糖尿病自身抗體檢測(cè)在成人隱匿型糖尿病診斷中的應(yīng)用

胡　暉,陸偉成,劉偉才

(廣東省佛山市三水區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　528100)

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糖尿病自身抗體檢測(cè)在成人隱匿型糖尿病診斷中的應(yīng)用

胡暉,陸偉成,劉偉才

(廣東省佛山市三水區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科528100)

目的為2型糖尿病患者中成人隱匿型糖尿病(LADA)的早期診斷、病情評(píng)估及治療提供依據(jù)。方法通過免疫印跡四聯(lián)檢測(cè)試劑條對(duì)319例2型糖尿病患者進(jìn)行糖尿病自身抗體[谷氨酸脫羧酶抗體(GAD)、胰島細(xì)胞抗體(ICA)、胰島素抗體(IAA)、酪氨酸磷酸化酶自身抗體(IA-2)]檢測(cè)，同時(shí)通過生化儀對(duì)空腹血糖、糖化血紅蛋白、空腹C肽、餐后2 h C肽進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算陽(yáng)性率，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果GAD、IA-2、IAA、ICA的陽(yáng)性率分別為14.42%、4.70%、4.70%、5.33%，GAD、IA-2、IAA、ICA聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率為24.50%，顯著高于單一抗體檢測(cè)。自身抗體陰性組和陽(yáng)性組空腹血糖、空腹C肽水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，糖化血紅蛋白、餐后2 h C肽水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論檢測(cè)血清GAD、IA-2、IAA、ICA能夠?yàn)長(zhǎng)ADA的早期診斷提供依據(jù)，同時(shí)更好地進(jìn)行病情評(píng)估和治療方案的調(diào)整。

糖尿病自身抗體；免疫印跡；胰島細(xì)胞功能；成人隱匿型糖尿病

糖尿病是胰島素分泌或胰島素作用缺陷引起的以高血糖為特征的代謝性疾病，主要分為1型和2型糖尿病，在我國(guó)有較高的發(fā)病率，特別是以甜食為主的地區(qū)。成人隱匿型糖尿病(LADA)起病相對(duì)較晚，臨床表現(xiàn)酷似2型糖尿病，因而容易導(dǎo)致漏診和誤診。本研究通過對(duì)2型糖尿病患者糖尿病自身抗體[谷氨酸脫羧酶抗體(GAD)、胰島細(xì)胞抗體(ICA)、胰島素抗體(IAA)、酪氨酸磷酸化酶自身抗體(IA-2)]的聯(lián)合檢測(cè)，結(jié)合相應(yīng)生化指標(biāo)，為臨床對(duì)LADA的早期診斷、病情評(píng)估及治療提供依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料糖尿病組為本院2014年12月至2015年9月經(jīng)臨床初診的319例2型糖尿病患者，其中男176例，年齡22～86歲、平均56.9歲；女143例，年齡21～88歲、平均55.7歲。對(duì)照組為同期本院健康體檢者100例，其中男50例，年齡24～85歲、平均55.1歲；女50例，年齡22～88歲、平均56.0歲，空腹血糖及餐后2 h血糖均正常，無糖尿病家族史。

1.2儀器與試劑空腹C肽和餐后2 h C肽采用雅培I2000分析儀及原裝試劑檢測(cè)，空腹血糖、糖化血紅蛋白采用雅培C16000生化分析儀及原裝試劑檢測(cè)，GAD、IA-2、IAA、ICA采用Tenfly Blot-c免疫印跡分析儀及深圳亞輝龍自身免疫性糖尿病抗體譜檢測(cè)試劑盒檢測(cè)。

1.3方法采用免疫印跡法對(duì)所有研究對(duì)象的血清同時(shí)作GAD、IA-2、IAA、ICA 4項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，同時(shí)采用生化分析儀對(duì)相應(yīng)血清和靜脈血做空腹血糖、空腹C肽、糖化血紅蛋白、餐后2 h C肽檢測(cè)。所有操作嚴(yán)格按照儀器及試劑說明書進(jìn)行。

2　結(jié)　　果

4種糖尿病自身抗體檢測(cè)結(jié)果顯示糖尿病組GAD、IA-2、IAA、ICA陽(yáng)性率分別為14.42%、4.70%、4.70%、5.33%，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；糖尿病組GAD、IA-2、IAA、ICA4項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率為24.50%，明顯高于單一抗體陽(yáng)性率。自身抗體陰性組和陽(yáng)性組空腹血糖、空腹C肽水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，糖化血紅蛋白、餐后2 h C肽水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見表1、2。

表1　　4種糖尿病自身抗體檢測(cè)結(jié)果[n(%)]

注：與對(duì)照組相比，▲P<0.05；與單一抗體相比，△P<0.05。

表2　　自身抗體陽(yáng)性組與陰性組檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果±s)

注：自身抗體陽(yáng)性組為GAD、IA-2、IAA、ICA 4聯(lián)條帶中任意條帶陽(yáng)性的患者組合，自身抗體陰性組為GAD、IA-2、IAA、ICA 4聯(lián)條帶中全部條帶均陰性的患者組合。

