三種麻醉方法對萊亨雞麻醉效果比較

曹春艷, 孫雪健, 胡正云, 肖　苒（中國醫學科學院北京協和醫學院整形外科醫院, 北京 100144）

·經驗交流·

三種麻醉方法對萊亨雞麻醉效果比較

曹春艷, 孫雪健, 胡正云, 肖苒
（中國醫學科學院北京協和醫學院整形外科醫院, 北京 100144）

目的比較3種不同麻醉方法在萊亨雞的麻醉效果。方法將30只實驗用萊亨雞隨機分為A、B、C三組，A組10只（速眠新II組），B組10只（鹽酸氯胺酮組），C組10只（速眠新II與鹽酸氯胺酮復合組），三組均采用肌肉注射麻醉，在麻醉過程中觀察其臨床表現及麻醉效果，比較麻醉起效時間、麻醉維持、蘇醒時間和動物的死亡率等。結果A組麻醉誘導時間和蘇醒時間長，死亡率高； B組麻醉誘導時間和蘇醒時間短，但麻醉效果不理想； C組麻醉誘導時間短，麻醉效果理想，死亡率低。結論速眠新II與鹽酸氯胺酮復合麻醉萊亨雞，是一種較為安全、可靠的麻醉方法。

萊亨雞； 麻醉； 速眠新II； 氯胺酮

近年來，雞在生物醫學中的應用越來越廣泛，如藥物評價、激素代謝研究、高血脂動物模型制作、老年學研究等。而許多研究項目必須對雞實施有效麻醉才能正常開展，尤其是那些必須進行外科手術才能完成研究的課題。因此，選擇安全、有效的麻醉方法尤為重要。然而，目前對雞的麻醉方法國內鮮有報道，作者在雞冠模擬血管瘤治療實驗中，根據以往的麻醉經驗，對實驗用萊亨雞分別進行了速眠新Ⅱ、氯胺酮及速眠新Ⅱ復合氯胺酮的麻醉效果比較，優選出適于此實驗的麻醉方法，現報道如下：

1　材料與方法

1.1實驗用動物

8～9周齡實驗用萊亨雞，雌雄不限，來源于北京梅里亞維通實驗動物技術有限公司［SCXK（京）2014-0002］。動物飼養、觀察及動物實驗均在整形外科醫院研究中心動物室完成［SYXK（京）2015-0009］。動物飼養在普通環境，單籠飼養，室溫20～26 ℃，相對濕度40%～60%，每日保持光照12 h, 飼養間每日清潔, 定期消毒, 動物自由進食、飲水, 并保持飼養環境安靜，待動物生長至5～6月齡、體質量1.8～2.5 kg時用于實驗。

1.2麻醉藥品

速眠新Ⅱ（鹽酸塞拉嗪注射液，批準文號為獸藥字（2010）070031582，規格20 mg/mL）, 吉林省華牧有限公司。氯胺酮注射液（福建古田藥業有限公司），批號： 120821, 規格0.1 g/2 mL。

1.3實驗方法

實驗前, 通過預實驗對實驗用萊亨雞的麻醉劑量摸索，速眠新Ⅱ的麻醉劑量為0.4 mL/kg體質量,鹽酸氯胺酮的麻醉劑量為1.2 mL/kg體質量, 速眠新Ⅱ復合氯胺酮的麻醉劑量為0.35 mL/kg體質量。速眠新Ⅱ與氯胺酮混合液為1∶1等體積配制。

選用健康無異常萊亨雞30只，隨機平均分成3組，各組月齡及體質量差異無統計學意義，A組（速眠新Ⅱ），B組（鹽酸氯胺酮），C組（速眠新Ⅱ復合氯胺酮）。術前12 h禁食、禁水并且麻醉前稱體質量。A組（速眠新Ⅱ）： 按速眠新Ⅱ0.4 mL/kg體質量肌肉注射麻醉，如20 min后未達到有效麻醉狀態時，追加劑量為首次劑量的半量； B組（鹽酸氯胺酮）： 按鹽酸氯胺酮1.2 mL/kg體質量肌肉注射麻醉，待有效麻醉消失后，追加劑量為首次劑量的半量； C組（速眠新Ⅱ復合氯胺酮）： 先按0.25 mL/ kg體質量的劑量肌肉注射麻醉, 待動物反應遲鈍時再次按0.1 mL/kg體質量的劑量肌肉注射, 有效麻醉狀態消失后, 追加劑量為總劑量（0.35 mL/kg體質量）的半量。

