臨床大腸埃希菌耐藥性檢測及超廣譜β-內酰胺酶的流行病學調查

丁金云

（鹽城市大豐區人民醫院檢驗科，江蘇 鹽城 224100）

臨床大腸埃希菌耐藥性檢測及超廣譜β-內酰胺酶的流行病學調查

丁金云

（鹽城市大豐區人民醫院檢驗科，江蘇 鹽城 224100）

目的 對鹽城市大豐區的臨床大腸埃希菌耐藥性檢測及超廣譜β-內酰胺酶的流行情況進行分析和研究。方法 對50株大腸埃希菌臨床分離鑒定，并且對其實施11種抗菌藥物的耐藥性檢測。利用表型確認試驗的方式將其中的產ESBLs菌株篩選出來。結果 藥敏試驗結果如下：面對β-內酰胺類藥物中的氨芐西林實驗菌株具有90%耐藥率；面對第四代頭孢中的頭孢吡肟實驗菌株具有60%的耐藥率；面對單環類酰胺類的氨曲南實驗菌株具有66%的耐藥率；面對亞胺培南實驗菌株具有60%的敏感度；面對氨基糖苷類藥物中的阿米卡星實驗菌株具有高達60%以上的耐藥率；面對氨基糖苷類藥物中的卡那霉素實驗菌株具有高達60%以上的耐藥率；面對第三代頭孢中的頭孢他啶實驗菌株具有63%的耐藥率；面對第三代頭孢中的頭孢噻肟實驗菌株具有82%的耐藥率；面對氟喹諾酮類藥物諾氟沙星實驗菌株具有74%的耐藥率；面對氟喹諾酮類藥物環丙沙星實驗菌株具有76%的耐藥率；面對氟喹諾酮類藥物氧氟沙星實驗菌株具有82%的耐藥率。結論 目前該地區仍然存在著十分嚴峻的大腸埃希菌耐藥情況，需要引起高度的重視。

ESBLs；大腸埃希菌；耐藥性

作為一種常見的社區和醫院感染的病原菌，大腸埃希菌在廣泛使用廣譜β-內酰胺類藥物的今天產生了越來越高的耐藥率，產ESBLs（超廣譜β-內酰胺酶）在其耐藥機制中屬于最為重要的一種［1］。為了對臨床大腸埃希菌耐藥性檢測及超廣譜β-內酰胺酶流行情況進行分析和研究，本文以鹽城市大豐區為例，對50株大腸埃希菌進行臨床分離鑒定，并且對其實施11種抗菌藥物的耐藥性檢測，報道如下。

1　材料與方法

1.1實驗菌株：選擇鹽城市大豐區2014年6月至2015年5月在臨床標本中分離的大腸埃希菌共計50株［2］。

1.2藥敏試驗：選擇肉湯稀釋法檢測在11種抗菌藥物中50株大腸埃希菌的敏感性。①菌液培養：在1 mLMH肉湯中加入10 μL取待測菌保存液，在37 ℃溫箱中對其進行放置，使其進行12 h的過夜靜止培養。選擇紫外分光光度儀對其OD值進行測定，對其濃度進行調整，達到0.08～0.1的OD600值，這時候菌液達到108cfu/mL的濃度。在此基礎之上再對待測菌液進行1000倍的稀釋，這時候菌液可以達到105cfu/mL的濃度，此時的菌液就是所謂的上樣菌懸液。②藥敏試驗：對待測抗菌藥物進行10倍稀釋，然后將滅菌MH肉湯100 μL加入到無菌96孔板第1～11列；將10倍稀釋的藥液100 μL分別加入到無菌96孔板的每一孔中。在完成藥物和菌液上樣工作之后，將板蓋好，在37 ℃溫箱中對其進行放置，使其進行18～22 h的培養。對2012年美國CLSL制定的標準進行參照判斷藥敏結果［3］。

