宮頸高危型HPV分型檢測(cè)在宮頸癌篩查中的臨床意義

果海娜,何江耀,李　良,黃錦葉

(中山大學(xué)附屬東莞東華醫(yī)院 病理科，廣東 東莞523000)

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宮頸高危型HPV分型檢測(cè)在宮頸癌篩查中的臨床意義

果海娜,何江耀,李良,黃錦葉

(中山大學(xué)附屬東莞東華醫(yī)院 病理科，廣東 東莞523000)

宮頸癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，僅次于乳腺癌，據(jù)流行病學(xué)資料研究顯示，在發(fā)展中國(guó)家，女性宮頸癌的發(fā)病率較高，占據(jù)宮頸癌發(fā)病率的80%，宮頸癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療對(duì)降低宮頸癌發(fā)病率起到非常關(guān)鍵的作用。目前幾乎所有的流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)室研究數(shù)據(jù)均顯示，HPV感染是子宮頸癌的主要致病因素，尤其是HR-HPV持續(xù)感染與子宮頸癌高度相關(guān)，本研究通過(guò)宮頸脫落細(xì)胞HR-HPV分型檢測(cè)，探討其在宮頸癌預(yù)防與篩查中的臨床意義。

1　資料和方法

1.1臨床資料

采集2013年8月至2014年12月中山大學(xué)附屬東莞東華醫(yī)院婦科門(mén)診患有宮頸糜爛或健康體檢中心的體檢者宮頸脫落細(xì)胞共4169例進(jìn)行了HR-HPV分型檢測(cè)，其中318例患者作了宮頸醋酸試驗(yàn)及陰道鏡下宮頸活檢或由于其他疾病做了宮頸切除手術(shù)。患者年齡在18歲-76歲，平均年齡35.1±4.6歲。

1.2方法

1.2.1HPV分型檢測(cè)采用上海透景生命科技有限公司提供HPV分型流式點(diǎn)陣檢測(cè)試劑盒(液態(tài)芯片技術(shù))，其中高危型19種(HPV16、18、26、31、33、35、39、 45、51、52、53、55、 56、58、59、66、68、82、83)，具體操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2組織學(xué)觀察318例宮頸標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟切片，HE染色、光鏡觀察。參照Richard[3-1]宮頸上皮內(nèi)瘤(cervicalintraepithelialneoplasia,CIN)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，病理診斷為診斷子宮頸病變的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

病理診斷標(biāo)準(zhǔn)：將病理診斷≥CINⅡ或≥子宮頸腺上皮內(nèi)瘤變(CGIN)Ⅱ者視為病理檢查陽(yáng)性，病理診斷≤CINⅠ或≤CGINⅠ者視為病理檢查陰性。經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的2位病理醫(yī)生閱片后診斷。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

以宮頸組織病理做為金標(biāo)準(zhǔn)，運(yùn)用2×2行列資料檢驗(yàn)方法，評(píng)價(jià)應(yīng)用流式熒光雜交技術(shù)檢測(cè)HR-HPV宮頸癌早期診斷的敏感性與特異性。所有數(shù)據(jù)均使用SAS9.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，根據(jù)資料采用χ2檢驗(yàn)和Fisher精確概率法進(jìn)行分析，并設(shè)定顯著性水平為P<0.05。

2　結(jié)果

2.1HR-HPV感染年齡分布

本組病例受檢者平均年齡35.1±4.6歲，HR-HPV感染者平均年齡37.9歲，中位年齡37歲，各年齡組HR-HPV感染情況見(jiàn)表1,各年齡組婦女HR-HPV感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.3998，P=0.0002)。因≤20歲組例數(shù)偏少,比較感染率意義不大。各年齡段不同型別HR-HPV感染導(dǎo)致宮頸病變的情況見(jiàn)表2。

表1　HR-HPV感染的年齡分布情況

注：與21-30歲組比較，①P=0.0003；②P=0.0106；③P=0.851；與31-40歲組比較，④P=0.357；⑤P=0.014；與41-50歲組比較，⑥P=0.838

