正交設計研究暑濕滴丸揮發油的提取工藝*

單志鳳張麗軍朱愛華

陜西醫藥控股集團有限責任公司(西安 710075 )

?

正交設計研究暑濕滴丸揮發油的提取工藝*

單志鳳張麗軍△▲朱愛華△

陜西醫藥控股集團有限責任公司(西安 710075 )

目的：對暑濕滴丸揮發油提取的實驗研究。方法：采用正交實驗法，以提取揮發油的總量為考察指標，對藥材的粒度大小、浸泡時間、加溶媒量、回流時間進行四因素三水平的正交實驗研究。結果：揮發油最佳提取工藝為藥材浸泡時間1h，5倍的加水量，回流提取8h，粒度大小為粗粉。結論：影響暑濕滴丸藥材揮發油出油量的主要因素為藥材回流時間，具有顯著性影響，其次為浸泡時間和加水量，藥材粒度大小影響最小，本實驗為暑濕滴丸的研究和生產提供了理論依據。

主題詞揮發油類正交試驗@暑濕滴丸

暑濕滴丸是《中國藥典》一部收載的六合定中丸方劑的改制劑，具有祛暑除濕，消食導滯的功效，主治胃腸性感冒，主要用于治療夏傷暑濕、宿食停滯、寒熱頭痛、胸悶惡心、吐瀉腹痛的胃腸型感冒，屬于急癥[1]。原制劑六合定中丸為蜜丸，是將處方中十七味藥材直接打粉，加入賦形劑制成蜜丸，服用量大、吸收差、生物利用度低、起效慢，現制劑提取方中各中藥材有效成分，確保該方的療效，且充分考慮胃腸型感冒患者上吐下瀉、不思飲食、胃氣較弱、消化吸收功能差，一般藥物很難服用的基本狀況，以符合現代制劑及腸胃患者的特殊要求為前提，選擇了服用量小、起效快、生物利用度高的滴丸劑作為劑改劑型。滴丸劑是采用先進的固體分散技術制備而成，使中藥制劑與黏膜表面充分接觸,中藥有效成分通過黏膜上表面細胞吸收,直接進入循環系統的給藥方式的中成藥制劑劑型,其突出的特點是具有起效迅速、生物利用度高、副作用小、用藥方便的特點。制備成滴丸劑型，首先必須根據藥材所含活性成分進行分類提取，本處方由十七味中藥組成，處方中含揮發油的有廣藿香、紫蘇葉等多味藥材，其中，廣藿香、紫蘇葉、香薷、檀香四味藥材所含揮發油均具有明確鎮痛抗炎的藥理活性，是治療暑濕感冒的主要有效成分，故四味藥材揮發油的多少決定著藥物療效，因此，以揮發油的提取量為考核指標，揮發油的提取采用水蒸氣蒸餾法[2]。通過對揮發油提取工藝的預試研究，確定了因素水平，進行正交實驗設計，最終采用正交實驗法優選出了揮發油最佳提取工藝，現報道如下。

1儀器與試藥揮發油提取器(上海玻璃儀器廠)；Ag135電子天平(德國梅特勒公司)；實驗用藥材均購自西安市藥材公司。

2方法與結果[3-5]2.1因素水平的確定 影響揮發油提取工藝的因素很多，根據平行試驗和交叉試驗結果，選擇藥材浸泡時間，加水量，回流時間，藥材的粒度大小為四個因素，設定了3個水平，浸泡時間：0、1、2h；加水量：5、6、7倍；回流時間：6、7、8h；藥材粒度大小：原藥材、粗粉、10目篩粉。為了優選出揮發油最佳的提取工藝，以揮發油提取總量作為考察指標，采用四因素三水平表L9(34)進行9組正交實驗。因素水平見表1。

表1　提取揮發油因素水平表

2.2實驗方法稱取藥材廣藿香、紫蘇葉、香薷各64g，檀香144g，共9份，分別放置于比重小于1的揮發油提取器中，根據正交實驗表設計的9組實驗，按照水蒸氣蒸餾提取方法提取，分別將不同粒度的藥材放入5000ml圓底燒瓶中，同時加入少量沸石，再加入一定量的水浸泡不同時間后，放入電熱套中加熱，當水沸騰后調節溫度，使藥液微沸，開始記錄回流時間，提取揮發油至規定時間，放置1h后，將多余的水放掉，記錄揮發油提取的量[6]。根據正交實驗設計進行工藝考核，從而優選出揮發油的最佳提取工藝。

