小鼠自由飲10%酒精3個月對肝臟的影響*

徐　燕，曾　勇， 陳育堯

(1.贛南醫學院；2.贛州市食品藥品監督管理局，江西　贛州　341000；3.南方醫科大學中醫藥學院，廣東　廣州　510515)

?

小鼠自由飲10%酒精3個月對肝臟的影響*

徐燕1，3，曾勇2， 陳育堯3

(1.贛南醫學院；2.贛州市食品藥品監督管理局，江西贛州341000；3.南方醫科大學中醫藥學院，廣東廣州510515)

目的:探討成年小鼠自由飲10%酒精，連續3個月后對肝臟、部分肝功能及血脂的影響。方法：將小鼠分為飲酒組和正常對照組，雌雄各半，每組10只。飲酒組自由飲10%酒精3個月，正常對照組自由飲自來水。各組小鼠自由進食，3個月后空腹摘除眼球采血，測血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)活性及甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)含量；取小鼠肝稱重，計算肝指數。并取肝左葉用10%中性福爾馬林固定，常規脫水，石蠟包埋，HE染色，光鏡下檢查。結果：與正常對照組比較，飲酒組組小鼠血清AST活性明顯升高(P<0.01)；血清TG含量也有一定程度的升高(P=0.076)；飲酒組小鼠肝指數明顯增加(P<0.01)，肝臟明顯脂肪變及壞死(P<0.01、P<0.05)。結論：小鼠自由飲10%酒精3個月，會造成肝細胞腫脹、脂肪變及壞死。

小鼠；酒精；血脂；轉氨酶；病理組織檢查

本實驗采用小鼠長期飲酒3個月，觀察酒精對小鼠血脂、肝功能及肝臟的影響。

1　材料與方法

1.1動物昆明種小鼠，SPF級，20只，雌雄各半，體重18～22 g，動物由南方醫科大學實驗動物中心提供，動物許可證號：SCXK(粵)2006-0015。

1.2試劑及儀器無水乙醇，批號：20100327，由廣東光華化學廠有限公司生產。CX9全自動生化分析儀，美國Beckman coulter 公司生產。

1.3實驗方法將20只小鼠分為飲酒組、正常對照組，每組10只，雌雄各半。飲酒組小鼠給予10%酒精替代水。兩組小鼠均攝食普通顆粒飼料，自由進食。3個月后空腹摘除眼球采血，分離血清，送南方醫科大學中西醫結合醫院檢驗科，測ALT、AST活性及TG、TC含量；取小鼠肝稱重，計算肝指數。并取小鼠肝左葉，用10%福爾馬林固定，常規脫水，石蠟包埋，HE染色，光鏡下檢查。

2　結　果

2.1小鼠體重、肝重及肝指數變化與正常對照組比較，飲酒組小鼠在實驗第1天及實驗結束后，體重無顯明差異。飲酒組小鼠肝濕重有所增加，但無明顯差異，肝指數顯著增加(P<0.01)。見表1。

2.2小鼠血清ALT、AST活性及TG、TC含量的變化飲酒組小鼠與正常對照組比較，血清AST活性顯著升高(P<0.01)。見表2。

表1　小鼠體重、肝重及肝指數變化±s

表2　小鼠血清ALT、AST活性及TG、TC含量的變化

2.3小鼠肝臟病理組織學變化病理組織學檢查可見飲酒組小鼠均有不同程度的肝細胞腫脹、氣球樣變，肝細胞小泡性、大泡性脂肪變性，肝小葉內壞死灶明顯增多，多數表現為凝固性伴出血性點狀、灶狀、片狀壞死，炎細胞浸潤。表明小鼠肝臟損傷病變處在脂肪肝和肝炎階段；正常對照組大部分小鼠肝小葉結構清晰，細胞排列整齊，無變性壞死，匯管區未見炎性細胞浸潤。只有少量小鼠肝細胞出現輕度的腫脹及點、灶狀壞死，炎細胞浸潤。見表3、圖1。

