雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液研制及比較

薛佳，　嚴萬春，　薛仲華

1．上海天壇助劑有限公司，上海 201419；2．上海桑迪精細化工研究所有限公司，上海 200025；3．華東理工大學化學與分子工程學院，上海 200237

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雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液研制及比較

1．上海天壇助劑有限公司，上海 201419；2．上海桑迪精細化工研究所有限公司，上海 200025；3．華東理工大學化學與分子工程學院，上海 200237

通過將鄰苯二甲醛、雙鏈季銨鹽與相應助劑進行復配，制備一種新型的復合消毒劑，并進行滅菌消毒試驗、清洗效果及穩定性試驗。實驗證明鄰苯二甲醛復合消毒劑濃度在2 000 mg/L時對白色念珠菌的殺滅效果達100%。該復合消毒劑原液經45 ℃恒溫放置15 d，鄰苯二甲醛的下降率為2.26%左右，穩定性和殺菌能力有明顯提高。對油脂清洗率達98%以上，具有消毒清洗雙功能。因此鄰苯二甲醛復合消毒劑對消化內鏡消毒滅菌效果高，耗時短，用法簡便，并可降低對醫務人員健康的危害性，是值得在醫院臨床推廣使用的高效消毒劑。

鄰苯二甲醛； 雙鏈季銨鹽； 戊二醛； 消化內鏡； 白色念珠菌； 消毒效果

隨著醫療水平的提高和醫用器材的發展，以消化內鏡為主的儀器以其操作簡便、使用靈活、效果直觀、創傷性小等優點被廣泛用于臨床檢查和治療。

新型消化道內窺鏡、超細胃鏡等，作為一種插入人體重復使用的精密診治器，其材質特殊，結構復雜，給清洗消毒帶來一定難度，這些儀器如果清洗消毒不徹底，會使醫院感染風險提高。由于常用的戊二醛在內鏡消毒中存在使用前要活化、使用濃度相對高等多種不便，近年來國內外學者均提出用鄰苯二甲醛消毒劑替代戊二醛用于內鏡消毒[1,2,3]。

為了進一步加強內鏡消毒滅菌工作，尋找安全有效的內鏡消毒方式，降低醫院感染風險，已成為醫療領域重要的研究課題。本文由上海天壇助劑廠、上海桑迪精細化工研究所有限公司和華東理工大學三方共同合作，將鄰苯二甲醛(Ortho-phthalaldehyde，簡稱OPA。1999年已通過了美國FDA認證)、雙鏈陽離子季銨鹽表面活性劑等助劑進行復配，制備一種新型的季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑，進行滅菌消毒、穩定性及清洗效果試驗。并對同樣用于內窺鏡消毒的戊二醛在使用量、滅菌效果、安全性等方面進行比較總結[4,5]。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑

儀器：紫外可見分光光度計，帶溫控攪拌反應釜，恒溫箱,電子天平等。

試劑：鄰苯二甲醛(CP)，國藥集團化學試劑有限公司；雙烷基甲基季銨鹽(CP)，上海山浦化工有限公司；實驗菌種和測試由上海資質實驗室提供完成。

鄰苯二甲醛(簡稱OPA)試劑是一種淡黃色針狀結晶．能溶于水，也可溶解于醇和醚等有機溶劑，是一種廣譜、高效、低腐蝕性的新型消毒劑。雙烷基甲基氯化銨化學穩定性好，耐熱、耐光、耐強酸強堿，可溶于水，具有優良的滲透、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。

1.2試驗方法

1.2.1 外觀指標應符合表1規定。

1.2.2 理化指標應符合表2規定。

1.2.3 鄰苯二甲醛含量按企標附錄A方法檢測。

1.2.4 消毒效果試驗方法：按《消毒技術規范》(2002版)中的有關方法進行，應符合表3規定。

1.3雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液復合配方：

鄰苯二甲醛：0.55 %～0.65%

雙鏈季銨鹽表面活性劑：0.2%～0.4%

助溶劑：0.1%～0.2%

pH調節劑：適量

去離子水：平衡至100%

(初始配方不加季銨鹽表面活性劑和助溶劑)

