霍山石斛與鐵皮石斛對比研究進展△

羅宇琴，肖蘇萍，趙潤懷*，王繼永，羅光明

(1.江西中醫藥大學，江西 南昌 330004；2.中國中藥公司，北京 100195)

·綜述·

霍山石斛與鐵皮石斛對比研究進展△

羅宇琴1，2，肖蘇萍2，趙潤懷2*，王繼永2，羅光明1

(1.江西中醫藥大學，江西 南昌 330004；2.中國中藥公司，北京 100195)

本文主要通過整理分析霍山石斛和鐵皮石斛的相關文獻，基于鑒別、含量測定、指紋圖譜、藥理作用、綜合開發利用等研究進展，概括霍山石斛和鐵皮石斛研究的異同，為霍山石斛進一步開發研究提供參考。

鐵皮石斛；霍山石斛；指紋圖譜；藥理作用；綜合開發利用

霍山石斛(DendrobiumhuoshanenseTang et Cheng)與鐵皮石斛(DendrobiumofficinaleKimura et Migo)均屬蘭科石斛屬多年生草本植物。霍山地區主要產3種石斛，即霍山石斛、鐵皮石斛、銅皮石斛。霍山石斛又稱米斛，僅分布于大別山區的安徽霍山、金寨、岳西、舒城，湖北英山等縣[1]，10月至次年6月采收。目前市場上流通的霍山石斛干品僅楓斗，其主要用于保健食品[2]，尚無既定的藥典標準。現代藥理研究表明，霍山石斛具有增強免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗白內障等作用[3]。鐵皮石斛主要分布在安徽西南部、浙江東部、福建西部、廣西西北部、湖南、云南東南部等地[4]，主要生長在巖石峭壁上，11月至次年3月采收，按規格不同可分為鐵皮楓斗、干條。目前主要用于保健品，如鐵皮石斛含片、鐵皮石斛速溶粉；也有中藥復方的研制，如復方鐵皮石斛降糖膠囊、鐵皮石斛靈芝膠囊、清脂降壓茶等。2015年版《中華人民共和國藥典》中主要以多糖和甘露糖為指標對鐵皮石斛進行質量控制[5]。現代藥理研究表明，鐵皮石斛具有增強免疫力、抗腫瘤、抗氧化、降血糖等作用[6]。因歷代對霍山石斛的濫采導致資源匱乏，市場上長期只有其名，而不知其物，一些混亂品種應運而生[7]。因此，在很長時間內研究學者錯誤地認為，霍山石斛是已認識的鐵皮石斛或銅皮石斛[8]。為進一步了解霍山石斛與鐵皮石斛的異同，本文從鑒別、含量測定、指紋圖譜、藥理作用、綜合開發利用等方面對兩者進行概述，為進一步開發利用這兩種藥材提供重要參考。

1 鑒別

1.1 性狀鑒別

霍山石斛與鐵皮石斛因生長習性存在一定的差異[5，9]，故在性狀表現上有所區別。楊善巖等[10]研究兩者性狀區別，具體表現在：霍山石斛的莖由下向上逐漸變細，而鐵皮石斛的莖為圓柱形；鐵皮石斛的葉鞘具紫斑；霍山石斛的花為淡黃綠色，唇瓣中部有黃色斑塊[11]，而鐵皮石斛的花為淡黃色。同時，丁小余等[12]對廣西、云南、貴州等省區6個鐵皮石斛居群的形態解剖結構和花部特征進行研究，根據性狀分將其分為F型和H型，F型適合于加工優質楓斗，而H型不適宜。由此，根據鐵皮石斛性狀的F型或H型進一步說明了鐵皮石斛藥材商品規格。

1.2 顯微鑒別

魏剛等[11]從橫切面形狀、角質層、表皮細胞、薄壁細胞、維管束、內含物等比較了鐵皮石斛和霍山石斛莖的顯微結構。可以看出兩者的區別在于：霍山石斛呈類圓形，邊緣有不規則波狀，鐵皮石斛呈圓形，邊緣有不規則波狀，每2～3個波狀中夾有一個深波狀彎曲；鐵皮石斛外壁及側壁稍增厚，木化；霍山石斛基本薄壁細胞期間分散有很多大型粘液腔，粘液腔直徑可達640～800 μm；鐵皮石斛含草酸鈣針晶束的粘液細胞多見于近表皮處。

