南丹參藥材薄層色譜研究*

李晶　王小青　陳超　虞金寶（江西省中醫藥研究院　南昌330046）

·中西藥苑·

南丹參藥材薄層色譜研究*

李晶王小青陳超虞金寶
（江西省中醫藥研究院南昌330046）

目的：建立南丹參藥材的定性控制方法。方法：采用薄層色譜法分別檢查藥材中的丹參酮類和丹參酚酸類成分。結果：丹參酮類和丹參酚酸類成分分別在以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（5∶1）和甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶0.5∶2）為展開劑的條件下獲得理想分離。結論：該方法簡便、快速，可作為南丹參藥材的定性控制方法。

南丹參；顯微鑒別；薄層鑒別

1　儀器與試藥

1.1儀器麥克奧迪B1顯微鏡，SPU-Ⅰ自動噴霧顯色器（日本），PBQ-Ⅰ薄層自動鋪板器（四川重慶），定量毛細管（美國Drummond公司），CQ-250超聲波清洗儀（上海船舶電子設備研究所），硅膠G、GF254（薄層層析用：青島海洋化工有限公司）。

1.2南丹參藥材分別來源于江西南昌（2013051301、2013051302、2013061401、2013061402、2013081501）；江西德安（2013051303、2013052201）；江西婺源（2013051401、2013051402）；江西于都（2013060201）。

1.3試劑丹酚酸B對照品（批號：

110562-200807，中國藥品生物制品檢定所）、丹參酮ⅡA對照品（批號：110766-200416，中國藥品生物制品檢定所）、丹參對照藥材（批號：120923-200610，中國藥品生物制品檢定所），其它試劑均為分析純。

2　方法與結果

2.1原植物南丹參Salvia bowleyana Dunn.多年生草本。見圖1。莖高約1 m，被長柔毛。葉為羽狀復葉；小葉5（7）片，頂端小葉卵狀披針形，長4.0～7.5 cm，下面脈上被疏柔毛，側生小葉較小；葉柄長4～6 cm，被長柔毛。輪傘花序8至多花，苞片披針形；花萼筒狀，長8～10 mm，外被具腺疏柔毛，二唇形，上唇三角形，頂端尖，下唇三角形，淺裂為2齒；花冠淡紫色至藍紫色，長19～24 mm，花冠筒內具毛環，下唇中裂片倒心形，邊緣具小齒；花絲長約4 mm，藥隔長19 mm，上臂長達15 mm，下臂長約4 mm，下臂2藥室不發育，且頂端聯合。小堅果橢圓形，頂端有毛。生于山地、林下、水邊，海拔30～960 m處。廣泛分布于長江以南地區，江西作為主產區之一，分布于南昌、九江、贛州、宜春等地。

圖1　南丹參原植物

2.2鑒別

2.2.1顯微鑒別根橫切面：木栓層為3～7列細胞。皮層較寬，有裂隙。維管束5～8個，放射狀排列；韌皮部呈半月形。束間形成層較明顯，木質部由導管、木纖維、木薄壁細胞組成，木纖維常成群附于導管旁。射線寬廣。見圖2。粉末特征：紅棕色。網紋及具緣紋孔導管多見，直徑11～60 μm，網紋導管末端鈍尖、鈍圓或銳尖，壁較厚，穿孔位于端壁或側壁。網孔較狹而短；具緣紋孔導管粗短，具緣紋孔類圓形，排列密集，有的具網狀三生增厚。石細胞多見，類圓形、類三角形、類長方形或不規則形，孔溝明顯，有的胞腔內含黃棕色物。木纖維多為纖維管胞，長梭形，有的呈彎曲狀，末端斜尖。見圖3。

圖2　南丹參根橫切面

圖3　南丹參粉末鑒別

2.2.2丹參酮類TLC鑒別取南丹參藥材粉末5 g，置錐形瓶中，加乙酸乙酯40 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參酮ⅡA對照品，加乙酸乙酯制成每1 ml含2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述對照品溶液5 μl、供試品溶液5～10 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（5∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的暗紅色斑點。見圖4。置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點。見圖5。

圖4　丹參酮類TLC圖（日光）

圖5　丹參酮類TLC圖（紫外光燈365 nm）

2.2.3丹酚酸B的TLC鑒別取南丹參藥材粉末0.2 g，加75%甲醇25 ml，加熱回流1 h，濾過，濾液濃縮至1 ml，作為供試品溶液。另取丹酚酸B對照品，加75%甲醇制成每1 ml含2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各5 μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶0.5∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。見圖6。

