SSA/Ro60自身抗原的基因克隆與表達純化*

牛廣華，張　程，呂　丹，高玉潔

(遼寧中醫藥大學附屬醫院，沈陽 110032)

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SSA/Ro60自身抗原的基因克隆與表達純化*

牛廣華，張程△，呂丹，高玉潔

(遼寧中醫藥大學附屬醫院，沈陽 110032)

目的克隆人SSA/Ro60自身抗原并表達純化，為輔助診斷自身免疫提供物質基礎。方法采用RT-PCR技術擴增SSA/Ro60基因，定向插入pPICZ表達載體，轉入畢赤酵母表達系統，將獲得的重組蛋白行SDS-PAGE和Western blotting鑒定。結果擴增出約1.5 kb的SSA/Ro60全長序列，獲得相對分子質量60×103的重組蛋白，經鑒定具有SSA/Ro60抗原性。結論成功克隆并表達SSA/Ro60，為診斷自身免疫疾病奠定基礎。

SSA/Ro60;基因克隆;表達純化

干燥綜合征(SS)是一種全身外分泌腺的慢性炎性自身免疫反應疾病。研究表明，干燥綜合征A型抗原(SSA)與SS、系統性紅斑狼瘡(SLE)等疾病的發生、發展及預后判斷密切相關[1]。SSA抗原是細胞質中一類小核糖核酸與蛋白質結合的復合物,是一種重要的自身抗原[2]。近年來越來越多的學者對自身免疫性疾病進行深入的研究，對Ro抗原的認識也越來越深，Ro成為了核糖核蛋白復合物(RNP)抗原中最常見的抗原之一[3]。后來發現，Ro抗原與SSA屬同一種自身抗原，故命名SSA/Ro抗原[4]。同時有研究者發現檢測SSA/Ro抗原在臨床上對自身免疫性疾病的診斷有極其重要的意義[5]。該抗原有52 000和60 000兩種相對分子質量的蛋白，分別稱為SSA/Ro52和SSA/Ro60。SSA/Ro60存在于多種自身免疫性疾病患者體內,生理狀態下SSA/Ro60核蛋白及hYRNA共同構成核糖核蛋白復合體SSA/Ro60抗原，與多種自身免疫疾病密切相關[6]。目前檢測SSA的免疫雙擴散法無法區分Ro52和Ro60，免疫印跡法只能檢出Ro52，常常導致Ro60的漏檢[5]。……