抗-M抗體對ABO血型鑒定的影響

涂業桃

(西南醫科大學附屬醫院輸血科，四川瀘州 646000)

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·臨床研究·

抗-M抗體對ABO血型鑒定的影響

涂業桃

(西南醫科大學附屬醫院輸血科，四川瀘州 646000)

目的探討抗-M抗體對血型鑒定正反定型不符的影響及臨床意義。方法收集2014年10月至2015年9月在該院進行血型鑒定的27 620例標本，其中26例標本ABO血型正反定型不符。經鹽水介質法復查，仍有8例標本正反定型不符。對這8例標本進行抗體篩查和鑒定。結果經鑒定，8例標本的血清中檢出5例抗-M抗體(62.5%)，2例抗-I抗體(25%)，1例抗-Lua抗體(12.5%)。經卡方檢驗，抗-M抗體的百分比明顯高于其他兩種抗體，差異有統計學意義(P<0.05)。結論抗-M抗體干擾ABO血型鑒定，容易引起血型鑒定錯誤，有重要的臨床意義。

抗-M抗體;ABO血型;血清學試驗;不規則抗體

MNS血型系統是繼ABO血型之后第二個被發現的血型系統，其復雜性僅次于Rh系統[1]。目前已經確定的抗原有46個，中國漢族人群中M抗原頻率為45%～50%[2]。MNS血型抗體有抗-M抗體、抗-N抗體和抗-S抗體，其中抗-M抗體在人體血液中比較常見，多為自然產生，也有報道因輸血或細菌感染而產生的抗體。其以IgM類抗體為主，少部分是IgG類抗體[3]。近年來由抗-M抗體引起ABO血型正反定型不符的個案報道較多[4-6]，引起輸血科醫師的廣泛重視。血型鑒定是保證臨床安全輸血的重要步驟，血型鑒定錯誤將導致嚴重的輸血事故。因此，本科從2014年10月起，嚴格記錄和分析血型正反定型不一致的標本。截止2015年9月30日，累計鑒定血型27 620例，發現26例標本ABO血型正反定型不一致。本研究主要分析抗-M抗體對血型鑒定的影響，以期為疑難血型鑒定提供參考依據。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2014年10月1日至2015年9月30日本院住院患者常規血型標本共27 620例，發現26例正反定型不符標本。經鹽水法復查，仍然發現8例正反定型不符標本。

1.2儀器與試劑血型鑒定卡，0.8%A1、B反定型紅細胞(長春博迅生物技術有限責任公司)，4%A1、B、O反定型紅細胞(長春博迅生物技術有限責任公司)，抗A、抗B單克隆抗血清(上海血液生物醫藥有限責任公司)，亞洲人抗體篩查細胞(Diamed AG)，低離子抗人球蛋白卡(達亞美有限責任公司)，Baso凝聚胺溶液(珠海貝索生物技術有限公司)，Thermo移液器(50、10 μL)，Baso 2005-1離心機(臺灣貝索企業有限公司)，長春博訊TD-3A型離心機，37 ℃電熱恒溫水溫箱，80-1型電動離心機，AnkeTDL80-2B離心機。所有試劑和儀器均批檢合格并在有效期內使用。

1.3檢測方法分離血漿和紅細胞后，取微柱凝膠卡進行ABO、RhD血型鑒定，具體操作步驟按操作說明書進行，血型結果均由人工判讀，判斷標準見文獻[3]。因 ABO血型正反定型結果不符，進一步采用鹽水介質法進行復檢，同時做不規則抗體篩查及直接抗人球蛋白試驗，并送至成都市血液中心參比實驗室進一步確診。玻片法按照《全國臨床檢驗操作規程》進行操作和判讀結果[4]。

1.4統計學處理采用SPSS19.0統計軟件對數據進行處理和分析，計量資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

