兩種血清鐵檢測試劑盒性能評(píng)價(jià)

謝文文

(江蘇省太湖康復(fù)醫(yī)院，江蘇無錫 214086)

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·臨床研究·

兩種血清鐵檢測試劑盒性能評(píng)價(jià)

謝文文

(江蘇省太湖康復(fù)醫(yī)院，江蘇無錫 214086)

目的探討寧波美康公司生產(chǎn)的血清鐵檢測試劑盒和美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)的血清鐵檢測試劑盒的性能差異。方法依據(jù)美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)文件EP15-A2對血清鐵檢測試劑盒進(jìn)行精密度和正確度評(píng)價(jià)；依據(jù)EP6-A文件進(jìn)行線性范圍評(píng)價(jià)；依據(jù)EP9-A2文件進(jìn)行方法學(xué)比較。結(jié)果寧波美康公司試劑盒：高、低濃度的批內(nèi)不精密度(CV)分別為1.56%和1.51%，總不精密度分別為1.83%和2.19%；原衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心2份室間質(zhì)評(píng)物的檢測結(jié)果與靶值比較，相對偏倚分別為-4.67%和-5.83%，線性良好(r=0.999 9)。Beckman Coulter公司試劑盒：高、低濃度的批內(nèi)不精密度分別為0.89%和1.55%，總不精密度分別為2.26%和2.25%；原衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心2份室間質(zhì)評(píng)物的檢測結(jié)果與靶值比較，相對偏倚分別為-3.11%和-3.33%，線性良好(r=0.999 9)。結(jié)論兩種血清鐵檢測試劑盒的性能指標(biāo)均能滿足臨床檢測需求，國產(chǎn)的寧波美康血清鐵試劑盒與原裝試劑盒檢測結(jié)果具有相關(guān)性良好，國產(chǎn)試劑盒可以在臨床上得到更廣泛地應(yīng)用。

血清鐵檢測試劑盒；性能驗(yàn)證；相關(guān)性檢測

人體的生理狀態(tài)下，體內(nèi)的轉(zhuǎn)鐵蛋白僅1/3與鐵結(jié)合，這部分結(jié)合的鐵稱為血清鐵。人體內(nèi)血清鐵的增高和降低對于鑒別各種類型的貧血，判斷妊娠期婦女體內(nèi)鐵的代謝情況，以及如何合理地利用鐵劑治療各種貧血及觀察后續(xù)療效均有重要的意義。為了更好地對國產(chǎn)及進(jìn)口試劑盒的性能進(jìn)行評(píng)估，筆者依據(jù)美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)頒發(fā)的EP15-A2、EP6-A文件對血清鐵檢測試劑盒進(jìn)行了精密度、正確度和線性范圍的評(píng)價(jià)試驗(yàn)[1-2]，同時(shí)依據(jù)EP9-A2對兩種試劑盒檢測結(jié)果的相關(guān)性進(jìn)行了評(píng)估[3-5]。現(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來源用于試劑盒性能驗(yàn)證的臨床標(biāo)本均來自于本院檢驗(yàn)科，用于正確度驗(yàn)證試驗(yàn)的標(biāo)本來自于原衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2儀器與試劑采用美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)的AU5400全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測。血清鐵檢測試劑盒(亞鐵嗪法，以下簡稱為試劑盒A)為寧波美康生物科技股份有限公司生產(chǎn)，血清鐵檢測試劑盒(TPTZ法，以下簡稱試劑盒B)為美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)的原裝試劑，血清鐵的校準(zhǔn)品均為廠家配套校準(zhǔn)品，質(zhì)控物為美國伯樂公司的第三方質(zhì)控品。

1.3方法

1.3.3線性范圍評(píng)價(jià)按照EP6-A文件進(jìn)行,將生理鹽水和線性范圍高值標(biāo)本分別按6︰0、5︰1、4︰2、3︰3、2︰4、1︰5、0︰6的比例稀釋成不同濃度的標(biāo)本，每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測定2次，記錄測定結(jié)果，做線性回歸分析。

1.3.4方法學(xué)比對按照EP9-A2文件進(jìn)行，每天選擇8份臨床標(biāo)本，按1～8的順序編號(hào)，分別用兩種試劑對標(biāo)本進(jìn)行檢測，按照1～8號(hào)的順序和8～1的順序進(jìn)行測定，重復(fù)5 d，檢測應(yīng)在2 h內(nèi)完成且保證血清鐵的室內(nèi)質(zhì)控在控，收集80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。分析標(biāo)本的濃度應(yīng)盡可能在線性范圍內(nèi)均勻分布，但至少有50%的標(biāo)本濃度在參考范圍以外，線性范圍以內(nèi)。以TPTZ法為比較方法，做線性回歸方程。

2　結(jié)　　果

2.1精密度評(píng)價(jià)兩種試劑盒的批內(nèi)不精密度和總不精密度均滿足本室的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，其中試劑盒A的總不精密度小于試劑盒B的檢測結(jié)果。見表1。

表1　　兩種試劑盒的精密度評(píng)價(jià)結(jié)果(%)

