吸煙與非吸煙慢性阻塞性肺疾病患者血清CC-16的表達水平

姜紅妮， 彭紹華,2， 張　靜*

1. 復旦大學附屬中山醫院呼吸科，上海　200032 2. 福建醫科大學邵武教學醫院，福建莆田學院附屬醫院，邵武市立醫院呼吸科，邵武　350108

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·論著·

吸煙與非吸煙慢性阻塞性肺疾病患者血清CC-16的表達水平

姜紅妮1， 彭紹華1,2， 張靜1*

1. 復旦大學附屬中山醫院呼吸科，上海200032 2. 福建醫科大學邵武教學醫院，福建莆田學院附屬醫院，邵武市立醫院呼吸科，邵武350108

目的： 探討慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)患者中吸煙人群和不吸煙人群血清Clara細胞蛋白(Clara cell protein, CC-16)的表達水平。方法： 入選COPD穩定期患者，記錄入選者的基本情況、臨床癥狀及肺功能等資料，并留取血清，采用ELISA法檢測CC-16水平。按照是否有吸煙史將患者分為吸煙COPD和非吸煙COPD，以吸煙和非吸煙的健康體檢者為對照。結果： 共入選COPD患者34例，吸煙組 17例，非吸煙組 17例；健康人吸煙組15例，健康人非吸煙對照組19例。吸煙COPD組男性比例高于非吸煙COPD組，差異有統計學意義(P<0.05)。吸煙和非吸煙COPD患者年齡、肺功能差異無統計學意義。與健康對照組相比，COPD患者血清CC-16水平降低(P<0.001)。吸煙和非吸煙COPD患者血清CC-16水平差異無統計學意義；與非吸煙健康者相比，吸煙健康者血清CC-16呈現下降趨勢，但差異無統計學意義。結論： COPD患者血清CC-16表達水平低于健康體檢者，但吸煙與不吸煙COPD患者血清CC-16表達無明顯差異，相關結論有待大樣本研究證實。

慢性阻塞性肺疾病；Clara細胞蛋白；吸煙

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一種肺臟對有害氣體和顆粒的異常炎癥反應性疾病，以小氣道功能受損、進行性氣流受限為主要特征。COPD目前已經成為全球第4位的致死原因，嚴重影響患者的生活質量及生存期，給社會及家庭帶來沉重負擔[1]。隨著我國人口老齡化程度的加劇，COPD的發病率呈上升趨勢，研究COPD的治療和預防具有非常重要的意義。Clara細胞也稱為Club細胞或支氣管外分泌細胞，是分布于小氣道上的無纖毛上皮細胞。Clara細胞分泌的主要功能性蛋白相對分子質量約為16 000，稱為Clara細胞蛋白(Clara cell protein，CC-16)，其具有抗炎、抗氧化、免疫調節及腫瘤抑制等多種生物學活性[2-3]。

Lomas等[4]研究顯示，COPD患者血清CC-16水平較健康體檢者降低；在有既往吸煙史的COPD患者中，血清CC-16水平與患者COPD嚴重程度分級存在弱相關性，血清CC-16水平下降程度與疾病進展相關。但Ishikawa等[5]研究顯示，COPD患者血清CC-16水平高于健康人。造成這種矛盾結果的可能原因是COPD患者存在異質性，血清CC-16受呼吸道局部和全身炎癥反應的影響。Labonté等[6]的研究也顯示，COPD患者急性加重期血清CC-16表達水平升高。吸煙是COPD的重要危險因素，但也有部分COPD患者無吸煙史。因此，本研究通過檢測有或無吸煙史COPD患者的血清CC-16水平，以吸煙及不吸煙的健康人群作對照，探討吸煙對COPD患者及健康人血清CC-16的影響，為后續研究奠定基礎。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇在2011年12月—2012年10月就診于復旦大學附屬中山醫院呼吸科門診和呼吸科病房出院的45歲以上COPD患者。診斷標準：肺功能檢查結果為吸入400 μg/撳的沙丁胺醇后第1秒用力呼氣量與用力肺活量比值(FEV1/FVC)<70%。排除標準：有充血性心力衰竭、支氣管擴張癥、支氣管哮喘、活動性肺結核、阻塞性細支氣管炎、矽肺、肺間質疾病、胸腔積液、彌漫性泛細支氣管炎或肺葉切除術史的患者；大氣道氣流受限患者；入選前4周內有COPD急性加重的患者。以健康體檢者為對照。非吸煙者定義為不吸煙者或曾經吸煙但總量低于5包年(每天吸煙包數×吸煙年數)并且戒煙至少10年者；否則作為吸煙者。