2.2HR-HPV感染情況

在接受HPV分型檢測(cè)的4169例標(biāo)本中有857 例HR-HPV陽(yáng)性(包括雙重和多重感染病例)，總陽(yáng)性率20.56%(857/4169)，共檢測(cè)出19種HR-HPV,各亞型分布及陽(yáng)性率見(jiàn)表3，HR-HPV感染陽(yáng)性率前5位的型別是52(5.09%)、16(3.09%)、53(2.21%)、58(2.16%)、39(1.87%)，這5種基因型共占本研究組HR-HPV感染人群的56.4%；HPV18型感染居第9位，陽(yáng)性率占1.27%。在檢測(cè)基因型別感染的結(jié)果中，存在單純感染、雙重感染和多重感染，各種感染模式見(jiàn)表4，以單純感染和雙重感染所占比例最高，占HR-HPV陽(yáng)性人群的93.9%。

表2　各年齡組不同型別HR-HPV感染所致宮頸病變情況

*有導(dǎo)致CINⅡ級(jí)以上病變的HR-HPV亞型

表3　HR-HPV陽(yáng)性標(biāo)本標(biāo)本型別分布及各型別陽(yáng)性率

*包括單純感染、雙重感染和多重感染

表4　HR-HPV陽(yáng)性標(biāo)本感染模式及其感染率

2.3HR-HPV感染所致宮頸病變情況

318例宮頸組織病理學(xué)檢查患者HR-HPV陽(yáng)性265例，陰性53例；與宮頸組織病理學(xué)檢查結(jié)果對(duì)照見(jiàn)表5，由表5可見(jiàn)HR-HPV檢測(cè)對(duì)診斷CINII級(jí)以上宮頸病變的靈敏度為98.3%(58/59),特異度為20.1%(52/259),陽(yáng)性預(yù)告值為21.9%(58/265),陰性預(yù)告值為98.1%(52/53)。由表6可見(jiàn)265例HR-HPV陽(yáng)性的病例中58例CINII級(jí)以上宮頸病變,包括1例宮頸浸潤(rùn)性腺癌,HPV感染前三位亞型是16、52和58型，分別為31、10、4例，占77.6%(45/58)。HPV16亞型與52型導(dǎo)致CINII級(jí)以上宮頸病變相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.209，P=0.0005；HPV16型和58型導(dǎo)致CINII級(jí)以上宮頸病變相比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.061，P=0.080)；其中16型導(dǎo)致53.4%(31/58)CINII級(jí)以上的病變。還應(yīng)該引起注意的是，所有宮頸癌的病例均為單一型別感染，HPV45型和26型感染率不高，但其單獨(dú)感染可以導(dǎo)致宮頸鱗狀細(xì)胞癌，而且雖然HPV18型感染率亦不高，但1例腺癌的病人此型陽(yáng)性。

表5　HR-HPV感染與宮頸病理結(jié)果對(duì)照

表6　宮頸病理結(jié)果與HR-HPV各型別感染對(duì)照

3　討論

人類乳頭瘤病毒(HPV)近20年已鑒定出120余種基因型，HPV是乳多空病毒科多瘤病毒亞科的一個(gè)雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其中約40種HPV可感染生殖系統(tǒng)上皮細(xì)胞，被命名為“生殖型”HPV。根據(jù)致病力的大小將HPV分為高危型和低危型兩大類，近年的研究發(fā)現(xiàn)，幾乎所有宮頸癌與HR-HPV持續(xù)感染有關(guān)[2]。

HR-HPV感染主要發(fā)生在育齡婦女，本研究發(fā)現(xiàn)HR-HPV感染率與年齡相關(guān)，各年齡段感染率有顯著性差異，其中感染率最高的年齡段在21-30歲，與31-50歲組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但51.7%CINⅡ級(jí)以上病變發(fā)生在31-40歲，5%-10%的HPV感染在35歲后可轉(zhuǎn)變?yōu)槌掷m(xù)感染狀態(tài)[3]應(yīng)對(duì)該年齡階段的婦女重點(diǎn)采取宮頸癌防控措施。