2.1血型鑒定結果采用微柱凝膠法對8例標本進行ABO、RhD血型鑒定，并用鹽水介質法進行復檢，發現除4號標本外，其余7例標本的ABO血型鑒定為正反定型不符，RhD血型鑒定未受影響。4號標本鹽水法正反定型相符，可能原因為血漿中不規則抗體效價低或者室溫反應時間不夠，或是血漿中僅存在IgG性質的抗體，所以鹽水介質法未發生凝集?？紤]患者血漿中含有ABO以外的不規則抗體干擾血型鑒定結果。在37 ℃溫育30 min，結果顯示除4號標本外其他7例患者血漿與反定型細胞不規則凝集端凝集強度有所減弱，但無法通過改變反應溫度完全消除，正反定型仍然不合，需進一步做抗體篩選、抗體鑒定和血型鑒定。見表1。

表1　　8例患者血型鑒定結果

注：-為凝集反應陰性；+～++++為凝集強度；mf為混合凝集；/表示未檢測。

表2　　抗體篩查及鑒定結果

注：-為凝集反應陰性；+～++++為凝集強度。

2.2抗體篩查及抗體鑒定結果本實驗室對這8例標本進行抗體初篩試驗均為陽性。由于實驗室條件有限，將這8例標本送成都市血液中心參比實驗室進行血清學鑒定和血型確診，檢出5例抗-M抗體(62.5%)，2例抗-I抗體(25.0%)，1例抗-Lua抗體(12.5%)。其中，抗-M抗體占比明顯高于其他兩種抗體，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

3　討　　論

抗-M抗體是MNS血型系統的常見抗體，分為天然抗體和免疫性抗體，大多是IgM類性質，偶見IgG類，多數由輸血或妊娠刺激產生，可產生較嚴重的輸血反應。國內外均有抗-M抗體引起溶血性輸血反應的報道[5]。IgG類抗-M抗體亦可通過胎盤，引起新生兒溶血病的發生[6]。由于M抗原在紅細胞上有足夠的密度，因此即使是IgG型的抗-M抗體也可在鹽水介質中產生凝集反應[7]?？?M抗體在4 ℃時活性最強，如果患者處于低溫麻醉狀態下手術時需注意，此類抗體可激活補體，在冷抗體最適反應溫度范圍內(4～20 ℃)，可發生溶血反應[8]。由此可見，輸血前正確的血型鑒定和抗體篩查十分重要。

血型鑒定是輸血科的日常工作，遇到正反定型不符的情況較為多見，原因基本可分為抗原、抗體的減弱或血清中存在不規則抗體及亞型的影響等,尤其是有免疫史、肝腎功能障礙、惡病質、血液病等人群出現正反定型不符的情況較為多見。特別是很多腫瘤患者，已經接受過多次輸血以及其他藥物治療，因多次輸血可導致患者體內免疫性IgG類抗體效價的增高，從而引起再次輸血時血型鑒定困難。在常規血型鑒定時，出現了較多的高效價抗-M抗體引起正反定型不符的情況。在血型鑒定時由于 A、B、O標準紅細胞由多人份紅細胞混合配制而成，紅細胞上除A、B抗原外還可能含有一些其他的低頻抗原，如M抗原、N抗原或P抗原等，如果患者血清中存在相應低頻抗原的抗體時，反定型都呈現O型反應模式，可以干擾血型鑒定結果[9-10]。

血型鑒定的準確性是保證后續交叉配血的重要前提。在常規血型鑒定中務必要堅持做正反定型，正反定型結果相互印證，可顯著降低出現錯誤的概率，確保血型鑒定的準確性。如有正反定型不符的情況要引起注意，應進一步做抗體篩查和血清學試驗查找原因，以發現具有臨床意義的不規則抗體，避免輸血不良反應的發生。同時也要結合患者臨床情況排除疾病因素等對血型鑒定的影響。對于特殊血型的患者，輸血科應建立疑難血型鑒定登記本，詳細記錄患者的檢測結果，盡量確保輸入同型或配合型血液成分，防止免疫性溶血反應的發生，以提高輸血安全性和輸血療效。

綜上所述，對患者進行正反定型以及不規則抗體篩查是非常重要的。嚴格掌握血型鑒定及交叉配血試驗的分析路線，并規范化操作，對于避免臨床輸血反應的發生，確保輸血安全具有重要的意義。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.044

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1673-4130(2016)17-2461-03

2016-02-02

2016-05-01)