1.4觀察指標

觀察實驗用雞在麻醉過程中呼吸、心率及體溫等生命體征，記錄麻醉誘導時間、麻醉維持時間、麻醉恢復時間及麻醉維持期間測得動物的體溫直腸肛溫）。

1.4.1麻醉誘導時間自肌肉注射麻醉藥物至出現麻醉狀態的時間。此時動物表現出萎靡，閉眼，低頭，站立不穩，雞翅下垂，蹲下然后慢慢臥倒，骨骼肌漸漸松弛，痛覺漸漸消失。

1.4.2麻醉維持時間動物進入麻醉狀態到動物蘇醒的時間。表現為閉眼、角膜反射消失，呼吸均勻, 呼吸頻率為12～21次/min,心率120～140次/min,全身肌肉松弛，對手術切割、牽拉無痛反應。

1.4.3麻醉蘇醒期指對手術切割、牽拉出現疼痛反應開始至站立行走時間。在此期間可觀察到動物呼吸加快，睜眼，角膜反射恢復直至掙扎站立。

1.5麻醉效果判斷

鎮痛效果評價：切開皮膚進行手術時對手術切割、牽拉無痛感反應為優；切開皮膚進行手術時對手術切割、牽拉有輕度痛感并需追加藥物時為良。肌肉松弛度評價：手術時骨骼肌完全處于松弛狀態者為優； 手術時骨骼肌不能完全松弛，有一定張力為良。麻醉死亡判斷：因麻醉導致動物術前、術中或術后死亡。

1.6統計學處理

2　結果

2.1三種麻醉方法的麻醉時間

A組麻醉起效時間明顯長于B組和C組（P＜0.05）；A組與C組的麻醉時長大于B組（P＜0.05）； C組的蘇醒期明顯短于A組，長于B組（P＜0.05）； A組在麻醉維持期內所測得的體溫略低于C、B兩組，但三組所測得的體溫數據差異無顯著（P＞0.05）（表1）。

2.2麻醉效果

3組的麻醉效果表現不一，A組和B組麻醉效果不理想， A組肌松效果理想但鎮痛效果不理想，而B組表現為肌肉不夠松弛，鎮痛效果欠佳，A、B兩組常常需反復追加麻醉藥，因而存在動物死亡的麻醉風險，尤其是A組，麻醉過程中，動物死亡2只，其死亡率明顯高于其他2組，C組的麻醉效果較為理想（表2）。

表1　三種麻醉方法對萊亨雞麻醉時間比較

表2　三種麻醉方法對萊亨雞麻醉效果比較

3　討論

實驗用雞屬于鳥綱，雞形目。其聽力靈敏，且具有神經質的特點，極易驚恐，突然地聲響和突然發出的光都會使其驚恐萬狀［1］。對此，在雞的實驗外科手術過程中，對于麻醉的鎮靜、鎮痛要求較高，因而麻醉質量的好壞尤為重要。而麻醉質量的好壞與麻醉方法和麻醉劑的選擇密不可分，如果選擇的麻醉方法和麻醉劑不合適，就會出現麻醉過淺或麻醉過深的現象，麻醉過淺，動物就會因疼痛而掙扎，很難配合手術，就會直接影響著動物實驗的進程及準確可靠的實驗數據；麻醉過深，就會加大動物死亡率的風險，就會對實驗造成一定的損失，因此選擇合適的麻醉方法和麻醉劑是實驗成功的關鍵因素之一。

目前，有關實驗用雞的麻醉報道很少。以往我們常用的麻醉方法是靜脈注射麻醉，它誘導快，蘇醒也快，但其有一定的缺點：首先大多動物往往很難配合實驗者，易躁動，常常給靜脈穿刺帶來很大的困難；其次因術者技術不熟練或在推藥過程中動物稍微躁動而刺破靜脈，需再次穿刺，有的甚至無法完成以至于影響實驗的進行。而腹腔注射麻醉盡管操作簡單，但也存在著一定的缺點：如注射手法上對操作者有一定要求，是否能夠把握好注射部位也非常重要；誘導時間往往很長，麻醉深度不易控制，不適合需連續處理多只動物的實驗。因此，作者首選肌肉注射麻醉方法，同時根據以往實驗動物麻醉經驗，選擇了應用較為廣泛的速眠新Ⅱ及氯胺酮兩種麻醉劑進行單一肌肉注射麻醉。由于對實驗用雞進行單純麻醉的效果不理想，隨后進行了速眠新Ⅱ復合氯胺酮麻醉方法的試驗，取得了較好的麻醉效果。