1.3 理化鑒別

目前，石斛屬理化鑒別主要集中在對其多糖和生物堿的定性鑒別。經GC分析，霍山石斛粗多糖的單糖成分及其摩爾比為Ara∶Glu∶Gal=11∶176∶137；鐵皮石斛多糖的單糖成分及其摩爾比為Ara∶Man∶Glu∶Gal=22∶29∶272∶174。陳乃東等[14]采用改良碘化鉍鉀進行薄層鑒別，霍山石斛組培植株、野生植株分別檢出2個和4個生物堿顯色斑。

1.4 分子鑒別

鄧輝等[15]通過重復序列聚合酶鏈式反應(ISSR-PCR)分子標記方法分析霍山產3種藥用石斛，證明霍山石斛并非是一類鐵皮石斛，而應是獨立的一個種。劉明珍等[16]用ISSR-PCR技術分析霍山產3種石斛及其他產地的幾種藥用石斛，發現霍山石斛及其相似種存在較大的、穩定的差異。丁鴿等[17]研究表明，隨機擴增多態性DNA標記(RAPD)方法可以作為鐵皮石斛野生居群遺傳多態性、居群親緣關系和分子鑒別研究的有效手段。樊洪泓等[18]發現，基于RAPD分子標記的聚類結果表明，霍山石斛在分類地位上更接近于銅皮石斛，而與鐵皮石斛的親緣關系相對較遠。而SRAP標記的聚類結果表明，鐵皮石斛與霍山石斛具有較近的親緣關系。

2 含量測定

霍山石斛中包含多種化學成分，如多糖、生物堿、微量元素、氨基酸等。鐵皮石斛中化學成分包括多糖、生物堿、氨基酸、微量元素及鼓楂菲和毛蘭素兩種菲類化合物等。

2.1 多糖含量及其水解單糖摩爾比

霍山石斛中水溶性多糖的含量占多糖總量的90%以上[3]。郝杰[19]通過氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)分析霍山石斛發現，在不同多糖片段S1、S2、S3、S4和總多糖中葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖相對摩爾比分別是100∶21∶6.3∶16.7、100∶22.2∶5.6∶6.3、100∶21∶164∶12.2、100∶11.5∶59.8∶30.3、100∶31.7∶28.5∶17.9。查學強等[1]從霍山石斛水溶性多糖中分離出HPS-1B23，由葡萄糖、甘露糖和半乳糖按31∶10∶8的分子摩爾比組成。

鐵皮石斛的多糖含量在26.52%～46.78%，甘露糖含量為13.36%～25.25%[20]。龔慶芳等[21]得出鐵皮石斛多糖比例為27.3%，單糖組成摩爾比為D-甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=3.28∶31.83∶1.51∶1。賓宇波等[22]通過柱前衍生外標法定量得知，D-甘露糖∶L(+)-鼠李糖∶D-葡萄糖=1.936∶0.856∶0.691。

2.2 生物堿

陳乃東等[14]發現，霍山石斛組培植株和野生植株生物堿總提物得率分別為(48±11)、(70±19) mg·g-1，總生物堿含量測定結果分別為(0.29±0.11)‰、(0.43±0.15)‰。

諸燕等[23]發現，人工栽培鐵皮石斛與市場購買的鐵皮楓斗藥材總生物堿在0.019%～0.043%；浙江省11個鐵皮石斛種質一年生、二年生、三年生樣品平均總生物堿分別為0.0253%、0.0270%、0.0326%；云南產一年生鐵皮石斛平均總生物堿為0.0343%。

2.3 微量元素

吳慶生等[24]比較霍山3種石斛的微量元素，其中Zn、Cu、Fe、Mn、Sr有較高含量，霍山石斛莖中Zn、Cu、Fe、Ni、Cr等元素比鐵皮石斛高，Fe、Ni、Cr、Mn比銅皮石斛高。另外，對于根、莖、葉3個部位來說，幾乎各種無機元素在莖中的含量都是最低的；Fe、Al、V、Cr、Zn、Ni、P在根中最高；B、Ca、Mg、K、Mn、Sr、Ba在葉內最高。

諸燕等[25]發現，鐵皮石斛含有豐富的人體必需金屬元素，鉀、鈣、鎂、錳、鋅、鉻、銅平均質量分數分別為1205.23、766.82、158.25、31.06、4.28、8.28、0.97 mg·kg-1。

2.4 氨基酸

霍山石斛含有蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸等多種氨基酸，不同部位氨基酸含量不一致，其中各種氨基酸及其總量均為葉比根含量高；隨著生長年限的增長，莖中各種氨基酸含量及其總量基本呈下降趨勢[26]。