圖6　丹酚酸TLC圖

3　討論

因南丹參藥材與丹參藥材在植物形態上較為相近，為了能明確區分開該兩個品種，我們同步對比了丹參藥材原植物，發現南丹參的小葉為卵形或卵狀披針形，先端漸尖或尾狀漸尖，丹參小葉為卵園形或寬卵園形，先端鈍尖；南丹參的花冠多為紫紅色或淡紫色，而丹參的花冠多為藍紫色；南丹參根莖下少數主根，根呈紡錘形，粗而短，而丹參根莖下著生多數細長的根，根呈圓柱形；南丹參小堅果4，菱形（橢圓形），而丹參小堅果4，長圓形或橢圓形。

本次研究中，我們對南丹參藥材在我省的資源分布情況進行了調查研究，發現南昌、九江（德安）、上饒（婺源）、贛州、宜春（宜豐）等地均有散在的野生，與文獻［5］中南丹參在中國的潛在分布區預測結果較為接近。根據我們采挖發現以婺源的野生資源較集中，有局部成片生長，其次為南昌梅嶺、九江（德安）、贛州、宜春（宜豐）的幾個采挖點均較零散。根據樣本采集的生境調查結果顯示，南丹參藥材多生于半山坡以下及相應的路邊、溪邊。喜微堿性的石灰巖土壤，喜溫暖光照，空氣濕潤。

現有文獻資料中未見有關南丹參的薄層鑒別研究，僅報道稱其含與丹參相同的丹參酮類和丹參酚酸類兩大類成分有10余種［3～4］。經薄層色譜研究證實，南丹參藥材中含有與丹參相同的丹參酮ⅡA和丹酚酸B，同時實驗中通過與丹參藥材和對照藥材的對比研究發現，南丹參藥材中檢出獨有的藍色熒光斑點，目前該成分尚未可知，此后將對其進行進一步分析研究。實驗建立的薄層色譜鑒別方法穩定、重現性好、靈敏度高，可作為南丹參藥材的鑒別方法。

［1］衛生部藥政管理局.中藥材手冊［M］.北京:人民衛生出版社，1990.54

［2］國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草（上冊）［M］.上海:上海科學技術出版社，1999.1652

［3］劉丹，余良忠，文萍.HPLC法測定南丹參中丹酚酸B的含量［J］.遼寧中醫雜志，2011，38（9）:1872-1873

［4］沈建芳，王強，汪紅.南丹參化學成分研究［J］.中國野生植物資源，2006，25（2）:55-58

［5］何淑婷，白碧玉，但佳惠，等.基于MaxEnt的南丹參在中國的潛在分布區預測及適生性分析［J］.安徽農業科學，2014，42（8）:2311-2314

The TLC Research of Salvia Bowleyana Dunn

LI Jing，WANG Xiao-qing，CHEN Chao，YU Jin-bao
（Jiangxi Institution of Tradional Chinese Medical and Pharmaceutical Sciences，Nanchang330046）

Objective:Establish the qua litative control method of Salvia bowleyana Dunn.Methods:Used the thin layer chromatography method to detect the tanshinones and salvia phenolic acids.Results:Tanshinones and salvia phenolic acids were seperated very well by the petroleum ether（60～90℃）-ethyl acetate（5∶1）、toluene-Chloroform-ethyl acetate-methanol-formic acid（2∶3∶4∶0.5∶2）.Conclusions:This method is simple，quick，and is applicable to the quality control of Salvia bowleyana Dunn.

Salvia bowleyana Dunn；Microscopic identification；TLC

R284

Bdoi:10.13638/j.issn.1671-4040.2016.07.042南丹參為唇形科植物南丹參Salvia bowleyana Dunn.的干燥根及根莖。功能為祛瘀止痛、活血通經、清心除煩，用于月經不調、經痛閉經、癥瘕積聚、胸腹刺痛、瘡瘍腫痛、心煩不眠、肝脾腫大。南丹參在江西、浙江亦作丹參入藥，含丹參酮ⅡA、隱丹參酮、β-谷甾醇、咖啡酸及丹酚酸A、B、C等成分［1～4］。現代藥理研究表明，南丹參水溶性注射液具有抗凝血和抗心肌缺血作用［2］。目前已知南丹參中水溶性成分主要為丹酚酸類和丹參素類，因此，本次實驗分別對其原植物、顯微及薄層鑒別進行研究，為南丹參藥材的質量控制提供依據。

2016-05-18）

江西省自然科學青年基金項目（編號：20142BAB215065）