近年來(lái)，大量多中心的研究[4-6]，均發(fā)現(xiàn)全球HPVl6為最主要的基因型，其次是18型，其他型別具有地域性差別，如HPV45在非洲相對(duì)較多，HPV33在歐洲較多，而HPV58和52在亞洲較多。國(guó)內(nèi)不同地區(qū)HR-HPV感染率和型別也不盡相同[7-13]。本研究在4169例標(biāo)本中檢出857 例HR-HPV陽(yáng)性(包括雙重和多重感染病例)，總陽(yáng)性率20.56%(857/4169)，共檢測(cè)出19種HR-HPV,HR-HPV感染陽(yáng)性率前5位的型別是52(5.09%)、16(3.09%)、53(2.21%)、58(2.16%)、39(1.87%)，這5種基因型共占本研究組HR-HPV感染人群的56.4%；HPV18型感染居第9位，陽(yáng)性率占1.27%，本研究為針對(duì)本地區(qū)HR-HPV感染研制疫苗提供依據(jù)。本組病例通過(guò)檢測(cè)HR-HPV基因型別感染，發(fā)現(xiàn)存在單純感染、雙重感染和多重感染，以單純感染和雙重感染所占比例最高，占HR-HPV陽(yáng)性人群的93.9%，而發(fā)生浸潤(rùn)性癌的病人均為單一型別感染，可能雙重或多重感染并不能增強(qiáng)致病力。

2012年，美國(guó)婦產(chǎn)科醫(yī)師協(xié)會(huì)(ACOG)和美國(guó)陰道鏡和子宮頸病變協(xié)會(huì)(ASCCP)指南明確指出，HPV16和18型感染者，即使細(xì)胞學(xué)檢查陰性，也應(yīng)該行陰道鏡檢查[14]。本組通過(guò)研究不同型別感染導(dǎo)致宮頸癌前病變及宮頸癌的致病力，去除年齡因素的影響，發(fā)現(xiàn) 16型的感染導(dǎo)致宮頸癌前病變及宮頸癌與其他常見(jiàn)亞型感染相比有顯著差異，因此，雖然HPV16型在本組研究中感染率居第二位，但其致病力還是最強(qiáng)的。本組研究HPV18型感染率不高，但1例腺癌的病人此型陽(yáng)性，提示當(dāng)HPV18型陽(yáng)性時(shí)要注意是否有腺癌發(fā)生。還應(yīng)該引起注意的是，雖然HPV45型和26型感染率不高，但其單獨(dú)感染可以導(dǎo)致宮頸鱗狀細(xì)胞癌，這二種型別是否有強(qiáng)致病力，還需要增加樣本量進(jìn)一步研究。

隨著對(duì)HPV亞型感染與子宮頸癌及其癌前病變關(guān)系的研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)不同亞型HPV的致病能力不同，高危型HPV感染直接威脅女性的生命安全。2007年，國(guó)際癌癥中心即提出，可以將HPV分型檢測(cè)作為子宮頸癌初篩的手段之一[15]。本研究顯示，HR-HPV分型檢測(cè)對(duì)于宮頸癌前病變及宮頸癌的靈敏度(98.3%)和陰性預(yù)告值(98.1%)均很高，其特異度(20.1%)和陽(yáng)性預(yù)告值(21.9%)均較低。分析其原因，從高危型HPV感染到發(fā)展為宮頸癌CINII級(jí)以上病變尚需要一段時(shí)間，本組HPV主要感染人群是21-30歲人群，而發(fā)生CINII級(jí)以上病變的人群主要在31-40歲的人群，能夠說(shuō)明從感染到致病大約需要10年左右的時(shí)間，這與文獻(xiàn)報(bào)道相一致[16,17]；而且宮頸癌前病變和宮頸癌與同一型別持續(xù)感染有關(guān)，因此應(yīng)用敏感性很高，并且可以分型檢測(cè)的方法檢測(cè)HR-HPV是否同型別持續(xù)感染，是宮頸癌早期篩查的重要手段，對(duì)宮頸癌及其癌前病變篩查具有非常重要的臨床意義。

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廣東省東莞市科技計(jì)劃項(xiàng)目(201110515046227)

1007-4287(2016)08-1340-04

果海娜(1970-),副主任醫(yī)師,主要研究方向:女性生殖系統(tǒng)腫瘤和乳腺腫瘤。

2015-06-16)