注：CLIA′88為美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法規(guī)′88；TEa為最大允許誤差。

2.2正確度評(píng)價(jià)兩種試劑盒檢測原衛(wèi)生部能力驗(yàn)證計(jì)劃中室間質(zhì)評(píng)物結(jié)果偏倚均在本室的允許偏倚之內(nèi)。見表2。

表2　　兩種試劑盒的正確度評(píng)價(jià)結(jié)果

注：偏倚=(本室檢測值-靶值)/靶值×100%。

2.3線性范圍評(píng)價(jià)兩種試劑的線性回歸方程相關(guān)系數(shù)r均為0.999 9,滿足b在0.97～1.03范圍內(nèi)，a接近于0，r>0.975的評(píng)價(jià)條件。見圖1、2。

圖1　　試劑盒A檢測結(jié)果的回歸直線

圖2　　試劑盒B檢測結(jié)果的回歸直線

2.4方法學(xué)比對線性回歸方程為Y=0.997 1X-0.52，r=0.996 3，血清鐵的醫(yī)學(xué)決定水平為8.0、39.4、71.6 μmol/L，在鐵的醫(yī)學(xué)決定水平處的誤差分別為-6.79%、-1.61%、-1.02%，均<1/2CLIA′88TEa。見圖3。

圖3　　血清鐵水平的直線回歸

3　討　　論

一直以來，廠家都提倡使用儀器的配套檢測系統(tǒng)，包括原裝的試劑和校準(zhǔn)物，但是必須看到儀器的配套檢測系統(tǒng)因其檢測成本高，目前還僅局限應(yīng)用于許多大型三甲醫(yī)院[6-8]。考慮到我國的綜合國情，還是應(yīng)該加大對國產(chǎn)試劑盒的開發(fā)和應(yīng)用。因此，筆者以新項(xiàng)目的開展為契機(jī)，對國產(chǎn)和原裝試劑盒的性能進(jìn)行了詳細(xì)地評(píng)估。

從精密度的數(shù)據(jù)來看，兩種試劑盒的精密度都在本實(shí)驗(yàn)室的允許范圍之內(nèi)，可以應(yīng)用于臨床，同時(shí)必須看到的是：試劑盒A的總不精密度小于試劑盒B，說明國產(chǎn)試劑盒在試劑的穩(wěn)定性方面已經(jīng)逐步趕超進(jìn)口試劑，這是一個(gè)可喜的進(jìn)步。

在精密度可靠的前提下，本研究發(fā)現(xiàn)，兩種試劑盒的正確度評(píng)價(jià)結(jié)果均在允許偏倚內(nèi)。眾所周知，要評(píng)價(jià)試劑盒的優(yōu)劣，正確度是非常關(guān)鍵的指標(biāo)，沒有良好的正確度，就不能給臨床提供準(zhǔn)確的結(jié)果，會(huì)影響臨床醫(yī)生對疾病的診治和療效分析。本研究選取了原衛(wèi)生部能力驗(yàn)證計(jì)劃中的室間質(zhì)評(píng)物作為檢測物質(zhì)，對于正確度的評(píng)價(jià)分析是可靠、有效的。

在臨床檢驗(yàn)工作中，研究者希望試劑盒的線性范圍在一定范圍內(nèi)越寬越好[9-10]。本研究結(jié)果顯示，雖然兩種試劑盒的線性良好，但可能是因?yàn)榉椒▽W(xué)的限制，國產(chǎn)試劑盒的線性范圍較窄，這也是目前國內(nèi)很多試劑盒的一個(gè)通病，筆者希望國內(nèi)的試劑廠商可以在保證試劑盒其他性能指標(biāo)優(yōu)良的前提下，加快對反應(yīng)體系的改進(jìn)，拓寬試劑盒的線性范圍，使國產(chǎn)試劑可以得到更廣泛地應(yīng)用。

針對兩種不同的檢測方法，本研究進(jìn)行了方法學(xué)的比對，研究顯示國產(chǎn)試劑的檢測結(jié)果均比原裝試劑低，但對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸分析可發(fā)現(xiàn)，在血清鐵的醫(yī)學(xué)決定水平處誤差均能滿足本實(shí)驗(yàn)室的評(píng)價(jià)要求，因此認(rèn)為兩種方法相關(guān)性良好。

綜上所述，目前我國生產(chǎn)研發(fā)的生化項(xiàng)目檢測試劑已經(jīng)可以和進(jìn)口試劑比肩，它的巨大優(yōu)勢是成本相對較低，試劑的儲(chǔ)存、運(yùn)輸條件均優(yōu)于進(jìn)口試劑，可以更加廣泛地應(yīng)用于臨床，為臨床服務(wù)。

[1]CLSI.EP15-A2 User verification of performance for precision and trueness[S].Wayne,PA:CLSI,2005.

[2]CLSI.EP6-A Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures:a statistical approach[S].Wayne,PA:CLSI,2003.

[3]CLSI.EP9-A2 Method comparison and bias estimation using patient samples[S].Wayne,PA:CLSI,2002.

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.050

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1673-4130(2016)17-2473-03

2016-03-03

2016-05-11)