速眠新Ⅱ是α2-受體激動劑，通過激活α2-腎上腺素能受體來起麻醉作用, 鎮靜、肌松較好，鎮痛作用較差, 抑制呼吸和心臟傳導系統，易導致動物死亡［2］。在單獨應用速眠新Ⅱ0.4 mL/kg體質量對雞進行麻醉時, 其誘導時間長（21.60±1.89 min），蘇醒時間也長（89.15±18.40 min）。雖然鎮靜、肌肉松馳效果較好，麻醉維持時間能夠滿足實驗要求，但其鎮痛作用較差。由于鎮痛作用弱，麻醉深度較淺，不能很好配合手術，且有時易出現麻醉不全的狀況，有的動物出現躁動，導致反復追加麻藥，用藥量大，對呼吸有明顯抑制作用，易發生麻醉意外，導致動物死亡。另外，通過預實驗觀察，單獨應用速眠新Ⅱ0.4 mL/kg以上的劑量時動物死亡率更高，表明速眠新Ⅱ0.4 mL/kg以上的劑量已經接近安全極限，與陳海南等［3］研究結果一致。實驗結果表明，0.4 mL/kg的麻醉劑量在雞冠模擬血管瘤治療實驗中的麻醉效果不佳，對實驗結果及實驗進程都有不同程度的影響。

鹽酸氯胺酮單獨應用時誘導迅速、蘇醒期短、對呼吸影響輕微，對交感神經和循環系統有興奮作用, 但有唾液及器官分泌物增多, 骨骼肌緊張等副作用, 且對心肌有直接的抑制作用, 大劑量、快速給藥可出現呼吸抑制和呼吸暫停，因此動物實驗中單獨使用氯胺酮麻醉存在著諸多問題［4-5］。作者曾以鹽酸氯胺酮1 mL/kg、1.2 mL/kg、1.4 mL/kg的麻醉劑量進行預實驗，1 mL/kg的劑量未達到麻醉效果，采用 1.4 mL/kg的麻醉劑量進行麻醉，雖然麻醉起效快，但麻醉維持時間和蘇醒時間上與1.2 mL/kg的麻醉劑量相差不大，并且出現呼吸抑制、唾液和氣管支氣管分泌物增多等麻醉危象。而采用1.2 mL/kg體質量的劑量肌肉注射麻醉時，麻醉起效時間和蘇醒時間均優于 A組，尤其是此劑量對動物呼吸影響輕微，呼吸頻率都在正常范圍內，但麻醉維持時間較短，麻醉深度較淺，觀察到麻醉中有的動物不能耐受手術的刺激，肌肉張力增加，口內有分泌物，術中躁動，反復追加麻藥后，易造成藥量蓄積，唾液和氣管支氣管分泌物增多，同樣出現麻醉危象，因此不適合用于手術時間要求比較長的實驗，但可作為簡單清創縫合、測量及短時手術的麻醉劑［6］。

在雞冠模擬血管瘤治療實驗中，需要在雞冠上實施手術，此部位較為敏感，且需要連續處理多只動物。對此作者在麻醉方案的設計中，首先考慮麻醉誘導快，鎮痛效果好，鎮靜、肌松作用較強，能夠保證實驗的順利進行，同時又能提高實驗動物術后成活率的麻醉方法；其次最大限度地減少動物的疼痛、痛苦和緊張恐懼感，盡量避免對動物造成的各種傷害，保證動物的安全，從而提高動物福利。而麻醉質量是動物福利方面最基本的要求，麻醉過淺會導致動物疼痛，加劇動物應激反應, 無法保證實驗順利進行, 麻醉過深則會造成動物死亡，都不符合動物福利要求［7,8］。為了達到對實驗動物的科學保護以及提高和改善動物麻醉效果，經過速眠新Ⅱ與氯胺酮復合麻醉方法的反復試驗, 從 0.25 mL/kg、0.35 mL/kg、0.45 mL/kg的劑量中摸索出適宜此實驗的麻醉劑量為0.35 mL/kg,實踐證明此劑量用于雞的麻醉效果確實，副作用小，大大的改善了單純麻醉方法的不足。在預實驗中，0.25 mL/kg的麻醉劑量未達到本實驗的麻醉要求, 麻醉深度較淺, 無法保證手術的順利進行。此外, 以0.45 mL/kg的劑量進行麻醉時, 出現動物死亡現象, 表明此劑量接近安全極限而不可取。在本實驗中, 速眠新Ⅱ與氯胺酮復合麻醉按0.35 mL/kg的劑量進行肌注麻醉，起效時間短（4.94±0.81 min）,從而節省了實驗前的準備時間, 提高了麻醉工作效率； 麻醉維持時間適宜（42.21±0.78 min），比單純氯胺酮麻醉的維持時間長，能夠滿足此實驗的手術時間要求，并且鎮靜、鎮痛、肌松效果好于單一麻醉，同時無嘔吐、流涎等現象，呼吸及心率都在正常范圍內，麻醉平穩，能夠保證手術順利進行。不僅如此，復合麻醉方法中的速眠新Ⅱ的劑量不足其單純麻醉藥物劑量的一半，這就大大降低了它的毒副作用，擴大了安全范圍，因而有效降低了動物死亡率。而氯胺酮的用藥量大約是單純氯胺酮麻醉方法的1/6，但其與速眠新Ⅱ復合的麻醉效果遠比單純麻醉要好，不僅延長了麻醉維持時間，還加強了速眠新Ⅱ的中樞性鎮痛、鎮靜作用，減輕心血管和呼吸抑制作用，降低了麻醉意外發生的風險，從而彌補了單純麻醉方法的不足，起到互補作用。