本研究通過復旦大學附屬中山醫院倫理委員會批準，并已在中國臨床試驗網注冊登記(ChiCTR-OCC-11001621)。所有參與者均簽署知情同意書。

1.2數據收集記錄所有受試者的年齡、性別、體質量、身高、吸煙狀況、吸煙量(包年)、臨床癥狀及肺功能等資料，并留取血清。采用Uscn Life Science Inc.全自動酶標儀及ELISA法試劑盒檢測血清CC-16水平，嚴格按試劑盒說明書進行操作。

2　結　果

2.1患者基線資料結果(表1)表明：共入選吸煙COPD者 17例，非吸煙COPD者 17例；吸煙健康人15例，非吸煙健康人19例。與非吸煙COPD組相比，吸煙COPD男性比例更高，差異有統計學意義(P<0.001)，COPD和健康人FEV1%預計值差異有統計學意義(P<0.001)。吸煙和非吸煙COPD患者年齡、肺功能差異無統計學意義。

表1　患者基線資料

N-CON：非吸煙健康人；S-CON：吸煙健康人；N-COPD：非吸煙COPD患者；S-COPD：吸煙COPD患者;NA:不適用.*吸入支氣管擴張劑后占預計值的百分數

2.2血清CC-16水平COPD患者和健康人相比，血清CC-16水平顯著降低[(2.13±0.51) ng/mLvs(2.51±0.35) ng/mL，P<0.001]。結果(圖1)表明：不吸煙COPD患者血清CC-16水平[(2.12±0.62) ng/mL，P<0.01] 和吸煙COPD患者血清CC-16水平 [(2.15±0.39) ng/mL]均低于不吸煙的健康人[(2.57±0.34) ng/mL，P<0.05]。吸煙健康人與非吸煙健康人相比，血清CC-16呈下降趨勢，但差異無統計學意義[(2.43±0.36) ng/mLvs(2.57±0.34) ng/mL]。

圖1　COPD患者及健康人血清CC-16的表達

2.3CC-16水平與吸煙狀況、肺功能的相關性分析線性回歸分析(圖2)表明：吸煙與FEV1%預計值相關(P<0.001)，與CC-16不相關(P=0.103)；FEV1%預計值與CC-16相關(P<0.05)。

圖2　CC-16水平與吸煙狀況及肺功能的相關性分析

3　討　論

血清CC-16是Clara細胞分泌的主要蛋白，具有多種生物學功能。CC-16可抑制磷脂酶A2(PLA2)的活性，減少細胞膜磷脂分解，還可直接抑制多種炎癥因子的表達及其生物學活性，在哮喘、COPD、急性肺損傷中起重要作用[7-9]。吸煙是COPD發生的主要危險因素，Clara細胞是香煙煙霧攻擊的主要肺臟細胞之一。煙草煙霧中含有較高的內毒素含量，比無吸煙環境空氣高120倍[10]。吸入內毒素可引起急性氣道炎癥，破壞小氣道上皮細胞完整性和通透性，使血清CC-16水平顯著升高[11-12]。動物實驗[13]顯示，在慢性煙草和內毒素的共同刺激下，COPD組大鼠血清及肺組織中CC-16含量均明顯降低。在大鼠吸入香煙煙霧制作的COPD模型中，電鏡下可見其終末細支氣管和呼吸性細支氣管Clara細胞數量以及Clara細胞分泌顆粒均減少，表明Clara細胞受損及其分泌CC-16的減少在COPD發病過程中發揮作用[8]。Clara細胞數目的減少與功能變化削弱了氣道保護機制，導致肺損傷，這一改變可能是吸煙所致肺部疾病形成的機制之一。