表3　小鼠肝臟病理組織學變化

注：脂肪肝變化[1]：+表示肝小葉結構尚存，肝組織結構大致正常，部分肝細胞索排列紊亂，匯管區周圍細胞腫脹、輕度空泡變及氣球樣變；++表示肝小葉結構模糊不清，部分肝細胞索結構消失，肝細胞排列紊亂，大部分肝細胞腫脹、氣球樣變及空泡變，部分動物可見肝細胞點狀及局灶狀壞死，匯管區少量炎細胞浸潤；+++表示肝小葉結構輪廓消失，肝細胞形態不規則，絕大部分肝細胞腫脹呈氣球樣變，并可見部分肝細胞空泡變性，也可見部分動物出現肝細胞點狀或片狀壞死，匯管區炎細胞浸潤。

A.正常組：正常肝組織。B.正常組：肝細胞輕度腫脹、點狀壞死。C.飲酒組：肝細胞腫脹、大泡性及小泡性脂肪變。D.飲酒組：肝細胞腫脹，凝固性壞死.。

圖1小鼠肝臟病理組織學變化(HE染色，×200)3討論

酒精性肝病是由于長期大量飲酒所致的肝臟損害及其一系列病變，是慢性酒精中毒最常見和最嚴重的并發癥之一。目前，我國酒精性肝病已成為僅次于病毒性肝炎的第2大肝病，嚴重威脅國民健康[2-3]。

本實驗采用小鼠不間斷地自由飲10%酒精3個月，造成小鼠脂肪肝及肝炎。通過實驗過程粗略計算，平均20 g小鼠1天喝1 mL酒精度為50度的高度白酒。按照體表面積換算，相當于1個成人每天喝7～8兩高度白酒，連續3個月(90天)。

通過本實驗表明，長期大量飲酒會造成肝臟損傷，表現為肝細胞的脂肪變及壞死、肝臟指數增加、肝功能異常，血清甘油三酯也有一定程度的升高。再發展下去可能會出現酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化。故長期大量飲酒對健康極為不利。

[1]陳育堯，陳業豪，石彩霞.大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立[J].中藥藥理與臨床,2007,23(4):64-65.

[2]魯曉嵐，陶明，羅金燕，等.飲酒與肝病流行病學調查[J].中華肝臟病雜志，2002，10(6):467-468.

[3]全國酒精性肝病調查協作組.全國酒精性肝病的多中心調查分析[J].中華消化雜志，2007，27(4):231-234.

Effects of 3-month Freely Drink with 10% Alcohol on Mouse Livers

XUYan1,3,ZENGYong2,CHENYu-yao3

(1.SchoolofPharmacy,GannanMedicalUniversity; 2.FoodandDrugAdministrationofGanzhou,GanzhouJaingxi341000;3.SchoolofTraditionalChineseMedicine,SouthernMedicalUniversity,GuangzhouGuangdong510515)

Objective：To study the effect of 3-month freely drink with 10% alcohol on partial liver function and blood lipid levels of adult mice. Methods：The mice were divided into drinking group and normal control group with equal number of male and female (10 mice in each group). The mice in drinking group freely drank 10% alcohol for 3 months, and the mice in normal control group freely drank tap water for 3 months. The mice of every group freely ate food. After 3 months, we took blood samples from mouse eyeballs in fasting conditions, and tested the activity of the serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate transaminase (AST) and the levels of the triglyceride (TG) and total cholesterol (TC); We then weighted the livers and calculated the liver index.The left lobe of liver were fixed in 10% neutral formalin, dehydrated, embedded in paraffin, HE stained and inspected under light microscope. Results:In comparison to control group, serum AST activity of mice in drinking group significantly increased (P<0.01)；The serum TG levels also elevated to some extent (P=0.076); The liver index were raised remarkably(P<0.01)and the livers of mice in drinking group showed more fatness and necrosis than controls (P<0.01,P<0.05). Conclusion: Three-month freely drink with 10% alcohol in mice led to swelling of the livers, fat metamorphosis, and necrosis.

Mice; Alcohol; Blood lipid; Aminotransferase; Pathological examination

陳育堯，男，高級實驗師，研究方向：中藥藥理、毒理、健康食品、動物實驗技術。E-mail：chyy@fimmu.com

R961

A

1001-5779(2016)03-0362-03

10.3969/j.issn.1001-5779.2016.03.008

2016-02-04)(責任編輯：劉仰斌)