TC1和β?catenin在舌鱗狀細胞癌中的表達及意義

白琳琳,張　黎,陳松巖,張秀鵬,徐洪濤,王恩華

(1.中國醫科大學基礎醫學院病理學教研室,沈陽110001;2.沈陽二四二醫院病理科,沈陽110034)

TC1和β?catenin在舌鱗狀細胞癌中的表達及意義

白琳琳1,2,張黎1,陳松巖1,張秀鵬1,徐洪濤1,王恩華1

(1.中國醫科大學基礎醫學院病理學教研室,沈陽110001;2.沈陽二四二醫院病理科,沈陽110034)

目的探討甲狀腺癌1(TC1)與β-catenin在舌鱗狀細胞癌(OTSCC)組織中的表達及相關性,并分析其與臨床病理因素的相關性.方法應用免疫組織化學的方法檢測TC1、β-catenin在100例OTSCC中的表達.應用χ2檢驗、Fisher確切概率法、似然比檢驗和Spearman相關檢驗分析β-catenin與TC1表達水平的相關性,以及與OTSCC臨床病理因素的相關性.結果TC1在所有的OTSCC病例中均有不同程度的表達,而在正常舌部鱗狀上皮組織中呈陰性或弱陽性表達.TC1的高表達與OTSCC的低分化程度(P=0.040)和高TNM分期(P<0.001)相關,并與β-catenin的表達相關(r=0.368,P<0.001).β-catenin的異常表達與OTSCC的低分化(P=0.023)相關.結論OTSCC普遍存在TC1的高表達.TC1的表達與β-catenin的表達及OTSCC的惡性進展呈正相關.高水平的TC1表達可能通過增強Wnt信號通路的活性促進OTSCC的進展.

甲狀腺癌1;C8Orf4;β-catenin;舌鱗狀細胞癌

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甲狀腺癌1(thyroid cancer 1,TC1,C8Ofr4)是近年新發現的含106個氨基酸的蛋白質,最初通過乳頭狀甲狀腺癌及其周圍正常甲狀腺組織之間的消減雜交克隆獲得[1].研究顯示,TC1參與多種惡性腫瘤的發展,如甲狀腺癌[1]、胃癌[2]、乳腺癌[3]、肺癌[4]和卵巢癌[5].TC1的促腫瘤作用可能與其能夠上調β-catenin的轉錄激活作用及活化Wnt/β-catenin信號傳導通路的靶基因轉錄有關.但TC1在口腔鱗癌中的表達機制和臨床病理意義還不清楚.因此,本研究檢測了TC1和β-catenin在口腔舌鱗狀細胞癌(ora1 tongue squamous ce11 carcinoma,OTSCC)中的表達情況,旨在探討TC1與β-catenin的關系及二者與OTSCC臨床病理因素的相關性.

1　材料與方法

1.1研究對象

隨機選取2007-2013年間在中國醫科大學附屬第一醫院接受手術患者的OTSCC標本100例.年齡35～80歲,中位年齡56歲.男56例,女44例.根據世界衛生組織的分類系統(2005),通過顯微鏡觀察HE染色的切片確定組織學診斷和分級.其中,高分化74例,中分化16例,低分化10例,有淋巴結轉移9例.根據國際抗癌聯盟的TNM分期系統,Ⅰ期41例,Ⅱ期46例,Ⅲ期13例.

1.2免疫組織化學染色

切除的組織標本均經10%中性甲醛固定24 h,石蠟包埋,4 μm厚連續切片,脫蠟,脫水,pH6檸檬酸緩沖液中高壓抗原修復1.5 min.滴加1∶200稀釋的兔抗TC1多克隆抗體(ab133885,Abcam公司)、鼠抗β-catenin單克隆抗體(610154;BD生物技術公司),4℃孵育過夜.采用免疫組織化學SP法檢測抗體.以PBS代替一抗作陰性對照.

免疫組化染色評估:所有切片由2位病理醫師在不了解病例資料的情況下進行盲法閱片和評分.每張切片隨機選取5個高倍視野(X400),每個視野計數100個腫瘤細胞.TC1、β-catenin主要在OTSCC的細胞質中表達,染色強度陰性、弱陽性、中等陽性和強陽性分別記為0、1、2和3分.同時,計算每例陽性染色細胞的百分比.百分比<25%、25%～ <50%、50%～<75%和≥75%分別記為1、2、3和4分.將2個分值相乘,根據最終得分,將0、≤6、≥8者分別評為陰性、低表達、高表達.

1.3統計學分析

采用χ2檢驗、Fisher確切概率法和似然比檢驗β-catenin、TC1與OTSCC臨床病理因素的相關性;采用Spearman相關分析檢驗β-catenin與TC1表達水平的相關性.P<0.05為差異有統計學意義.

2　結果

2.1TC1的表達與OTSCC的低分化程度和高TNM分期相關

在100例OTSCC中均可觀察到細胞質中TC1的表達.TC1在79例中呈高表達(79/100,79.0%),但在舌部的正常鱗狀上皮組織中卻是弱陽性或陰性表達(圖1).TC1的高表達與OTSCC的低分化程度(P=0.040)和高TNM分期(P<0.001)相關.但TC1的表達與患者的性別(P=0.268)、年齡(P=0.057)和淋巴轉移狀態(P=0.198)不相關(表1).