2　結 果

藥敏試驗結果分析：選擇肉湯稀釋法檢測在11種抗菌藥物中50株大腸埃希菌的敏感性，結果顯示：面對β-內酰胺類藥物中的氨芐西林實驗菌株具有90%耐藥率；面對第四代頭孢中的頭孢吡肟實驗菌株具有60%的耐藥率；面對單環類酰胺類的氨曲南實驗菌株具有66%的耐藥率；面對亞胺培南實驗菌株具有60%的敏感度；面對氨基糖苷類藥物中的阿米卡星實驗菌株具有高達60%以上的耐藥率；面對氨基糖苷類藥物中的卡那霉素實驗菌株具有高達60%以上的耐藥率；面對第三代頭孢中的頭孢他啶實驗菌株具有63%的耐藥率；面對第三代頭孢中的頭孢噻肟實驗菌株具有82%的耐藥率；面對氟喹諾酮類藥物諾氟沙星實驗菌株具有74%的耐藥率；面對氟喹諾酮類藥物環丙沙星實驗菌株具有76%的耐藥率；面對氟喹諾酮類藥物氧氟沙星實驗菌株具有82%的耐藥率。見表1。

3　討 論

通過質粒介導ESBLs能夠在細菌間傳播，在廣泛使用第三代頭孢菌素的今天，產ESBLs大腸埃希菌具有越來越高的流行性和越來越嚴重的耐藥情況。然而在使用抗生素的劑量和種類方面，不同的地區和醫院存在的較大的差異，因此在產ESBLs細菌的耐藥性和檢出率方面也存在著較大的差異［4］。

表1　大腸埃希菌的耐藥情況分析

以β-內酰胺類抗生素為例，β-內酰胺類抗生素屬于臨床上常用的一種抗生素，其主要包括碳青霉烯類抗生素、頭孢菌素和青霉素類抗生素，在臨床中其主要是利用β-內酰胺抑制細菌細胞壁肽聚糖的形成從而對細菌細胞壁的形成產生影響這一機制發揮殺菌作用［5］。然而在臨床上普遍應用廣譜類抗生素的今天，β-內酰胺酶的基因在與抗生素進行長期大量接觸之后，可以對其中的β-內酰胺環進行水解，使得β-內酰胺抑制肽聚糖合成的作用被解除，導致抗生素失效，最終形成耐藥性。在本次研究中，面對β-內酰胺類藥物中的氨芐西林實驗菌株具有90%耐藥率，這說明大腸埃希菌在面對β-內酰胺類藥物時具有越來越嚴重的耐藥情況［6］。綜上所述，目前鹽城市大豐區仍然存在著十分嚴峻的大腸埃希菌耐藥情況，而且ESBLs流行趨勢出現了一定的變化，需要引起高度的重視。

［1］張姝，莫非，黃志卓，等.2009-2010年貴州省6家教學醫院革蘭陰性桿菌耐藥性分析［J］.中國醫院藥學雜志，2011，31（23）：1953-1956.

［2］姜梅杰，孫啟英，劉廣麗，等.472株大腸埃希菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫院感染學雜志，2012，22（10） ： 2192-2193.

［3］肖永紅，沈萍，魏澤慶，等.Mohnarin2010年度全國細菌耐藥檢測［J］.中華醫院感染學雜志，2011，21（23） ： 4896-4902.

［4］胡麗慶，呂火祥，孫定河，等.2007-2009年大腸埃希菌產ESBLs株分離率及對碳青霉烯類藥物的耐藥性變遷［J］.中華醫院感染學雜志，2011，21（15） ： 3258-3260.

［5］董文輝，馬曉艷，孫延波，等.腸桿菌科細菌的耐藥性及超廣譜 β-內酰胺酶檢測［J］.中國實驗診斷學，2009，13（3） ： 356-358.

［6］吳學兵，李蘇華，楊建華，等.上海松江中心醫院 2007-2009年臨床分離大腸埃希菌耐藥性監測［J］.中華臨床醫師雜志，2011，5（5）：1457-1459.

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1671-8194（2016）27-0120-02