在本實驗中，三組雞體溫數據無顯著差異，且麻醉前后體溫變化不大，可能與手術時間有關。另外，為防止實驗中動物流涎、嘔吐以及保持呼吸道通暢，實驗前需12 h禁食、禁水。由于雞具有神經質的特點，極易驚恐，因此在肌肉注射麻醉藥后要保持安靜，以利于動物盡快進入麻醉狀態。同時，作者在麻醉過程中觀察到，首次麻醉劑量如果先按0.25 mL/kg體質量的劑量肌肉注射麻醉，待動物反應遲鈍時，再按0.1 mL/kg體質量的劑量肌肉注射, 麻醉效果好于直接按0.35 mL/kg麻醉，并且動物很快進入麻醉狀態，麻醉的起效時間大大縮短。

綜上所述，作者所采用的速眠新Ⅱ復合氯胺酮麻醉方法在雞冠模擬血管瘤治療實驗中不僅能夠縮短麻醉起效時間，還能在延長麻醉維持時間的情況下不延長蘇醒時間，麻醉效果理想，麻醉過程平穩，不失為一種操作方便，易掌握，安全可靠的麻醉方法。

［1］ 孫德明，李根平，陳振文，等.實驗動物從業人員上崗培訓教材［M］. 北京： 中國農業大學出版社, 2011：162.

［2］ 梁佩紅, 江斌, 陳居銪, 等. 三種麻醉方法在骨科動物實驗中效果比較［J］. 中國比較醫學雜志, 2012, 22（11）：59-62.

［3］ 陳海南, 郭劍英, 李嘉雯, 等. 速眠新Ⅱ對雞的麻醉效果［J］.黑龍江畜牧獸醫, 2013, 4：107-108.

［4］ 高堂成, 張春才, 康慶林, 等. 硫噴妥鈉、氯胺酮與安定在實驗兔麻醉中的應用［J］. 中國比較醫學雜志, 2004, 14（3）：170-172.

［5］ 孫燕霞, 張炳熙. 麻醉中氯胺酮聯合用藥的相關研究［J］.中華醫學研究雜志, 2003, 3（12）：1087-1089.

［6］ 孫曉梅, 高家紅, 葉尤松, 等. 鹽酸氯胺酮和戊巴比妥鈉對樹鼩的麻醉效果［J］. 實驗動物與比較醫學, 2009, 29（5）：307-309.

［7］ 羅懷青, 李若苗, 李國良, 等. 動物血壓實驗麻醉劑的選用與比較［J］. 現代生物醫學進展, 2011, 11（23）：4645-4604.

［8］ 董敏, 陳莉, 趙志剛, 等. 淺析動物外科教學中存在的倫理學問題［J］. 實驗動物與比較醫學, 2013, 33（6）：461-464.

R332Q95-33

A

1674-5817（2016）02-0137-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.02.012

2015-10-30

曹春艷（1965-）, 女, 主管技師, 研究方向： 醫學實驗動物學。E-mail： caochunyanaa@163.com

肖苒（1970-）, 女, 研究員, 研究方向： 基礎醫學研究。E-mail： rxiao163@163.com