嗜鉻粒蛋白A與去勢抵抗性前列腺癌的相關性研究

程樹林，余文博，周文浩，龔志勇

（川北醫學院附屬醫院泌尿外科，四川 南充 637000）

嗜鉻粒蛋白A與去勢抵抗性前列腺癌的相關性研究

程樹林，余文博，周文浩，龔志勇

（川北醫學院附屬醫院泌尿外科，四川 南充 637000）

目的探討嗜鉻粒蛋白A（CgA）與去勢抵抗性前列腺癌（CR PC）的相關性。方法選取2011年1月-2012年8月于川北醫學院附屬醫院經前列腺穿刺活檢證實為前列腺癌的75例組織標本，以免疫組織化學方法檢測CgA在穿刺標本中的表達情況，分析CgA表達率與前列腺癌各臨床病理參數的關系，并比較CgA表達陽性組與陰性組發展至CR PC的差異。結果75例前列腺癌穿刺標本中，36例CgA表達陽性（48.0%）。CgA的表達與PSA水平、Gleason評分以及臨床分期有關（P<0.05），CgA陽性組發展至CR PC的發生率明顯高于CgA陰性組（P<0.01）。結論CgA與CR PC的發生密切相關。監測CgA的表達情況，對前列腺癌的內分泌治療效果的預測可能有一定的臨床指導意義。

前列腺癌；嗜鉻粒蛋白A；去勢抵抗；神經內分泌分化

在歐美地區，前列腺癌（prostate cancer，PCa)已成為威脅男性健康的第一大惡性腫瘤。近年來，我國前列腺癌的發病率呈逐年上升的趨勢[1]。由于早期前列腺癌缺乏典型臨床表現，部分患者就診時已失去根治性治療的機會，或者因年齡較大、合并心肺疾病等因素導致根治性治療風險較大，需要選擇去勢治療。但多數患者在2～3年后發展為去勢抵抗性前列腺癌（castration resistant prostate cancer，CRPC）[2]。目前的研究認為，CRPC的發生可能與前列腺癌的神經內分泌分化（neuroendocrine differentiation，NED）和雄激素受體等因素有關[3]。

嗜鉻粒蛋白A（CgA）是判斷NED最敏感的標記物，本研究采用免疫組化方法，檢測75例穿刺活檢的前列腺癌組織中CgA的表達情況，以探討前列腺癌CgA表達率與PCa各臨床病理參數及CRPC發生的相關性。

1 資料與方法

1.1臨床資料

選取2011年1月-2012年8月于川北醫學院附屬醫院前列腺穿刺活檢證實為前列腺癌的75例組織標本，所有患者均有完整詳細的臨床隨訪資料。患者年齡61～79歲，中位年齡72歲；活檢前前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平15～1200ng/ml，平均125ng/ml。所有患者均選擇了最大限度雄激素阻斷治療（包括手術去勢58例和藥物去勢治療17例）。由于多數患者在治療2～3年后發展至CRPC[2]，因此，本次研究以3年為隨訪期限，共有32例發展至CRPC。

1.2免疫組織化學法染色

兔抗人單克隆抗體嗜鉻粒蛋（Chromogranin A，CgA）購自Santa Cruz公司，LSAB試劑盒購自博士德公司。主要實驗步驟：石蠟包埋組織，5μm連續切片，HE染色復查。石蠟切片脫蠟、水洗、抗原修復、羊血清封閉、滴加一抗、PBS漂洗、滴加二抗（室溫孵育）、DAB顯色、蘇木精染色、中性樹膠封片。查閱文獻[4]，用PBS代替一抗作陰性對照，正常胰腺組織胰島細胞為神經內分泌細胞，恒定表達CgA，因此作陽性細胞對照組。免疫組織化學結果判定標準：CgA的陽性表達為棕黃色顆粒，主要位于細胞漿中。

1.3統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析，分析CgA表達率與PCa各臨床病理參數的關系，并比較CgA表達陽性組與陰性組發展至CRPC的差異。用χ2檢驗進行統計學分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1免疫組織化學染色結果

在前列腺癌組織中，CgA陽性表達主要位于細胞漿中，鏡下觀察到棕黃色顆粒為陽性表達（見圖1）。在本組75例前列腺癌中，有36例腫瘤標本呈CgA陽性表達（見圖2），陽性率為48.0%。