2.3正交試驗結果及方差分析根據表2直觀分析和表3方差分析結果表明，以提取揮發油量為考核指標時，影響揮發油出油量的主要因素為藥材回流提取時間，對揮發油的提取具有顯著性影響，其次為浸泡時間和加水量，藥材的粒度大小影響力最小，三因素的相關性為RC>RA>RB>RD，各因素的三水平的相關性為K值越大越好。由結果可知，揮發油最佳提取工藝為A2B1C3D2，即將藥材浸泡時間1h，5倍的加水量，水蒸氣蒸餾回流提取8h，藥材粒度大小為粗粉。

表2　揮發油提取正交試驗與結果表

表3　揮發油提取率方差分析表

注：F0.1(2.2)=9.00，F0.05(2.2)=19.00

2.4驗證試驗[6]為了驗證上述優選的揮發油提取最優工藝的穩定性，稱取廣藿香、紫蘇葉、香薷、檀香四味中藥材四個處方量3份，根據正交實驗優選的最佳揮發油提取工藝A2B1C3D2操作，即藥材浸泡時間1h，5倍的加水量，水蒸氣蒸餾回流提取8h，藥材粒度大小為粗粉，平行操作，進行3次重復行實驗。實驗結果表明，驗證實驗與正交實驗數據基本一致，充分證明了揮發油提取工藝的合理性和穩定性。

3討論 本實驗研究暑濕滴丸中廣藿香、紫蘇、香薷、檀香四味中藥材，其有效成份為揮發油，揮發油具有抗炎、抗過敏、提高機體免疫，抗菌、鎮痛、抗痙攣、止嘔等藥理作用，符合該制劑治療暑濕感冒的功能主治，因此本研究以揮發油的提取量為考察指標，采用水蒸氣蒸餾法提取混合揮發油，通過正交實驗直觀分析和方差分析，優化確定揮發油的最佳提取工藝參數。結果表明，回流提取時間對揮發油的提取有顯著性影響，對揮發油的提取起著關鍵性的作用，加水量和浸泡時間在提取揮發油過程中占有重要的作用，藥材粒度大小對提取揮發油的影響力較小。由實驗可知，暑濕滴丸大生產中含揮發油藥材的回流提取時間是關鍵因素，提取時間控制的好壞直接影響揮發油的提取率，從而影響到滴丸產品的質量和療效。因此，注重暑濕滴丸提取工藝中揮發油提取時間是影響滴丸質量的關鍵因素，是以往資料所未涉及到的，也是本次研究的價值所在。本實驗優選得到的揮發油提取工藝，為暑濕滴丸的研制與生產提供了理論依據和工藝參數。

綜上所述，暑濕滴丸是《中國藥典》收載的六合定中丸方的劑改制劑。通過暑濕滴丸揮發油提取工藝的研究，我們得知，該處方廣藿香、紫蘇、香薷、檀香四味藥材中主要活性成分為揮發油，起著主要的藥效作用，因此，采用四因素三水平正交實驗對藥材進行提取揮發油，分別是浸泡時間(0h、1h、2h)，加水量(5倍、6倍、7倍)，回流時間(6h、7h、8h)，藥材的粒度大小(原藥材、粗粉、10目篩粉)，以混合揮發油的提取總量為考察指標，從而獲得了影響提取揮發油各個因素的強弱，確定了水平參數。實驗數據處理結果表明，四因素的相關性為回流提取時間>浸泡時間>加水量>藥材的粒度大小，回流提取時間對揮發油提取具有顯著性的影響。以上實驗結果，充分說明了暑濕滴丸提取揮發油合理地選擇了四味藥材，提取時間直接影響揮發油的提取率，是提取揮發油的關鍵因素，必須把控好，這對暑濕滴丸的劑改研究以及工業化大生產奠定了理論基礎。

[1] 國家藥典委員會．中國藥典2010年版[S]．北京：中國醫藥科技出版社，2010:595.

[2] 曹春林.中藥藥劑學[M].上海：上海科學技術出版社，1988:65.

[3] 劉陽，王馳，陳偉梅，等.紫蘇籽與紫蘇莖葉揮發油的提取及其成分分析[J]．中國醫院藥學雜志，2014，5(22)：22-27.

[4] 楊秦雁，王紅波，郭冬.壯陽膠囊正交優選水提工藝[J]．陜西中醫，2014，35(11)：1554-1555．

[5] 白潔，郝武常，郭冬．用正交試驗優選益精膠囊水提取工藝[J].陜西中醫，2014，35(10)：1412-1414．

[6] 王文驪，劉軍峰，高錦成.正交試驗法優選消瘤丸的提取工藝[J]．陜西中醫，2013，34(3)：368-369.

(收稿2016-05-20；修回2016-06-21)

*陜西省“13115”科技創新工程重大科技專項項目(2009ZDKG-88)

△ 陜西中藥研究所咸陽市滴丸制劑工程技術研究中心(咸陽 712000)

R96

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2016.09.066