1 237例不孕癥患者染色體檢查結果分析

趙　婧，黃　湘，張艷芳，梁少霞，鄭國兵

(廣東省中山市博愛醫院產前診斷中心　528400)

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·論著·

1 237例不孕癥患者染色體檢查結果分析

趙婧，黃湘，張艷芳，梁少霞，鄭國兵

(廣東省中山市博愛醫院產前診斷中心528400)

目的對1 237例不孕癥患者進行染色體檢查，分析核型結果并探討不孕癥與染色體異常的關系。方法對該院2010年3月至2014年12月收治的1 237例不孕癥患者的外周靜脈血進行淋巴細胞培養，收獲細胞，低滲下固定制片，經G顯帶處理后鏡檢進行觀察。結果1 237例患者共檢出異常核型111例，總檢出率8.9%，其中性染色體異常57例，常染色體異常54例。結論染色體異常是導致原發性不孕的重要原因之一，因染色體異常導致的不孕多數是不可逆的，所以細胞遺傳學檢查染色體在不孕癥患者的診療過程中尤為重要。

不孕；染色體核型；染色體異常

育齡夫婦不孕不育或反復流產的原因很多，并且復雜。染色體異常是導致不孕和流產的重要原因之一[1-3]。染色體異常可能是突變及環境因素引起的，也可能是遺傳因素引起的[4-5]。為了解不孕癥與染色體異常的關系，更好地對患者進行治療和開展遺傳咨詢，現將2010～2014年到本院生殖中心不孕不育門診就醫的1 237例患者行外周血染色體檢查，現將結果報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料收集2010年3月至2014年12月本院生殖中心門診收治1 237例不孕癥患者，其中男729例，女508例，年齡22～45歲，部分夫妻已共同生活1年以上，未采取任何避孕措施，但無一次懷孕經歷。本院生殖中心專科門診對每例患者均進行了詳細地詢問，包括病史以及夫妻生活狀況，取得患者知情同意后采外周血進行染色體檢查。

1.2方法用無菌注射器抽0．2%肝素抗凝的外周血1.0 mL。無菌操作取0．5 mL分別加至兩瓶淋巴細胞培養基中，置37 ℃恒溫培養箱培養72 h，加入秋水仙素后，收獲細胞，經染色體制備、G顯帶處理，在MetaSystems染色體自動掃描分析系統平臺下分析20～30個分散較好的中期分裂象，發現有嵌合體或異常核型的細胞時可計數至40～60個。

1.3統計學處理采用SPSS19.0統計軟件對所得數據進行統計分析，計數資料以例數或構成比表示。

2　結　　果

2.1外周血細胞培養結果1 237例患者的血液標本中，1 230例第一次培養成功，成功培養率為99.4%(1 230/1 237)，7例均因淋巴細胞生長不良而失敗，但通知患者再次抽血后均培養成功，總成功培養率為100.0%(1 237/1 237)。

2.2外周血核型分布情況1 237例患者成功培養的羊水細胞經核型分析后顯示111例核型異常，檢出率為8．9%(111/1 237)，其中性染色體異常57例，常染色體異常54例。異常核型中有男性患者71例，檢出率為9.7%(71/729)，女性患者40例，檢出率為7.8%(40/508)。見表1、2。

表1　　男性異常核型分布(n=71)

續表1　　男性異常核型分布(n=71)

表2　　女性異常核型分布(n=40)

3　討　　論

1 237例患者成功培養的羊水細胞經核型分析后顯示111例核型異常，檢出率為8.9%(111/1 237)。異常核型中有男性患者71例，檢出率為9.7%(71/729)，女性患者40例，檢出率為7.8%(40/508)，該結果表明人體內染色體的異常是導致不孕不育的重要原因之一。目前，細胞遺傳學檢查成為診治原發性不孕癥的重要檢查手段。

