不同產(chǎn)地薄荷飲片中揮發(fā)性成分的比較分析

遲玉廣，李中陽，黃愛華，肖鳳霞，劉國光，江斯偉

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，廣東 廣州　510006；2.廣東工業(yè)大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，廣東 廣州　510006)

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不同產(chǎn)地薄荷飲片中揮發(fā)性成分的比較分析

遲玉廣1，李中陽2，黃愛華1，肖鳳霞1，劉國光2，江斯偉1

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，廣東 廣州510006；2.廣東工業(yè)大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，廣東 廣州510006)

目的通過分析比較安徽、湖南、廣東、廣西及江蘇等五個產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油含量和化學(xué)成分，為薄荷飲片的質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用提供參考。方法采用水蒸氣蒸餾法對不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油進(jìn)行提取，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)對其中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分離鑒定，并采用面積歸一化法計算各成分的相對含量。結(jié)果5個產(chǎn)地薄荷飲片中揮發(fā)油提取量存在明顯差異，安徽產(chǎn)揮發(fā)油含量最高，廣西產(chǎn)揮發(fā)油含量最低。5個產(chǎn)地?fù)]發(fā)油中共計檢出49種化學(xué)成分，其中16種為共有成分，11種為產(chǎn)地特有成分。在16種共有成分中，薄荷醇、薄荷酮、胡薄荷酮及乙酸薄荷酯是4種主要成分，其相對含量之和介于51.51%～81.73%之間，存在一定的地域差異。結(jié)論不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油主要成分含量存在的地域性差異，在一定程度上折射出目前中藥市場薄荷飲片質(zhì)量良莠不齊的現(xiàn)狀，需引起足夠重視。

薄荷/分析;中藥產(chǎn)地

薄荷為唇形科(Lamiaceae)薄荷屬(MenthaL.)多年生草本植物，有著悠久的藥食兩用史，廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、香料及煙草行業(yè)。全球薄荷屬植物約有30種，我國現(xiàn)有12種，僅薄荷(MethahaplocalyxBriq.)被2015版《中國藥典(一部)》收載。薄荷藥材為唇形科多年生草本植物薄荷(MenthahaplocalyxBriq.)的干燥地上部分，在我國廣泛分布于南北各省，其中江蘇太倉為傳統(tǒng)地道產(chǎn)區(qū)。作為中國傳統(tǒng)的解表藥，薄荷性辛味涼；主入肺、肝經(jīng)；具有疏散風(fēng)熱、清理頭目、利咽透疹、疏肝行氣之功效，為治風(fēng)熱感冒、風(fēng)疹瘙癢、胸脅脹悶常用之品[1]。

揮發(fā)油是薄荷主要的藥理活性成分和質(zhì)量控制指標(biāo)之一，其成分復(fù)雜，且受遺傳因素、生態(tài)環(huán)境、栽培技術(shù)和采后加工的綜合影響。薄荷中主要的揮發(fā)性化學(xué)成分基本可分為醇、酮、烯及酯類，其中薄荷油中左旋薄荷醇(menthol)含量最高。從目前國內(nèi)外研究的結(jié)果來看，目前關(guān)于薄荷的研究主要集中在薄荷揮發(fā)油提取工藝[2-5]、藥理藥效[6]、定量及成分分析[7]、單一產(chǎn)地?fù)]發(fā)油成分分析[8-10]，關(guān)于不同地區(qū)和不同入藥部分方面的研究相對較少[11-12]。

本文采用傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法對薄荷飲片中的揮發(fā)油進(jìn)行提取，經(jīng)GC-MS技術(shù)分離鑒定。通過比較市售五個產(chǎn)地的薄荷飲片揮發(fā)性成分及其相對含量的差異，以探討目前中藥市場薄荷飲片的質(zhì)量情況，并為薄荷的臨床應(yīng)用和質(zhì)量控制提供理論參考依據(jù)。

1　實驗部分

1.1樣品來源5批次薄荷飲片分別購自于廣州市多家藥店 ，具體樣品信息見表1。

1.2儀器與試劑Agilent 6890-5973N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)；DFT-200型手提式高速萬能粉碎機(jī)(溫嶺市林大機(jī)械有限公司)；TCTT-3103型電子天平(梅特勒-托利多(上海)儀器有限公司)；TC-恒溫電熱套(杭州京久化工有限公司)；揮發(fā)油提取器(廣州偉業(yè)玻璃儀器廠)；乙醚(A.R.，四川西隴化工有限公司，批號：141016)；無水硫酸鈉(A.R.，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：20130910)；實驗用水為去離子水。