圖1　TC1在OTSCC組織中的表達SPX200Fig.1The expression of TC1 in OTSCC SPX200

2.2β-catenin的表達與OTSCC的低分化相關

在舌部的正常鱗狀上皮組織中,β-catenin在細胞膜上呈高表達,但在大多數OTSCC中,β-catenin的細胞膜表達為弱陽性或陰性.β-catenin在62例OTSCC的細胞質中異常表達,在其他38例OTSCC中呈陰性表達(圖2).β-catenin的細胞質表達與OTSCC的低分化相關(P=0.023),與患者的性別(P=0.166)、年齡(P=0.556)、TNM分期(P=0.058)和淋巴轉移狀態(P=0.331)無相關性(表1).

2.3TC1的高表達與β-catenin的異常表達相關

進一步研究OTSCC中TC1的表達與β-catenin之間的相關性,結果發現:β-catenin細胞質表達的病例中有90.32%(56/62)同時顯示了TC1高表達;而βcatenin細胞質高表達的病例中僅有1例為TC1低表達.統計結果表明,TC1與β-catenin能夠協同表達,二者呈顯著正相關(r=0.368,P<0.001)(表2).

3　討論

Wnt/β-catenin信號通路在包括口腔組織在內的多種細胞和組織的發生、增生、再生和分化中起重要作用[6].Wnt/β-catenin信號通路激活的關鍵是βcatenin在細胞核內的蓄積和轉錄激活.β-catenin的異常表達可見于多種腫瘤,如肝癌、結腸癌、肺癌等,與腫瘤的發生和進展密切相關[7～11].本研究結果也證實OTSCC組織中存在β-catenin的蓄積,并發現β-catenin的異常蓄積與OTSCC的低分化程度相關.表明Wnt/β-catenin信號通路的激活與口腔癌的發生和發展密切相關[6,12,13].

圖2　β?catenin在OTSCC組織中的表達SPX 200Fig.2 The expression of β?catenin in OTSCC SPX 200

表1　TC1和β?catenin在OTSCC中的表達Tab.1 The expressions o f TC1 and β?catenin in OTSCC

表2　OTSCC中TC?1與β?catenin表達的相關性Tab.2 The correlation be tween the exp ression o f TC1 and β?catenin in OTSCC

TC1是新發現的Wnt/β-catenin信號通路的調控因子.TC1可以競爭性地解除Chibby對β-catenin的抑制作用,上調β-catenin的轉錄激活作用,促進Wnt靶基因的表達[4].TC1的異常表達可見于甲狀腺癌[1]、胃癌[2]、乳腺癌[3]、肺癌[4]以及卵巢癌[5]等許多腫瘤中,在腫瘤的發生和發展中發揮著重要作用.目前,許多口腔鱗癌的研究焦點都集中于β-catenin的異常蓄積方面[13],而TC1在口腔鱗癌中的表達和功能尚不清楚.本研究檢測了TC1在OTSCC中的表達情況,發現TC1的高表達與OTSCC的低分化和高TNM分期有關.表明TC1的表達在OTSCC的惡性轉化和進展過程中都發揮了重要作用.進一步研究發現,OTSCC中TC1的高表達與β-catenin的異常細胞質蓄積呈正相關,即TC1與β-catenin在OTSCC中能夠協同表達.提示TC1可通過上調βcatenin的轉錄活性激活Wnt信號通路的靶基因轉錄,從而促進OTSCC的進展.

綜上所述,TC1的高表達是OTSCC的普遍現象.TC1的高表達與β-catenin的表達和OTSCC的惡性進展呈正相關.TC1的高表達可能通過增強Wnt信號通路的活性來促進OTSCC的進展.深入研究TC1在口腔鱗癌中發揮的作用和分子機制將有助于闡明口腔鱗癌的發生和進展機制,并為臨床基因靶向治療提供潛在靶點和理論基礎.

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(編輯王又冬)

Expressionsof TC1andβ-catenin in Oral Tongue Squamous Cell Carcinomasand Their Significance

BAILin-1in1,2,ZHANGLi1,CHENSong-yan1,ZHANGXiu-peng1,XUHong-tao1,WANGEn-hua1
(1.Department of Patho1ogy,Co11ege of Basic Medica1 Sciences,China Medica1 University,Shenyang 110001,China;2.Department of Patho1ogy,Hospita1 of Shenyang242,Shenyang110034,China)

Objective To examine the expressions and corre1ations of TC1 and β-catenin in ora1 tongue squamous ce11 carcinomas(OTSCCs), and their re1ationships with the c1inic patho1ogica1 parameters of OTSCCs.M ethods The expressions of TC1 and β-catenin were examined in 100 cases of OTSCCs using immunohistochemistry.Results The expression of TC1 was observed in a11 cases of OTSCCs,but was negative or weak in norma1 squamous epithe1ia1 tissues of tongue.The high expression of TC1 was corre1ated with the poor differentiation(P=0.040)and advanced TNM stage(P<0.001).The expression of TC1 was corre1ated with the abnorma1 expression of β-catenin(corre1ation coefficient=0.368,P< 0.001).The abnorma1 expression of β-catenin was corre1ated with the poor differentiation(P=0.023)in OTSCCs.Conclusion The high expression of TC1 was common in OTSCCs,and positive1y corre1ated with the expression of β-catenin and the progression of OTSCCs.The high 1eve1 of TC1mightpromotetheprogressionofOTSCCsbyenhancing theactivityofWntsigna1ingpathway.

thyroid cancer 1;C80Of4;β-catenin;ora1 tongue squamous ce11 carcinomas

R361

A

0258-4646(2016)03-0193-04

10.12007/j.issn.0258-4646.2016.03.001

國家自然科學基金(81372497);遼寧省高等學校優秀人才支持計劃(LR2015067)

白琳琳(1986-),女,醫師,本科.

徐洪濤,E-mai1:htxu77@163.com

2015-10-08

網絡出版時間: