腦脊液培養病原菌分布及耐藥性分析

張楠 戴蕾 朱文波 周萬青 張之烽 沈瀚★

腦脊液培養病原菌分布及耐藥性分析

張楠 戴蕾 朱文波 周萬青 張之烽 沈瀚★

目的 探討臨床送檢腦脊液培養病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理使用抗生素提供依據。方法 采用whonet軟件對2009年1月至2014年6月臨床送檢的腦脊液培養陽性病原菌分布及耐藥性資料進行回顧性分析。結果 共分離出病原菌110株，其中革蘭陽性（G+）球菌40株（36.4%），革蘭陰性（G-）桿菌53株（48.2%），真菌15株（13.6%），G-球菌2株（1.8%）。主要病原菌分布為：鮑曼不動桿菌21株（19.1%）、表皮葡萄球菌11株（10%）、金黃色葡萄球菌8株（7.3%）和銅綠假單胞菌7株（6.4%）。藥敏結果顯示，G+球菌對萬古霉素、利奈唑胺和替考拉寧敏感率最高；G-桿菌中，鮑曼不動桿菌耐藥較嚴重，其藥物敏感性均＜30%，其中阿米卡星敏感率為23.5%，銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌的藥物敏感性均較好。結論 臨床送檢腦脊液培養樣本中以G-桿菌的分離率較高，耐藥情況不明顯，可為中樞神經系統感染的用藥提供建議和參考。

腦脊液 細菌培養 抗生素 耐藥 感染

中樞神經系統感染嚴重威脅人類生命，全球每年約100萬人罹患細菌性腦膜炎，其中約17.3萬人死亡［1］。在不同地區不同醫療機構，病原菌的流行病學分布和耐藥情況都有所不同。作者回顧性分析本院2009 年1月至2014年6月腦脊液培養陽性標本病原菌分布及藥敏結果，以期為臨床合理用藥提供參考。

1 臨床資料

1.1 菌株來源 收集本院2009年1月至2014年6月患者腦脊液培養陽性病原菌共110株，同一患者相同菌株不進行重復統計。其中男性79例，女性31例，年齡37～95歲，平均（65±17）歲。所研究對象基礎疾病包括腦血管病、腦外傷、顱內占位、慢性阻塞性肺疾病、慢性心力衰竭、心瓣膜病、膽道疾病、肝硬化以及腫瘤性疾病等。大腸埃希菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、銅綠假單胞菌ATCC 27853，肺炎克雷伯菌ATCC 700603、糞腸球菌ATCC 29212和白假絲酵母菌ATCC 90028，均購自衛生部臨床檢驗中心。

1.2 菌株分離、鑒定及藥敏 樣本接種和病原菌分離培養及鑒定按照《全國臨床檢驗操作規程》進行。采用法國生物梅里埃公司Vitek自動細菌鑒定儀進行菌株鑒定，哥倫比亞羊血瓊脂平板、巧克力平板、M-H瓊脂平板購自法國生物梅里埃公司，藥敏紙片為英國Oxoid公司產品。藥敏試驗采用K-B法，藥敏結果依據美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）2012年版判定標準判讀。抗菌藥物紙片為：氨芐西林、哌拉西林、氨芐西林/舒巴坦、替卡西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、亞胺培南、美洛培南、阿米卡星、環丙沙星、米諾環素、替加環素、青霉素G、苯唑西林、阿米卡星、高濃度慶大霉素、利福平、利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧。

1.3 統計學方法 采用世界衛生組織細菌耐藥性監測中心推薦的WHONET5.4軟件對藥敏數據進行統計分析，進行耐藥性分析的病原菌采用患者首次分離株。

2 結果

2.1 菌種分布 110株病原菌中，革蘭陽性（G+）球菌40株，占36.4%，革蘭陰性（G-）桿菌53株，占48.2%，G-球菌2株，即腦膜炎奈瑟球菌，占1.8%，真菌15株，即新生隱球菌，占13.6%。

2.2 主要G-桿菌對常用抗菌藥物的耐藥情況 見表1。

表1 主要G-桿菌對常用抗菌藥物的耐藥情況（%）

2.3 主要G+球菌對常用抗菌藥物的耐藥情況 見表2。

表2 主要G+球菌對常用抗菌藥物的耐藥情況（%）

3 討論

中樞神經系統感染嚴重威脅患者生命，早期診斷且合理的抗感染治療非常重要，經驗性用藥多選用能夠通過血腦屏障的抗生素如青霉素、第三代頭孢、磺胺類等［2，3］。腦脊液培養陽性是確診中樞神經系統感染的主要依據，在確定腦脊液細菌培養和藥敏結果后合理進行抗生素用藥調整，盡早控制顱內感染，降低病死率。本文旨在分析本院腦脊液感染細菌種類及耐藥情況，以期為臨床提供參考。