1.3揮發(fā)油提取方法取安徽、湖南、廣東、廣西及江蘇5個不同產(chǎn)地薄荷飲片，粉碎并過50目篩，分別精密稱取粉末各100 g，置于2000 mL圓底燒瓶中，加水800 mL，沸石數(shù)粒，搖勻，按2015版《中國藥典(一部)》揮發(fā)油測定法(附錄ⅩD甲法)提取揮發(fā)油，保持微沸4h。讀取揮發(fā)油體積并收集所得揮發(fā)油，加入少量無水硫酸鈉，靜置。然后，稱取薄荷揮發(fā)油0.2 g置于5 mL容量瓶中，加乙醚溶解并稀釋至刻度，待測。每個產(chǎn)地平行操作3次，計算平均得油率。計算公式為：

揮發(fā)油得率=揮發(fā)油體積(mL)/藥材量(g)×100%

平均得油率=(揮發(fā)油得率1+揮發(fā)油得率2+揮發(fā)油得率3)/3

1.4儀器檢測條件

1.4.1氣相色譜條件

色譜柱：DB-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度：240 ℃；程序升溫條件：初始溫度60 ℃(保持3 min)，以2 ℃·min-1升至80 ℃，再以1.5 ℃·min-1升至105 ℃(保持1 min)，再以3 ℃·min-1升至150 ℃(保持2 min)，最后以10 ℃·min-1升至240 ℃(保持10 min)；載氣為He，流速為1.0 mL·min-1，恒流模式；進(jìn)樣量：1 μL；分流比：1∶5。

1.4.2質(zhì)譜條件

電離方式：EI；電子轟擊能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；接口溫度：280℃；掃描范圍m/z：40～550 Amu。數(shù)據(jù)庫為NIST05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜檢索庫。

2　結(jié)果與討論

2.1不同產(chǎn)地薄荷揮發(fā)油外觀性狀及得油率比較不同產(chǎn)地薄荷飲片的所得揮發(fā)油性狀相似，且含量均符合2015版《中國藥典(一部)》的要求[不得少于0.40%(mL·g-1)]，但不同地區(qū)含量差異明顯。其中，安徽產(chǎn)薄荷飲片揮發(fā)油含量最高，為2.42%；廣西產(chǎn)揮發(fā)油含量最低，僅為0.52%；廣東、湖南及江蘇薄荷揮發(fā)油含量居中，介于1.28%～1.80%之間。結(jié)果見表2。

表2　不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油得率及外觀性狀

表1　薄荷飲片來源

表3　不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油成分鑒定結(jié)果

注：(1)“—”表示未檢出；(2)“a”表示5個產(chǎn)地共有成分；(3)“b”表示各產(chǎn)地特有成分。

圖1　不同產(chǎn)地薄荷揮發(fā)油總離子流圖

2.2不同產(chǎn)地?fù)]發(fā)油化學(xué)成分對比分析利用1.4儀器分析條件，通過對五個產(chǎn)地薄荷揮發(fā)油的GC-MS分析，最終得到質(zhì)譜總離子流圖，見圖1。通過對質(zhì)譜圖的比較分析發(fā)現(xiàn)，5個不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油中共鑒定出49種化合物。其中，以江蘇產(chǎn)地化學(xué)成分最多(39種)，其次是廣西(35種)和湖南(34種)，安徽(27種)和廣東(20種)揮發(fā)油中化學(xué)成分?jǐn)?shù)量較少，具體鑒定及含量分析結(jié)果見表3。

從表3得出的化合物種類來看，揮發(fā)油成分總數(shù)除廣東明顯偏少(僅20種)外，其他產(chǎn)區(qū)的薄荷揮發(fā)油成分均達(dá)28種以上，五個產(chǎn)地共計49種化合物檢出。在檢出的49種化合物中有16種是產(chǎn)地共有成分，主要包括薄荷醇、薄荷酮、胡薄荷酮等主要成分，以及γ-欖香烯、α-衣蘭油、α-杜松醇等微量組分，且其相對含量均存在一定地域差異。此外，檢出的揮發(fā)性成分中有11種是產(chǎn)地特有成分，其中湖南1種(異植醇)，廣西5種(芳樟醇、乙酸-3-辛酯、乙酸松油、雪松醇及1種未鑒定組分)，江蘇5種(反式β-羅勒烯、香橙烯、蓽澄茄油烯、α-愈創(chuàng)及1種未鑒定成分)。特有成分含量相對較低，除廣西薄荷揮發(fā)油中的乙酸松油酯外，其他各產(chǎn)地的特有成分相對含量均小于1%。