男性患者中性染色體異常者有37例占52.1%(37/71)，為男性不育癥的主要原因。其中47,XXY型有10例，占的比例最多。這類患者通常表現智力正常、身材細長、無喉結、體毛少，主要是睪丸發育不良導致無精子。47，XYY型的表現為患者可出現結節囊性痤瘡和骨骼畸形，特別是尺橈骨骨性連接。患者的性腺、第二性征和健康男性一樣，但有睪丸功能輕度障礙，其表現是精子形成障礙。本研究發現46，XY,Yqh-型7例，通過對細胞遺傳學核型進行分析，發現其Y染色體小于G組染色體，因此還不能確診是因為染色體微缺失所導致，還是因為Y染色體排列過于緊密而導致異致性的不育癥[2]。46，XX型患者呈男性表型，但身材矮小，陰莖正常或較小，睪丸小，與真兩性畸形不同的是患者無卵巢和副中腎管結構，1/3患者呈女性型乳房，半數兒童患者有尿道下裂和痛性陰莖勃起，成年期因睪丸功能不全而表現為高促性腺激素，性腺功能低下，精液中無精子或精子密度低下，智力一般正常[5]。本研究發現1例45，X/46,XY型嵌合體患者，性染色體嵌合體的發生原因可能為有絲分裂后期延遲，造成Y染色體丟失或染色體結構重排，導致結構異常的Y染色體丟失。其臨床表型呈現高度異質性，多數研究者認為表型與外周血中核型不同的兩種細胞系所占的比例無關，甚至與性腺中兩種細胞系的比例的關系也不大[6]。95%的個體可能具有正常的男性表型，但會因精子形成障礙導致不孕。另外常染色體異常者有34例，主要為染色體的平衡易位、羅伯遜易位導致衍生染色體的生成以及染色體的臂間倒位。平衡易位和倒位由于無基因的丟失，攜帶者本身并不發病，卻可因生殖細胞染色體異常而導致不孕癥、流產和畸胎等生殖功能障礙。羅伯遜易位攜帶者的配子和正常配子結合的子代中，大概只有18%是正常，其余72%為不平衡合子。這些不平衡合子會引起流產或畸形[7]。1例為47，XY,+mar型。標記染色體又稱超數染色體,是一類未知來源的多于正常染色體數目(2n)的小染色體,其來源用傳統的遺傳學顯帶技術并不能明確辨認。標記染色體的大小變異范圍較大,可能是微小片段,也可能大于G組染色體,而前者的攜帶者一般無臨床癥狀,后者則常表現為智力低下并伴有其他畸形。該例患者門診的化驗結果提示其嚴重的少、弱精子可能是由于睪丸生精功能低下引起。但是由于不能對該患者mar的來源及其功能進行測定,不能肯定該患者嚴重的少、弱精子是由mar引起。該例患者存在嚴重的生育能力問題,尚不能確定其攜帶的mar對其本人以及后代有何影響。

女性患者中性染色體異常者有20例占50.0%(20/40)。其中性染色體數目異常者有19例。X染色體的數目存在異常，即45，X型與47，XXX型異常。該類患者主要表現為乳房發育不良，腋毛、陰毛稀疏；內部體征為沒有月經來潮、卵巢發育不全、性腺未發育等，以上這些都會導致女性患者產生原發性不孕[7]。常染色體異常為20例，主要為染色體的平衡易位，染色體相互異位，具體為兩條染色體都有一個斷裂處，交換了無著絲粒片斷后相連，從而構成一條新的衍生染色體。一般情況下，染色體易位并未丟失遺傳物質，體表很少產生明顯的特征。所以要求孕婦必須作產前染色體診斷，防止畸形兒出生。發現1例為46,X，+mar型。當X染色體結構異常或缺少或增加1條X染色體時，會影響女性第二性征的正常發育，出現程序不同的Turner綜合征。1例46,XX,del(22)(q13)型患者，22號染色體長臂部分缺失，可能導致某些遺傳物質的丟失，當該異常染色體形成配子遺傳到下一代時就容易造成流產。

本研究還發現男性患者和女性患者都出現了一些染色體臂間倒位現象，部分專家認為這種染色體變異是不具備臨床意義的，但另一部分學者卻認為，臂間倒位頻率與患者不育流產的頻率有極大的關聯[8-9]。目前這方面的病例稀少，很難展開研究，具體情況需要做進一步研究。

綜上所述，在不孕癥患者中，染色體異常率高出健康群體5%～10%[10-11]，這不僅是因為染色體的多態性，更主要是因為染色體的畸變。因此，及時檢出倒位、平衡易位等染色體異常攜帶者，并積極開展遺傳咨詢、生育指導和產前診斷對優生優育和提高人口素質有著重要作用。

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[4]張鵬．卵巢早衰不孕癥的臨床及相關遺傳學基礎研究[D].濟南：山東大學，2007．

[5]韓璐，林暉，邱惠國，等．閩南地區803例男性不育患者的染色體核型分析[J].中國優生與遺傳雜志，2009，14(11)：43-44,75．

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[7]潘倩瑩，孫筱放，孔舒，等．1 130例不孕癥患者染色體檢查分析[J].中國醫藥指南，2012,9(14)：117-118．

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[11]夏家輝，李麓蕓．染色體病[M]．北京：科學出版社，1987:72-73.

Analysis of chromosome detection results in 1 237 infertile patients

ZHAOJing,HUANGXiang,ZHANGYanfang,LIANGShaoxia,ZHENGGuobing

(PrenatalDiagnosisCenter,ZhongshanBoaiHospital,Zhongshan,Guangdong528400,China)

ObjectiveTo perform the chromosome detection in 1 237 infertile patients for analyzing the karyotypes results and investigating the relationship between infertility and chromosome abnormalities.MethodsThe peripheral venous blood samples in 1 237 infertile patients in our hospital from March 2010 to December 2014 were collected,performed the lymphocyte culture,obtained cells,fixed under hypotonic condition,prepared the section and observed them by microscope after G-banding treatment.ResultsAmong 1 237 patients,111 cases abnormal karyotypes were detected with the total abnormal detection rate of 8.9%,in which,57 cases were sex chromosomes abnormality,54 cases were euchromosomes abnormality.ConclusionChromosome abnormality is one of the important causes leading to primary infertility.Infertility caused by chromosome abnormalities is irreversible,so the chromosome cytogenetic examination is especially important in the diagnosis and treatment process of infertile patients.

infertility；karyotype；chromosome abnormality

趙婧，女，主管技師，主要從事細胞遺傳研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.021

A

1673-4130(2016)17-2411-03

2016-04-02

2016-06-12)