連續(xù)7 d。末次給藥1 h后，用1 mm的毛細玻璃管刺入小鼠內(nèi)眥球靜脈叢，取血滴置于干凈載玻片上，開始計時，每隔30 s用針頭挑動血滴一次，直至能挑出纖維蛋白絲為止，即為凝血時間。

1.4.2小鼠出血時間測定：實驗分組及給藥方法同上，末次給藥1 h后，用剪刀將小鼠尾巴距離尾尖0.5 cm處剪斷，從出血開始計時，每隔30 s用濾紙輕粘傷口一次，直至濾紙上不出現(xiàn)血跡，即為出血時間。

1.4.3凝血四項的測定：取小鼠50只，隨機分為5組，分別為生理鹽水組、云南白藥0.20 g/kg、益母草復方高中低劑量組（4.68、1.56、0.52 g/kg），每日灌胃給藥1次，連續(xù)7 d。末次給藥1 h后水合氯醛麻醉，頸總動脈取血。以0.109 mol/L的枸櫞酸鈉作抗凝劑。3000 rpm離心10 min，取血漿，于4 h內(nèi)，按試劑盒操作測定凝血四項。

2　結 果

2.1對小鼠出凝血時間的影響：益母草復方各劑量組均縮短了小鼠凝血時間和出血時間，呈現(xiàn)出量效依賴性。與對照組相比，高劑量組作用明顯（P＜0.05），且優(yōu)于宮血寧，見表1。

2.2凝血四項測定結果：對各組小鼠凝血四項指標進行測定，未觀察到益母草復方對指標有明顯影響，見表2。

表1　益母草復方對小鼠凝血時間和出血時間的影響

表1　益母草復方對小鼠凝血時間和出血時間的影響

注：*P＜0.05**，P＜0.01vs對照組

組別　劑量（g/kg）　凝血時間（s）　出血時間（s）空白對照　 -　161.5±69.3　843.0±285.8益母草復方0.52　151.2±89.2　838.0±515.2 1.56　136.1±96.1　735.2±341.8 4.68　90.8±68.0*　352.4±152.9**宮血寧　0.10　105.1±46.6*　549.6±146.4*

3　結 論

血液離體后與異物表面接觸，凝血過程被啟動，參與凝血的因子被激活，最后使纖維蛋白原轉變?yōu)槔w維蛋白所用的時間即為凝血時間。益母草復方高劑量組能縮短小鼠凝血時間和出血時間，但對凝血四項指標沒有顯著影響，表明其凝血作用可能通過內(nèi)源性途徑產(chǎn)生［1-3］。

綜上所述，益母草復方能有效的止血，其作用機制還有待更進一步研究。

［1］ 劉瓊英，陳樂群，李紅.中西醫(yī)結合療法對產(chǎn)后并發(fā)子宮內(nèi)膜炎產(chǎn)婦炎性因子的影響［J］.實用臨床醫(yī)藥雜志，2013，17（13）：134.

［2］ 陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：347.

［3］ 嚴楓，鄧義德，楊華.杜虹花不同提取部位止血作用的實驗研究［J］.上海中醫(yī)藥雜志，2013，47（7）：93-95.

表2　益母草復方對PT、APTT、TT、FIB的影響

表2　益母草復方對PT、APTT、TT、FIB的影響

注：*P＜0.05vs對照組

組別　劑量（g/kg）　PT（s）　APTT（s）　TT（s）　FIB（mg/dL）空白對照　-　12.82±0.85　16.86±2.08　26.16±2.01　17.22±2.36云南白藥　0.20　12.86±0.62　14.28±2.22　29.28±0.94　21.28±3.86* 0.52　12.92±0.84　17.96±1.65　26.66±1.91　18.68±3.42益母草復方　1.56　12.96±2.05　16.58±2.01　23.50±2.03　16.96±1.78 4.68　12.93±0.21　14.60±3.01　25.38±3.90　20.82±3.16*

R282.710.5

B

1671-8194（2016）21-0030-01