3　討　　論

LADA是胰島自身反應(yīng)性T細(xì)胞所介導(dǎo)，最終導(dǎo)致胰島β細(xì)胞遭受免疫損害的自身免疫性疾病，臨床早期表現(xiàn)酷似2型糖尿病[1]。但因其本質(zhì)是1型糖尿病，體內(nèi)存在糖尿病自身免疫性抗體，通過自身抗體的檢測(cè)可以將其與2型糖尿病區(qū)別。目前，LADA的診斷依據(jù)主要是：起病年齡≥30歲、至少1種胰島自身抗體陽(yáng)性、診斷后至少6個(gè)月不需胰島素治療[2]。

糖尿病自身抗體是糖尿病發(fā)病過程中胰島自身免疫損傷而產(chǎn)生的，主要包括GAD、IA-2、IAA、ICA。GAD是胰島β細(xì)胞遭受免疫破壞的一個(gè)特異性標(biāo)志，也是最早出現(xiàn)的一種抗體，持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，其陽(yáng)性預(yù)示著內(nèi)源性胰島素的缺乏或喪失，對(duì)成年人起病、臨床初診為2型糖尿病的患者診斷為L(zhǎng)ADA起著決定性作用[3-4]。ICA是唯一一個(gè)針對(duì)破壞胰島β細(xì)胞成分的特異性抗體，也是最早用來預(yù)測(cè)1型糖尿病的免疫球蛋白，其陽(yáng)性預(yù)示著胰島β細(xì)胞功能的衰竭，隨著病程的延長(zhǎng)陽(yáng)性率有所減低[5]。IAA是一種能夠與胰島細(xì)胞內(nèi)多種抗原結(jié)合的混合抗體，是胰島細(xì)胞自身免疫的重要指標(biāo)，在甲狀腺疾病和健康人群中均有一定的陽(yáng)性率，因而不是糖尿病的特異性抗體，單純IAA陽(yáng)性不能作為1型糖尿病的標(biāo)志，僅表明有進(jìn)展為糖尿病的自身免疫傾向[6]。IA-2是GAD后發(fā)現(xiàn)的又一重要胰島細(xì)胞自身免疫抗體，與胰島結(jié)合分泌相關(guān)，是胰島免疫早期成分，能反映胰島β細(xì)胞損壞而導(dǎo)致的早期發(fā)病，作用比GAD更具特異性，但抗體可隨著病程的延長(zhǎng)而陽(yáng)性率減低，GAD合并IA-2陽(yáng)性，預(yù)示著更快的胰島β細(xì)胞功能損害[7]。

過往針對(duì)糖尿病自身抗體的檢測(cè)主要采用敏感性尚可的ELISA試劑盒，但特異性較差，非特異性反應(yīng)較多，不利于臨床的診斷和治療[8]，而隨著商品化免疫印跡法試劑條帶的問世，讓更多的基層醫(yī)院也能準(zhǔn)確、及時(shí)、標(biāo)準(zhǔn)化地檢測(cè)糖尿病自身抗體，對(duì)胰島細(xì)胞抗體譜進(jìn)行觀察，為臨床提供早期診斷、病情評(píng)估和治療的依據(jù)。

本次研究顯示，糖尿病組GAD、IA-2、IAA、ICA的陽(yáng)性率分別為14.42%、4.7%、4.7%、5.33%，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與陳美才等[9]研究的放射配體法報(bào)道相比，陽(yáng)性率相當(dāng)，但相對(duì)放射配體法，免疫印跡法操作更加簡(jiǎn)單，更易于標(biāo)準(zhǔn)化，有利于基層醫(yī)院的項(xiàng)目開展，為臨床診斷提供更加及時(shí)的依據(jù)。熊東林等[10]也曾報(bào)道2型糖尿病組中GAD、ICA、IAA3種抗體的陽(yáng)性率分別為9%、16%、11%，和本文接近但有一定的差異，可能與選擇的人群有關(guān)。在不同人群的大樣本研究中，LADA在2型糖尿病患者中的陽(yáng)性率差異較大，國(guó)外報(bào)道為4%～10%[11]。這也從一定程度上讓聯(lián)合檢測(cè)變得更加有意義，能更好地提高檢測(cè)的敏感性，降低漏診率，免疫印跡法一個(gè)測(cè)試條帶可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)抗體，更加省時(shí)省力，本次研究GAD、IA-2、IAA、ICA中任一條帶陽(yáng)性的概率為24.50%，明顯高于單項(xiàng)目陽(yáng)性率。

本研究還顯示糖尿病自身抗體陽(yáng)性組與陰性組空腹血糖、空腹C肽水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這與王競(jìng)等[12]報(bào)道的LADA與2型糖尿病臨床特點(diǎn)的較一致，表明僅靠空腹血糖和空腹C肽的檢測(cè)很難在早期將LADA與2型糖尿病區(qū)分開，及早地進(jìn)行糖尿病自身抗體的篩查更有利于LADA的早期診斷。同時(shí)抗體陽(yáng)性組與陰性組在糖化血紅蛋白、餐后2 h C肽水平上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這表明抗體陽(yáng)性組長(zhǎng)期血糖控制不如陰性組理想，需要更加嚴(yán)密的監(jiān)控，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)血糖變化，將血糖控制在合適水平，降低對(duì)人體的慢性損傷。因此，糖尿病自身抗體的檢測(cè)能更好地輔助診斷LADA，為臨床早期診斷、病情評(píng)估和治療提供依據(jù)。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.052

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