本研究中COPD患者血清CC-16水平較健康體檢者降低，與Lomas等[4]及Park等[14]的研究結果一致。COPD患者FEV1下降時Clara細胞可因變形或死亡而減少，使合成及分泌的CC-16減少，血清CC-16水平下降。Park等[14]的研究進一步證實，隨著患者COPD嚴重程度的增加，血清CC-16水平逐漸下降，說明血清CC-16水平下降程度與疾病進展相關。本研究顯示，無論是否有吸煙史，COPD穩定期血清CC-16的水平差異無統計學意義，但均低于不吸煙的健康人。吸煙和非吸煙健康者血清CC-16雖差異無統計學意義，但吸煙者血清CC-16水平較非吸煙者有下降趨勢。本研究提示，長期吸煙對氣道可能產生慢性漸進性影響，可最終導致COPD；無論是吸煙因素還是非吸煙因素導致的COPD，由于患者體內Clara細胞數量及CC-16分泌均減少，導致其血清CC-16差異無統計學意義。

綜上所述，穩定期COPD患者血清CC-16水平低于健康人，血清CC-16可能成為COPD診斷的生物學標志物之一。吸煙者和非吸煙者相比，血清CC-16有下降趨勢，相關結論有待大樣本臨床研究進一步驗證。

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[本文編輯]葉婷， 賈澤軍

The serum levels of CC-16 of non-smoking and smoking patients with chronic obstructive pulmonary disease

JIANG Hong-ni1, PENG Shao-hua1,2, ZHANG Jing1*

1. Department of Respiration, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China 2. Department of Respiration, Shaowu Municiple Hospital, Fujian Medical University Teaching Hospital in Shaowu, Affiliated Hospital of Putian College in Fujian, Shaowu 350108, Fujian, China

Objective： To observe the serum levels of Clara cell protein (CC-16) in non-smoking and smoking patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Methods： The basic information, clinical symptoms and lung functions of patients were collected, the serum was used to measure the CC-16 levels by ELISA. The patients were divided into stable COPD and non-COPD based on smoking history, and compare with the healthy cases with or without smoking history. Results： Totally 34 cases were selected, including 17 smoking COPD, and 17 non-smoking COPD.15 smoking non-COPD and 19 non-smoking non-COPD healthy cases were selected. The male patients in smoking COPD group were more than which in non-smoking COPD group (P<0.05), but no statistical significance of age and lung functions in smoking COPD group and non-smoking COPD group. The level of serum CC-16 was significantly decreased in COPD patients (P<0.001). There was no statistical significance of serum CC-16 found between COPD patients with or without smoking history. The level of serum CC-16 was tending to decrease in non-COPD smokers,but there was no statistical significance. Conclusions： The level of serum CC-16 is lower in COPD patients than that in healthy controls. There is no statistical significance in serum CC-16 between smoking COPD patients and non-smoking COPD patients, which is need more evidences from further study on larger population.

chronic obstructive pulmonary disease; Clara cell protein; smoking

2016-06-01[接受日期]2016-08-06

上海市科學技術委員會西醫引導類項目(14411965900)，上海市衛生和計劃生育委員會中醫藥科研基金 (2014LP004A). Supported by Medical Guide Project of Shanghai Municipal Science and Technology Commission (14411965900 ), and Traditional Chinese Medicine Research Grant from Shanghai Municipal Commission of Health and Family Planning (2014LP004A).

姜紅妮，博士，副主任醫師. E-mail: jhn2001@sina.com

Corresponding author). Tel: 021-64041990-2307, E-mail: zhang.jing@zs-hospital.sh.cn

10.12025/j.issn.1008-6358.2016.20160664

R 563

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