肺炎支原體快速檢測方法的建立及應用評價

張　杰，胡　軍，劉　楊，李　元

(1.西安交通大學醫學院　710049；2.陜西省安康市中心醫院輸血科　725000；3.陜西省人民醫院中心實驗室，西安 710068)

?

·論著·

肺炎支原體快速檢測方法的建立及應用評價

張杰1,2，胡軍1,3△，劉楊1,3，李元1,3

(1.西安交通大學醫學院710049；2.陜西省安康市中心醫院輸血科725000；3.陜西省人民醫院中心實驗室，西安 710068)

目的制備抗肺炎支原體(MP)的特異性單克隆抗體，利用單克隆抗體建立MP膠體金快速檢測方法。方法采集急性呼吸道感染患兒咽拭子標本，分離培養并鑒定MP，純化MP抗原，制備抗MP單抗，利用單抗建立MP膠體金檢測試紙條。取疑似MP感染患者的咽拭子標本，分別使用熒光定量PCR法和膠體金快速檢測法對其進行檢測，觀察并統計檢查結果。結果成功分離培養出MP菌株，滅活并純化出MP抗原，利用該抗原免疫小鼠，通過雜交瘤技術制備出抗MP單克隆抗體19株，從中選出效價高、特異性較好的兩株單克隆抗體(MP-5和MP-19)作為原材料制備MP膠體金快速檢測試紙條。膠體金試紙條最低檢測限為20 ng。分別采用膠體金試紙條和熒光定量PCR法對臨床標本進行檢測，結果顯示，本研究制備的MP膠體金快速檢測法的靈敏度為88.2%，特異度為82.6%。結論制備出抗MP的特異性單克隆抗體，已初步建立MP膠體金快速檢測法，并為臨床MP感染患者的快速診斷提供幫助。

肺炎支原體；單克隆抗體；膠體金免疫層析法

肺炎支原體(MP)是引起兒童、成人支氣管炎的重要病原體之一[1],學齡期兒童是主要的易感人群，可引起兒童大葉性肺炎[2]。由于MP感染的治療方案與其他細菌感染和病毒感染不同，區分是否為支原體感染對臨床治療有指導作用。……