對5個產(chǎn)地薄荷中揮發(fā)性成分的相對含量比較發(fā)現(xiàn)，薄荷醇含量在5個產(chǎn)地中均為最高，但存在產(chǎn)地差異性，來自安徽、湖南、廣東產(chǎn)區(qū)的薄荷醇含量達(dá)到50%以上，但廣西和江蘇薄荷中薄荷醇含量相對較低，分別為31.14%和35.46%。薄荷醇、薄荷酮、胡薄荷酮及乙酸薄荷酯是薄荷揮發(fā)油的四種主要化學(xué)成分，四種組分的相對含量之和分別為81.73%、77.56%、72.21%、51.51%和54.25%。其含量雖然均超過揮發(fā)油總量的50%，但地域差異也比較明顯。此外，在湖南、廣西及江蘇三個產(chǎn)地的薄荷飲片揮發(fā)油中均發(fā)現(xiàn)了對-薄荷烷-1,2,3醇，其相對含量分別為0.23%、1.569%、0.571%。從查閱的文獻(xiàn)來看，未發(fā)現(xiàn)相關(guān)報到，其來源有待于進(jìn)一步確定。

3　結(jié)論

(1)不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油性狀相近，但其揮發(fā)油提取量存在一定差異，安徽產(chǎn)揮發(fā)油含量最高，廣西產(chǎn)揮發(fā)油含量最低，廣東、湖南及江蘇薄荷揮發(fā)油含量居中。

(2)不同產(chǎn)地薄荷飲片揮發(fā)油在含量和化學(xué)組分方面既有彼此間的共性，也有自身的獨(dú)特性。各產(chǎn)地的薄荷飲片揮發(fā)油主要由萜烯類及酯類組成，其中主要成分包括薄荷醇、薄荷酮、胡薄荷酮及乙酸薄荷酯，但其相對百分含量存在明顯的地域差異。

(3)不同產(chǎn)地間揮發(fā)油成分及其相對含量的差異性，在一定程度上折射出目前中藥市場薄荷飲片質(zhì)量良莠不齊的現(xiàn)狀，需引起足夠重視。而國家藥典僅以揮發(fā)油總含量作為薄荷的含量控制標(biāo)準(zhǔn)顯然是不足的，應(yīng)當(dāng)明確規(guī)定薄荷醇、薄荷酮、胡薄荷酮及乙酸薄荷酯等主要有效成分的相對百分含量范圍。

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A comparative analysis of volatile components inMenthahaplocalyxBriqfrom different habitats

CHI Yuguang1,LI Zhongyang2,HUANG Aihua1,et al

(1.SchoolofChineseMateriaMedica,GuangzhouUniversityofChineseMedicine,Guangzhou,Guangdong510006,China;2.FacultyofEnvironmentalScienceandEngineering,GuangdongUniversityofTechnology,Guangzhou,Guangdong510006,China)

ObjectiveTo provide scientific basis for quality control and clinical application via analysis and comparison of the contents and chemical components of the volatile oil inMenthahaplocalyxBriq, collected from Anhui,Hunan,Guangdong,Guangxi,and Jiangsu province.MethodsThe volatile oil was extracted by steam distillation.The chemical components of volatile oil were identified by GC-MS,and the relative contents of the components were calculated using peak area normalization method.ResultsThe contents of extraction from volatile oil were obviously different in five habitats.The content of volatile oil in Anhui was the highest,and that inGuangxi was the lowest.In addition,altogether forty-nine compounds were found in the volatile oil from five different habitats.Among them,sixteen kinds were common components,and another eleven kinds were the specific components of the area.Of sixteen kinds of common components,menthol,menthone,pennyroyal ketone and menthyl acetate were the main components,the relative amount of which was between 51.51% and 81.73%,which had regional differences.ConclusionsThe regional difference in main components of the volatile oil inMenthahaplocalyxBriqshows that the quality ofMenthahaplocalyxBriqin Chinese herbal medicine market is uneven,which is worthy of adequate attention.

Mentha haplocalyx/analysis;Place of production(TCD)

廣州中醫(yī)藥大學(xué)科研創(chuàng)新基金項目(10CX066)

10.3969/j.issn.1009-6469.2016.09.013

2016-06-22，

2016-07-30)