本資料顯示，2009年1月至2014年6月本院中樞神經系統感染以G-桿菌為主，占48.2%，其中鮑曼不動桿菌最多，占19.1%，其次為銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌，G+球菌中最多的為表皮葡萄球菌，其次為金黃色葡萄球菌和糞腸球菌。然而表皮葡萄球菌是院內感染的主要致病菌之一，為皮膚正常菌群，故在標本采集和檢測中污染的可能性較大，作者檢查病歷顯示有3例表皮葡萄球菌感染為無效，可視為污染菌。有文獻報道［4，5］，G-桿菌比例高于G+球菌，此差異可能是本院患者來源地域差異和標本量相對較少的原因。值得注意的是，本資料中分離出引起細菌性腦膜炎的常見致病菌腦膜炎奈瑟球菌2例。除此以外，還有新生隱球菌15例，占分離總病原菌的13.6%。

分離出的G+球菌中，排在前三位的為表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和糞腸球菌，葡萄球菌屬為中樞神經系統感染極為重要的病原菌，本數據未發現耐萬古霉素和利奈唑胺的菌株，萬古霉素依然保持良好的抗菌活性，表皮葡萄球菌和金葡菌對青霉素類耐藥率均為100%，對替考拉寧未發現耐藥［5］，故針對葡萄球菌引起的顱內感染經驗性用藥上，可考慮聯合使用替考拉寧。糞腸球菌中，高濃度慶大霉素耐藥率為57.1%，其他抗生素均未發現耐藥。

對于G-桿菌性顱內感染，鮑曼不動桿菌分離株數有逐年上升的趨勢。本資料數據顯示，鮑曼不動桿菌對大部分抗生素呈高度耐藥，所有耐藥率均＞75%，敏感率最高的依次為阿米卡星23.5%和哌拉西林/他唑巴坦20.8%，對替加環素和美洛培南的耐藥率為80%和93.3%，可見中樞神經系統鮑曼不動桿菌感染耐藥性依然嚴重［6～8］。銅綠假單胞菌的總體耐藥性較低，除了氨芐西林、哌拉西林和米諾環素的耐藥率為100%，亞胺培南的敏感率為55.6%，頭孢他啶的敏感率為66.7%，其他抗生素敏感率均＞70%，其中阿米卡星的敏感率最高為100%，亞胺培南的敏感率有所偏低，值得關注。腸桿菌屬的肺炎克雷伯菌的分離率，僅次于鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌，本資料數據顯示肺炎克雷伯菌除了對氨芐西林的天然耐藥性，哌拉西林的敏感率為60%，其他抗生素敏感率均＞80%，這表明腦脊液肺炎克雷伯菌感染，有較好的抗菌素敏感性。

腦脊液培養標本的留取是確診病原菌和藥敏結果的前提，由于腦脊液病原菌量少，腦膜炎奈瑟球菌等對外界環境抵抗力弱，應在抗生素使用前采集標本并及時送檢和接種，有文獻提出建議床邊直接接種標本以提高腦脊液培養的陽性率［9］。本資料僅為回顧性數據分析，為提高顱內感染的快速診斷和抗生素的有效應用，還需要進一步研究。

1 Van de Beek D，de Gans J，Tunkel AR，et al.Community-acquired bacterial meningitis in adults.N Engl J Med，2006，354（1）：44～53.

2 趙振.1012份腦脊液標本的病原菌及耐藥性分析.臨床血液學雜志，2014，27（8）：665～670.

3 Tunkel A R，Hartman B J，Kaplan S L，et al.Practice guidelines for the management of bacterial meningitis.Clin Infect Dis，2004，39（9）：1267～1284.

4 母麗媛，呂曉菊，馬曉波，等.2300份成年人腦脊液培養及菌株耐藥分析.中國抗生素雜志，2007，32（4）：252～255.

5 徐明，石廣志，唐明忠，等.1997～2010年某院神經外科患者腦脊液分離菌及其耐藥性研究.中華實驗和臨床感染病雜志：電子版，2012，6（3）：202～208.

6 向光芳，李科，張媛媛，等.我院2010年1月－2011年7月神經外科腦脊液病原菌種類及耐藥性分析.中國藥房：2012，23（22）：2050～2052.

7 金亮.338份腦脊液細菌培養及藥物敏感性情況分析.臨床薈萃，2014，29（5）：552～555.

8 荊楠，唐明忠，劉志忠，等.神經內外科腦脊液標本細菌流行病學分布和耐藥性分析.首都醫科大學學報，2012，33（2）：143～147.

9 曾玉.化膿性腦膜炎腦脊液細菌培養88例.中國檢驗醫學與臨床，2000，1（4）：F003.

210008 南京大學醫學院附屬鼓樓醫院檢驗科