原種雞場ALV凈化技術和推廣進展

崔治中/山東農業大學

原種雞場ALV凈化技術和推廣進展

崔治中/山東農業大學

一、種雞場凈化技術和程序

（一）以零檢出為目標的原種雞場核心群的凈化程序

（1）每只留種母雞收集6～8蛋孵化，出殼后胎糞p27檢測，淘汰p27陽性雛雞及其種雞。

（2）每只母雞的后代一籠飼養至6～8周齡，相鄰籠間用隔板相隔，保證不能相互接觸。

（3）在6～8周齡，采血于細胞培養上分離病毒，淘汰陽性雞的所有同胞雛雞及相應母雞；小群飼養陰性母雞。

（4）在開產初期及留種前2次種蛋p27檢測，淘率陽性雞及同一小群母雞。

（5）在開產初期及留種前2次采血分離病毒，淘汰陽性雞及同一小群母雞。

（6）公雞在性成熟后2次采血及采精液分離病毒，淘汰陽性雞。

（7）嚴格檢測所有弱毒疫苗，絕對保證無外源性ALV污染。

不論單一品系的原種雞場還是具有多個配套系的原種雞場，所謂原種雞場是指不再從其他來源引進新的種雞、僅從現有的雞群中選育的在種源上封閉繁種育種的雞場。對這樣的雞場（群）才需要或值得采用這一最嚴格的凈化程序。

1.出殼雛雞胎糞檢測和淘汰陽性雞。在出殼前，將每只種雞的種蛋置于同一出殼紙袋中，用棉拭子逐只采集1日齡雛雞胎糞，置于小試管中。在對一只母雞的雛雞采集完胎糞后，必須更換手套，或徹底洗手消毒。用ALVp27抗原ELISA檢測試劑盒做對1日齡胎糞檢測P27抗原。要注意，同一只母雞所產雛雞中，有一只陽性就應淘汰同紙袋中的其他雛雞，同時淘汰相應種雞。

對選留的雛雞，以母雞為單位，同一母雞的雛雞放于一個籠中隔離飼養。每個籠間不可直接接觸，包括避免直接氣流的對流。飼養期間要采取避免橫向傳播的各種措施。

對選留雞選用的所有弱毒疫苗，必須經嚴格檢測，絕對保證沒有外源性ALV污染。

2.六周齡育雛后期采集血漿分離、檢測病毒血癥和淘汰陽性雞。

育雛期結束時，按育種規程對后備雞做性狀觀察，淘汰在性狀上不合格個體。對保留的雞逐只采集血漿，接種DF-1細胞分離病毒。培養9天后用ALVp27抗原ELISA檢測試劑盒逐空檢測p27抗原或用IFA逐空檢測感染細胞。淘汰陽性后備雞。在同一母雞的同一飼養籠中，有一只陽性就應淘汰同籠中的其他后備雞。

對經以上選留的后備種雞，可適當合群維持小群隔離飼養。例如，每群20～50只左右，可根據后備種雞的總體數量視條件而定。

3. 23～25周齡留種雞開產初期檢測和淘汰。初產期屬于雞群禽白血病病毒排毒高峰期，因此逐只取初生3枚蛋一一編號，對蛋清用ALVp27抗原ELISA檢測試劑盒做P27抗原檢測，淘汰陽性雞。公雞可采集精液檢測P27抗原，淘汰陽性雞。

其余雞隨即采集血漿接種DF-1細胞分離病毒，培養9天后用ALVp27抗原ELISA檢測試劑盒逐空檢測p27抗原或用IFA逐空檢測感染細胞。淘汰陽性種雞。

同一小群中，如有一只為陽性，淘汰該群所有雞（在感染嚴重的雞群，這一條在凈化的第一世代可酌情處理）。

4.40～45周齡留種前檢測和淘汰。取2～3枚種蛋對蛋清做P27抗原檢測，淘汰陽性雞。公雞可采集精液檢測P27抗原或分離病毒，淘汰陽性雞。

其余雞隨即采集血漿接種DF-1細胞分離病毒，培養9天后用ALVp27抗原ELISA檢測試劑盒逐空檢測p27抗原或用IFA逐空檢測感染細胞。

淘汰陽性種母雞和種公雞。（特別注意，可引起垂直傳播）。

5.種蛋的選留和孵化。在經上面“四”項留種前檢測淘汰陽性雞后，每只母雞僅選用1只檢測陰性公雞的精液授精。按規定時間留足種蛋，每只母雞的種蛋均標號。在出殼前，將每只母雞的種蛋置于標有母雞號的一個專用紙袋中，置于出雛箱中出雛。

