影響全自動血細胞分析儀BC-5380檢測結果的原因分析

樊祖茜，孫　雷，張　葉

(廣西壯族自治區欽州市婦幼保健院　535099)

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影響全自動血細胞分析儀BC-5380檢測結果的原因分析

樊祖茜，孫雷，張葉

(廣西壯族自治區欽州市婦幼保健院535099)

血細胞分析；BC-5380；影響因素

血常規是臨床三大常規之一，在臨床上有著重要的地位，對于疾病的診斷、治療方案的制訂以及療效的判斷都有很大幫助。本科室自2009年開始使用BC-5380全自動血細胞分析儀。BC-5380是采用半導體激光散射技術和細胞化學染色技術，配合改良的流式分析裝置對白細胞進行精確的五分類分析，具有雙通道白細胞五分類及異常細胞篩選功能，可提供27項參數、2個散點圖、2個直方圖以及異常報警等參數和信息。但是，在日常的工作中，血常規的檢測結果可能會因為一些生理、病理或操作等方面的因素，直接或間接影響到結果的準確性。為了避免檢測結果與臨床不符的情況，現將多年臨床工作中所了解到的影響BC-5380檢測結果的因素總結如下。

1　白細胞計數及分類的影響因素

白細胞計數及分類采用的方法學是激光散射法和電阻抗法，影響其檢測結果的因素有以下幾個方面：

1.1生理因素白細胞計數存在著日間差異，一天之內白細胞數量最高值與最低值可相差一倍，午后較高，清晨較低[1]。

1.2靜脈血與末梢血差異末梢血WBC計數結果稍高于靜脈血[2]。

1.3有核紅細胞的干擾有核紅細胞是未成熟的紅細胞，在健康人外周血中一般不會出現[3]。外周血中出現有核紅細胞，可能與貧血、缺氧等情況有關，并有報道稱有核紅細胞數量可作為新生兒窒息、新生兒呼吸窘迫綜合征的判斷指標[4]。當外周血出現有核紅細胞時，由于BC-5380方法學的缺陷，儀器會按照細胞體積的大小把有核紅細胞誤歸入到白細胞總數內，造成白細胞總數的假性增高，甚至會高達(50～100)×109/L，分類中以淋巴細胞為主。遇到這種情況可進行外周血白細胞糾正，公式為：校正后白細胞數=100/(100+有核紅細胞數)×校正前白細胞總數，公式中的有核紅細胞數為分類100個白細胞時所遇到的有核紅細胞總數。

1.4原始幼稚細胞當外周血出現原始幼稚細胞時，白細胞總數通常會異常增高，分類會出現“*”或者分類不準確，這時，需要用顯微鏡進行復檢以估算白細胞總數，白細胞總數=一個高倍鏡視野的白細胞平均個數×2×109/L[5]，并在油鏡下分類200個白細胞，與儀器進行比較，給臨床正確的提示。

2　血紅蛋白的影響因素

血紅蛋白檢測用的是比濁法，利用濁度的改變來判斷血紅蛋白量的多少，因此，能引起血漿顏色改變的都會影響結果的準確性(比如脂血)。脂血標本血漿顏色呈乳白色或者渾濁狀，需通過離心或者自然沉降后觀察血漿顏色才可發現是否為脂血標本，但是，在日常工作中血常規標本量大，且檢驗結果回報時間(TAT)為30 min，檢驗人員沒有足夠的時間去處理每一個標本，但是可以通過紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)這個指標來判斷。MCHC的正常范圍是320 ～360 g/L，MCHC增高常見于遺傳性球形紅細胞增多癥，但是一般不會超過380 g/L，當MCHC超過380 g/L時，可以離心觀察標本是否有脂血的現象，如果有，可以采用生理鹽水等比例置換血漿的方式，混勻后重新上機檢測就可以去除脂血的干擾。只有合格的標本才可以反映患者的真實情況，因此在做血常規檢查時要排除脂血的干擾。

3　血小板計數(PLT)的影響因素

血小板的檢測采用的是電阻抗法，根據體積的大小來識別血小板，影響因素有以下幾個方面：

3.1抽血因素的影響當抽血不順，標本中出現凝塊時，檢測結果會出現三系減少，或者出現“*”，血小板直方圖呈現尾部抬高(圖1)，或橫向波浪線的現象(圖2)，此時可用竹簽挑取或觀察標本的流動性來判斷是否有凝塊，當標本有凝塊時，凝塊處往往顏色比較深，流動速度不均勻，呈區域性的流動，比較緩慢，此時只有重新采樣復查才可以得到比較準確的結果。標本有凝塊，也容易造成儀器管道阻塞，對后期的維護和保養造成很大的不便，因此建議上機前先觀察標本是否有凝塊。在日常工作中，有時候也會出現肉眼看不見的微小凝集，這種情況也會造成PLT的假性減低，而對白細胞、紅細胞、血紅蛋白影響不大，PLT減低的程度與凝集的程度及標本PLT的基礎量有關。當初次檢測PLT<100×109/L時，或者與臨床疾病不符時，可以通過外周血涂片觀察片尾或片中是否有血小板成群聚集現象(圖3)，正常的血小板在EDTA-抗凝劑的作用下呈散在分布(圖4)。遇到微小凝集的標本需重新采血復查，才可以得到準確的結果。

3.2乙二胺四乙酸二鉀依賴性假性血小板減少癥(EDTA-PTCP)EDTA-PTCP會造成PLT的假性減低，原因是用EDTA鹽作為抗凝劑時，出現免疫介導的冷抗血小板自身抗體，這可能與血小板表面存在某種隱匿性抗原有關[6]。這是一種體外現象，并非疾病，在健康人群和各種疾病患者中都可以發生，暫時或者長時間伴隨都有可能。這種情況只能通過外周血涂片發現，在涂片中，血小板量不少，但是呈一小堆一小堆的聚集分布(圖5)，或出現衛星現象，用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管重抽還是如此。對于EDTA-PTCP，目前國內還沒有統一的方法，但可以通過以下方法進行糾正：(1)抽血后立即檢測；(2)通過采集末梢血用儀器稀釋模式立即檢測；(3)更換抗凝劑，目前大多選用的是枸櫞酸鈉，但是也必須在短時間內檢測完畢；(4)除此之外有文獻報道，在EDTA抗凝血中加入氨基糖苷類抗生素、磷酸吡哆醛、氨茶堿等可能防止血小板凝集[7]。在用以上方法檢測的同時必須用PLT手工計數進行比對。

圖1　　血小板聚集直方圖

圖2　　血小板聚集直方圖

圖3　　血涂片片尾血小板凝集

圖4　　正常EDTA-K2抗凝血中的血小板

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.070

C

1673-4130(2016)16-2359-03