鐵皮石斛中7種人體必需氨基酸的平均質量分數為0.28～2.96 mg·g-1，其他9種基本氨基酸的平均質量分數為0.53～4.20 mg·g-1[27]。

3 指紋圖譜分析

3.1 高效液相

魏剛等[28]以黃酮類成分指標群建立霍山石斛(霍山米斛)HPLC特征圖譜分析方法，得出栽培品與野生品的圖譜區別。何鐵光等[29]研究建立的13批鐵皮石斛的指紋圖譜，以各共有峰相對面積不同進行分類。付娟等[30]建立石斛類藥材的超高液相色譜(UPLC)指紋圖譜，發現鐵皮石斛不含濱蒿內酯、石斛酚、毛蘭素3種成分。

3.2 紅外光譜

李兆奎等[31]發現，不同種石斛的粉末紅外圖譜在1 700～1 200 cm-1和1 000～700 cm-1處特征性明顯。根據相關研究[19，32]對霍山石斛和鐵皮石斛的紅外光譜進行解析，兩者指紋特征區主要在1 000～700 cm-1具有顯著差別。

4 藥理作用

石斛屬藥材其藥理作用主要表現為增強免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗白內障、降血糖等，且其藥理活性物質大多數為石斛多糖，少量為生物堿，僅鐵皮石斛的活性成分還包括聯芐類。霍山石斛和鐵皮石斛主要存在的異同見表1。

表1 霍山石斛與鐵皮石斛藥理活性對比表

5 綜合開發利用

從各地銷售市場調研看，鐵皮石斛的銷售市場目前主要在浙江，其次是上海、北京等大都市，包括主產區云南在內的大部分區域鐵皮石斛銷售還未形成市場[42]。目前市場銷售的一是干品，主要為鐵皮楓斗；二是由鐵皮石斛加工的保健品，主要有3種類型，即固體制劑、口服液和浸膏，固體制劑如鐵皮石斛顆粒劑，鐵皮石斛靈芝膠囊，鐵皮石斛含片等，口服液如鐵皮石斛復合口服制劑，浸膏如鐵皮石斛中藥醒酒膏；三是鮮品直接以茶的形式銷售，包括莖、花和葉，其中莖為最重要的銷售品。霍山石斛的形式與鐵皮石斛類似，也包括楓斗、保健品、鮮品3種，同時霍山石斛有一種以其他加工原料進行發酵的霍山石斛醋，但兩者在中成藥方面的開發還有待完善。

6 展望

長期以來，由于霍山石斛與已熟知的鐵皮石斛或銅皮石斛易混淆，導致霍山石斛化學成分的研究尚不十分明確，因此亟需對霍山石斛化學成分及其提取分離工藝進行研究。

對于霍山石斛的指紋圖譜研究主要集中在液相特征圖譜和紅外光譜，但未能得出特征峰所對應的成分。對霍山石斛的薄層鑒別研究的文獻較少，2010版《中華人民共和國藥典》中對鐵皮石斛以總黃酮進行鑒別，也有學者以多糖的水解產物進行鑒別。這些方法均為霍山石斛的鑒別分析提供依據。

目前大部分研究表明，霍山石斛具有增強免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗白內障、降血糖等藥理作用，但其物質基礎與藥理活性作用機制之間的關系尚不明確，有待進一步深入研究。霍山石斛和鐵皮石斛的綜合利用主要集中于中藥保健品，其中成藥的研究較少，有待進一步開發。

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ResearchProgressinComparativeStudyofDendrobiumhuoshanenseandD.officinale

LUOYuqin1，2，XIAOSuping2，ZHAORunhuai2*，WANGJiyong2，LUOGuangming1

(1.JiangxitraditionalChinesemedicaluniversityNanchang330004，China；2.ThetraditionalChinesemedicalcompanyofChina，Beijing100195，China)

By collecting and summarizing the related literature，the article reviews the research progress in comparative studies ofDendrobiumhuoshanense；D.officinalebased on the identification，content determination，fingerprint，pharmacological effects and comprehensive exploitation and utilization.

Dendrobiumhuoshanense；D.officinale；fingerprint；pharmacological effects；comprehensive development and utilization

2015-08-13)

江蘇省中藥資源產業化過程協同創新中心(2013)

*

趙潤懷，研究員，研究方向：中藥資源與中藥材生產加工；Tel：(010)88468257，E-mail：zhaorunhuai@sina.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.8.029