6.第二世代雞的檢測和淘汰。

對經上述“1”到“5”步檢測淘汰后種雞的出殼的雛雞，作為凈化后第二世代雞。繼續按“1”到“5”的程序，實施第二世代的檢測和凈化。第三世代后可按此程序繼續循環進行。

7. 檢測陽性閾值的調整。在全群不再檢測出陽性，或陽性率很低時，可酌情調整在ELISA中判定陽性的p/s閾值，從嚴淘汰。

8.凈化程序啟動時期的選擇。

以上程序為一個世代的全部過程，但各雞場可以根據凈化計劃實施開始的時期不同，可以從不同的階段開始。

作為剛起始凈化過程的種雞群，多數都選擇從種雞的檢測和淘汰開始。

9.凈化狀態的維持。實施上述完整的對核心群雞逐一檢測和淘汰的程序，工作量很大、成本也很高。根據國外成功的經驗，當一個核心群連續3～4個世代都檢測不出ALV感染雞后，可轉入維持期。在進入維持期后，就不需再對每只后備雞逐一做上面所有檢測步驟。可改為對一定比例雞的定期抽檢，例如5%左右。而且也不一定要用細胞培養分離病毒，僅僅采用操作上比較簡單的檢測胎糞和蛋清的p27抗原。當然，在這方面我們還沒有直接經驗，還有待于今后逐漸摸索和成熟。

（二）引進的祖代或父母代種雞場的凈化

這類種雞場對ALV的凈化只是廣義含義上的凈化。實際上，他們只需要做到選擇凈化的種源和監控并維持引進種雞群的凈化狀態。

對新的供應商育種公司，可要求對其曾祖代雞群或祖代雞群采集一定數量血清樣品（100～200份）檢測抗體，確認都為陰性，或更有可操作性的是要求其提供初產種蛋檢測其蛋清p27抗原（100～200個）及出殼雛雞的胎糞p27抗原。

（三）小型自繁自養黃羽肉雞或地方品種的種雞群的凈化

鑒于現在我國大多數自繁自養黃羽肉雞或地方品種的種雞群都已不同程度的感染了ALV-J和其他亞群外源性ALV，有的已發生臨床病理表現并造成明顯經濟損失。這類公司的規模和經濟實力還不夠大，更沒有技術力量和條件做細胞培養分離病毒。

這時可采用相對簡化的檢測淘汰程序作為過渡期。在這類種雞場，可僅對雛雞出殼后做胎糞p27抗原檢測及對種蛋蛋清做p27抗原檢測。或者更簡單地只檢測種雞種蛋蛋清p27抗原。但這只能作為不得已的過渡期，長遠下去也會被市場所淘汰。

二、禽白血病凈化示范及其成功推廣的啟示

禽白血病是我國規模化養殖業第一個通過病原凈化實現有效的防控的疫病。白羽肉雞近10年沒有顯著的病例報告；蛋用型雞2013年后沒有典型病例報告；黃羽肉雞已有一個育種公司基本實現凈化，多個公司在ALV凈化方面取得顯著進展；地方品種雞：有待推廣。

禽白血病凈化進展也能給我國其他動物疫病防控的帶來很多啟示，而且很多發達國家已經以凈化為主要手段防控動物疾病，包括：牛結核病、牛布氏桿菌病、牛口蹄疫、羊布氏桿菌病、羊藍舌病、豬偽狂犬病、豬口蹄疫、豬瘟、雞白痢、高致病性禽流感。

另外，值得我們關注的是，近幾年世界獸醫界發表的“SCI”論文中估計有一半來自中國獸醫界，世界獸醫界發表的最杰出的“SCI”論文，也幾乎都來自中國。但中國的動物疫病發病狀況是世界上最嚴重的，動物死亡率也是最高的。

這說明什么？養殖業既需要有疫病充滿“SCI”精神的杰出的獸醫科學家和學者，但更需要大量的能面對和解決現實問題的有“工匠”技藝的獸醫專家和學者。各級主管部門要鼓勵高校和科研單位深入畜牧場多為行業服務。（本文根據會議錄音及資料整理，未經專家本人審閱，如有出入，以專家意見為準。）