圖1　CgA在前列腺癌中的陽性表達（×400）

圖2　正常胰腺組織胰島細胞CgA陽性（×200）

2.2CgA與PCa患者臨床病理參數的關系

從表1可見，CgA的表達與PSA水平、Gleason評分以及臨床分期有關，PSA及Gleason評分更高組或臨床分期較晚組的CgA陽性表達率更高，差異有統計學意義（P<0.05），但與年齡分段比較差異無統計學意義（P>0.05）。

表1　CgA與PCa患者臨床病理參數的關系

2.3CgA與CRPC發生的相關性

在本組36例CgA表達陽性病例中共有24例發展為CRPC，39例CgA陰性表達病例中，8例發展為CRPC。CgA陽性組發展為CRPC的發生率明顯高于CgA陰性組（P<0.01，見表2），而且兩變量間Pearson列聯系數為0.423，提示前列腺癌CgA陽性與CRPC的發生具有相關性。

表2　CgA與CRPC的相互關系

3 討論

正常的前列腺組織中存在著幾種類型的上皮細胞，包括神經內分泌細胞、基底細胞和腔分泌細胞。神經內分泌細胞因為具有內分泌和神經功能而得名，通過自分泌和旁分泌作用于正常前列腺腺泡和管腔，對前列腺上皮生長、分化發揮著重要作用[5]。研究者發現，幾乎所有的前列腺癌均存在不同程度的NED細胞。前列腺癌的神經內分泌細胞致密核心胞質顆粒儲存著肽類激素和前激素，如CgA、NSE及Syn等[6-8]。

CgA是一種分子量為68 kD的酸性糖蛋白，最初從牛腎上腺髓質嗜鉻顆粒中提取，幾乎所有的神經內分泌腫瘤中均可檢測到CgA，它可以調節激素的分泌，從而影響腫瘤的發展。CgA是前列腺癌組織中神經內分泌細胞最敏感的標記物，高達84%[9]。本研究結果顯示，CgA的表達與PSA水平、Gleason評分以及臨床分期有關，與ATHER的觀點一致，進一步證實前列腺癌的神經內分泌分化與PCa的進展及患者的不良預后有關[10]。

同時，前列腺癌NED細胞可能通過旁分泌、自分泌作用促進腫瘤細胞去勢抵抗性增殖[11]。本研究發現，觀察期內CgA陽性組發展為CRPC的發生率明顯高于CgA陰性組，提示前列腺癌CgA的表達與CRPC的發生具有相關性。監測CgA的表達情況，可能對前列腺癌的內分泌治療效果的預測有一定的臨床指導意義。

本組例數較少，隨訪時間短，進一步的研究需加大病例數和延長隨訪時間。同時，發展為CRPC后再次行前列腺穿刺并檢測CgA，與治療初CgA是否陽性或染色強度是否增加進行比較，結果可能更有說服力。

[1]韓蘇軍,張思維,陳萬青,等.中國前列腺癌發病現狀和流行趨勢分析[J].臨床腫瘤學雜志,2013,18(4):330-334.

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[11]JEETLE S S,FISHER G,YANG Z H,et al.Neuroendocrine differentiation does not have independent prognostic value in conservatively treated prostate cancer[J].Virchows Arch,2012,461 (2):103-107.

（張西倩編輯）

Study on correlation between chromogranin A and castration resistant prostate cancer

Shu-lin Cheng，Wen-bo Yu，Wen-hao Zhou，Zhi-yong Gong
（Department of Urology，Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College，Nanchong，Sichuan 637000，China）

Objective To investigate the relationship between chromogranin A（CgA）and castration resistant prostate cancer（CRPC）.MethodsA total of 75 cases of prostate cancer specimens were stained by immunohistochemistry，and the relationship between CgA expression and CRPC were analyzed.Results Among 75 cases，36 cases were CgA positive（48.0%）.CgA expression was significantly associated with Gleason score，serum prostate specific antigen and disease stage（P＜0.05）.The incidence of CRPC in CgA positive group was significantly higher than that in CgA negative group（P＜0.05）.Conclusions The results suggest that CgA is associated with CRPC.Monitoring the expression of CgA may be helpful for the treatment of prostate cancer patients who receive endocrine therapy.

prostate cancer；Chromoanin A；castration resistant prostate cancer；neuroendocrine differentiation

R 737.14

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.20.006

1005-8982（2016）20-0027-03

2016-02-10

龔志勇，E-mail：gzy0404@sina.cn，Tel：13990717621