1.4配制工藝

按比例將去離子水加入到釜內，加入計量好的鄰苯二甲醛攪拌溶解后，再繼續攪拌15 min后加其它助劑，全溶過濾后即可灌裝。

1.5質量標準

本產品質量標準需符合《消毒技術規范》(2002版)，企業標準。

1.6感官標準

應符合表1規定。

表1　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液感官指標

1.7理化指標

應符合表2規定。

表2　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液理化指標

1.8微生物滅活指標

應符合表3規定。

表3　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液滅活指標

2　結果與討論

2.1雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液原料配比與消毒效果

據醫院臨床研究表明，實驗規定數量的內窺鏡在5 000 mg/L OPA消毒5 min后，使得細菌量下降5 log以上，水溶液浸泡20 min以上，使病人用后的氣管鏡、胃鏡、結腸鏡上的革蘭陽性菌、陰性菌、腸道致病源細菌全部轉陰。按照內鏡清洗消毒技術操作規范(2004年版)中的操作規定，本試驗對OPA原料配比與殺菌效果之間的影響進行考察。設定有效殺菌成分OPA含量分別為0.2%、0.4%和0.6%，其他輔料成分不變，作用于白色念珠菌2 min，檢驗其殺菌效果。

2.1.1器材

1、實驗菌株：白色念珠菌(ATCC10231)

2、稀釋液：(PBS)

3、培養基：沙氏瓊脂培養基

2.1.2方法

檢驗依據：《日化產品抗菌抑菌效果的評價方法》QB/T2738—2005

作用濃度：原液

2.1.3中和劑鑒定實驗

結果表明：1%甘氨酸+1%吐溫-80+0.3%卵磷脂的緩沖液作為中和劑能有效的中和樣品，且不影響大腸桿菌生長。

抗菌效果評價結果見下表4。

表4　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液不同含量殺菌效果

由上表可以看出，復合鄰苯二甲醛消毒劑即使在2 000 mg/L(0.2%)時對白色念珠菌的殺滅效果也達100%，考慮到鄰苯二甲醛的成本、溶解性、pH值因素等，為了保證在一定存放期內的殺菌效果，本產品選用5 000 mg/L鄰苯二甲醛的含量通規。

2.2雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液穩定性試驗與結果

本實驗對鄰苯二甲醛消毒劑的初始配方(不加季銨鹽表面活性劑和助劑)與雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑，依據《消毒技術規范))(2002版)采用加速法進行觀察，將上述兩種消毒劑原液分別置45 ℃恒溫箱內14 d，放置前后分別取樣測定其穩定性。

表5　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液含量測定結果

溫度對OPA含量的影響由表5可知，開始階段OPA含量影響不大，隨著時間的延長，影響效果越加明顯，從上面數據可知復合配方在45 ℃下存放10 d OPA含量下降了1.84%左右，30 d后為30.1%左右。另外從穩定性試驗得出樣品的密封條件對OPA含量變化影響較大，所以建議提高OPA溶液的包裝密封性。

2.3雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛清洗效果

雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑加入了對常見醫療器械污垢具有良好清洗效果的陽離子表面活性劑。經過實驗室清洗試驗，其清洗效果如下：

表6　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液洗滌效果

油污成分：花生油25%+芝麻油25%+淀粉15%+水35%

洗滌介質：玻璃試管內壁

油污成分：花生油30%+芝麻油30%+淀粉20%+水20%

洗滌介質：陶瓷盤內壁

實驗針對不同介質表面的污垢進行洗滌效果測試，由表7看出，復合型鄰苯二甲醛的洗滌效果良好，具有洗滌、消毒雙效果。同時，加入微量的消泡劑，可以有效的改善其起泡的不足，滿足醫院實際使用需求。

表7　雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液洗滌效果

2.4雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒液與戊二醛消毒等性能比較

戊二醛是一種具有揮發性和刺激性的化學品，在使用過程中，對人體眼睛、皮膚和黏膜有強烈的刺激作用，可引起喉、支氣管的炎癥、化學性肺炎等，對醫務人員有一定危害，其中長期的吸入毒性更應進一步研究[6,7]。

研究結果表明，含5 000 mg/L復方鄰苯二甲醛作用5 min即可完全滅活龜分枝桿菌，而戊二醛則需20 g/L作用10 min。與戊二醛相比，復方鄰苯二甲醛具有使用濃度低、作用時間短的優點[8,9]。

雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑是一個高水平消毒劑(HLD)用于消毒處理熱敏感的醫療設備。鄰苯二甲醛溶液可隨時“準備使用”，無需激活和具有較小的氣味。而戊二醛使用前需活化，比較麻煩[10]。

雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑毒性測試結果：

1.原發性皮膚刺激為弱刺激性。

2.初級眼刺激為溫和刺激性。

3.急性口服毒性(大鼠)LD50>5 000 mg/kg，屬微毒。

4.急性皮膚毒性(兔子)LD50>2 000 mg/kg，屬微毒。

季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑的毒理學特性有了廣泛的研究，測試結果證明是可安全使用[11，12]。

雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑在pH 為3～9的范圍內都有很好的穩定性， 其溶液可以連續使用14 d。美國Cidex公司已經研制出精確監測濃度的試紙。有資料顯示，如果使用自動內鏡清洗程序，在雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑達到最小有效濃度0.3%前可以反復使用40次，并對許多金屬、塑料等物質都沒有腐蝕損害。

3　結論

本文制備了一種在低濃度下快速殺菌，性能穩定，使用安全的新型復合消毒劑。雙鏈季銨鹽作為一種陽離子表面活性劑，其表面張力、CMC值、親水親油平衡值等因素在分子水平上影響了醛類對菌體的作用，提高了其穿透細菌的細胞膜和多層殼的能力，起到協同增效作用。有關鄰苯二甲醛與不同表面活性劑的協同機理及其影響因素有待進一步研究[13]。

雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑作為一種新型的高效消毒劑，與戊二醛相比，不僅具有廣譜、高效和低腐蝕性的優點，還具有刺激性小、穩定性好等自身特點。此外，雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑對近年來分離出的耐戊二醛的龜分枝桿菌也具有良好的殺滅作用[14]。

鄰苯二甲醛復合消毒劑濃度在2 000 mg/L時對白色念珠菌的殺滅效果達100%。該復合消毒劑原液經45 ℃恒溫放置15 d，鄰苯二甲醛的下降率為2.26%左右，穩定性和殺菌能力有明顯提高。本品對油脂清洗率達98%以上，具有消毒清洗雙功能。

毒理學評價結果說明，復方鄰苯二甲醛急性經口毒性屬于無毒級物質，無染色體損害作用。但有關復方鄰苯二甲醛的致畸變等毒理學試驗還需進行系統研究與評價。

本次試驗結果表明，在消化內鏡的消毒中選用雙鏈季銨鹽復合鄰苯二甲醛消毒劑消毒效果高，消毒時間短，殺菌廣譜，用法簡便，安全環保，因此戊二醛會逐步被實用、安全、高效的鄰苯二甲醛所取代，值得醫療機構臨床推廣應用。

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Development and comparison of ortho-phthalaldehyde disinfectant by compounded double chain quaternary ammonium salts

XUE Jia-lu1, YAN Wan-chun2, XUE Zhong-hua3

1. Shanghai TianTan Auxiliaries Co., LTD 2. Shanghai S&D Fine Chemical Institute Co., Ltd 3. School of Chemistry and Engineering, East China University of Science and Technology

A new compound disinfectant was prepared by combining o-phthalaldehyde, double chain quaternary ammonium salt and auxiliary chemicals．The experiments showed that the germicidal efficacy of the compound disinfectant onCandidaalbicanswas 100% at the concentration of 2 000 mg/L. Under the conditions of at 45 ℃ for 15 days, the ortho-phthalaldehyde decline rate of compound disinfectant was about 2.26%, stability and sterilization ability was obviously improved. Fats cleaning rate exceeded 98%. So it had a dual function of disinfection and cleaning. The use of the compound disinfectant of ortho-phthalaldehyde had high efficiency，shorter germicidal time and convenient usage, and less harm to medical personnel. Therefore, it is worth to use in the hospital clinical operations.

ortho-phthalaldehyde; double chain quaternary ammonium salt; glutaraldehyde; digestive endoscope;Candidaalbicans; germicidal efficacy

10.3969/j.issn.1001-6678.2016.04.006