辛夷鼻炎丸質量分析概述

羅　軼　唐秀玲　黃莉莉　龍慧端　黃卓謙　谷立勍　黃清泉

（廣西食品藥品檢驗所，廣西 南寧 530021）

辛夷鼻炎丸質量分析概述

羅軼唐秀玲黃莉莉龍慧端黃卓謙谷立勍黃清泉

（廣西食品藥品檢驗所，廣西 南寧 530021）

目的：通過對3家生產企業52批次辛夷鼻炎丸的抽驗，評價辛夷鼻炎丸的質量狀況和現行質量標準的可行性。方法：通過對辛夷鼻炎丸的現行法定標準檢驗和探索性研究檢驗綜合評價其質量狀況。結果：52批次辛夷鼻炎丸按現行法定標準檢驗，合格率為100%，探索性研究檢驗合格率為26.9%。結論：現行標準基本可行，但各生產企業辛夷鼻炎丸的質量參差不齊，一些企業在原料、輔料及生產工藝方面存在著不同程度的問題。探索性研究增加了標準的專屬性、可控性及安全性，為進一步修訂藥品標準、控制藥品質量提供參考。

辛夷鼻炎丸；國家評價抽驗；質量分析

辛夷鼻炎丸由蒼耳子、山白芷、菊花、三叉苦、薄荷、板藍根、廣藿香、鵝不食草、防風、魚腥草、辛夷、甘草、紫蘇葉等十三味中藥組成，具有祛風宣竅，清熱解毒的功效。主要用于風熱上攻、熱毒蘊肺所致的鼻塞、鼻流清涕或濁涕、發熱、頭痛；慢性鼻炎、過敏性鼻炎、神經性頭痛見上述證候者。其方劑是在研究民間驗方的基礎上，由廣州白云山中一藥業有限公司自主研制開發而成，目前我國共有辛夷鼻炎丸生產企業5家，涉及5個批準文號。

2015年全國抽取52批次樣品，3家正在生產的企業均涉及，執行標準共3個，分別為中國藥典2010年版一部第一、第二、第三增補本［1-3］。為深入評價藥品質量，在對全部樣品按法定標準檢驗的基礎上，本實驗圍繞藥品的真實性、安全性及有效性進行了多項探索性研究，結果表明，辛夷鼻炎丸質量狀況一般。

1　法定標準檢驗情況分析

全部52批次樣品按法定質量標準檢驗，合格率為100%。直觀分析顯示各企業間樣品在性狀、薄層鑒別色譜斑點大小和顏色深淺等方面存在差異。經采用SPSS軟件對水分、溶散時限、含量等數據進行統計分析，表明不同企業間、同一企業批間數據均存在一定差異，提示企業內、企業間在生產原輔料、工藝參數等質量控制方面存在差異。

2　探索性研究方法與結果分析

2.1有效性研究

2.1.1薄層色譜鑒別

（1）辛夷的薄層色譜鑒別。經研究建立了本品君藥辛夷的薄層色譜鑒別方法。供試品溶液的制備：同現行標準甘草薄層鑒別項下。對照品溶液的制備：取木蘭脂素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。對照藥材溶液的制備：取辛夷對照藥材0.1g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解即得。陰性對照溶液的制備：取藥材，按處方制得缺辛夷的陰性樣品，照供試品制備方法制得陰性對照溶液。測定法：照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）實驗，吸取上述四種溶液各10～15μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙醚（5:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視，鑒別辛夷。方法靈敏度高，專屬性強，陰性樣品無干擾（圖1），填補了辛夷鼻炎丸質控項目的缺失。結果52批樣品均檢出辛夷。

圖1　辛夷鼻炎丸中辛夷的鑒別

（2）廣藿香的薄層色譜鑒別

經研究建立了廣藿香的薄層色譜鑒別方法。供試品溶液的制備：取本品3g，加石油醚（60～90℃）30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。對照品溶液的制備：取百秋李醇對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。陰性對照溶液的制備：取藥材，按處方制得缺廣藿香的陰性樣品，照供試品制備方法制得陰性對照溶液。測定法：照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）實驗，吸取上述三種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-環己烷-甲酸（10:1:1:0.05）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視，鑒別廣藿香。方法簡便、靈敏度高，專屬性強，陰性樣品無干擾（圖2），填補了辛夷鼻炎丸質控項目的缺失。結果40批樣品檢出廣藿香，有12批未檢出。

圖2　辛夷鼻炎丸中廣藿香的鑒別

（3）甘草和防風的薄層鑒別。針對辛夷鼻炎丸標準防風鑒別項下供試品薄層色譜斑點弱，為提高檢測靈敏度、同時避免檢驗方法重復操作的現狀，以現行標準中甘草薄層鑒別項的供試液點樣，能得到清晰明顯的斑點，達到同時鑒別甘草和防風的目的。該方法一測多評，簡便、靈敏，專屬性強，陰性樣品無干擾（圖3），提高了檢驗效率。結果52批樣品均檢出甘草和防風。

圖3　辛夷鼻炎丸中甘草和防風的鑒別

2.1.2氣相特征圖譜檢查

本制劑中辛夷、廣藿香、紫蘇葉和薄荷含有揮發性成分，為保證藥效，制法規定以上四味藥材先提取揮發性成分后殘渣再加水煎煮，因此研究中運用GC技術建立了以上四味藥材的特征圖譜，以同時控制辛夷、廣藿香、紫蘇葉和薄荷的質量，達到“一測多評”的目的。

色譜條件 DB-5毛細管柱（柱長60m，內徑0.25mm，膜厚度0.25μm）；柱溫為程序升溫，初始溫度50℃，以1.5℃/min的速率升至130℃，保持5min，再以1.5℃/min的速率升至150℃，保持5min，再以1.5℃/min的速率升至240℃，保持5min。進樣口溫度250℃；檢測器溫度280℃；分流進樣，分流比10:1。載氣：氦氣；流速：1.2mL·min-1。

分別取薄荷腦、薄荷酮、廣藿香酮、百秋李醇對照品，精密稱定，分別加甲醇制成1mg·ml-1的參照物溶液。另分別按處方折算、取薄荷、辛夷、廣藿香和紫蘇葉對照藥材適量，置揮發油提取器中，加乙酸乙酯2ml，照揮發油測定法提取3小時，分取乙酸乙酯層，作為對照藥材溶液。取本品適量，研細，取約10g，精密稱定，置揮發油提取器中，加乙酸乙酯2ml，照揮發油測定法提取3小時，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液、對照藥材溶液、與供試品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。供試品特征圖譜中應呈現19個與對照特征圖譜相對應的色譜峰，其中4個峰應分別與相應的參照物峰保留時間相同，見圖4。

圖4　氣相對照特征圖譜

對52批辛夷鼻炎丸樣品進行氣相特征圖譜檢查，其中B企業和C企業14批樣品不符合規定，占26.9%，薄荷、辛夷、紫蘇葉和廣藿香的特征峰缺失嚴重，提示以上四味藥材存在少投料、偷工減料或者生產工藝失控的嚴重現象。

2.1.3高效液相特征圖譜檢查

為對辛夷鼻炎丸質量進行整體、綜合性控制，根據研究情況建立了蒼耳子、鵝不食草、防風、魚腥草、甘草、板藍根等7味藥材的特征圖譜檢查。

色譜條件 色譜柱：Kromasil 5-C100（250*4.6mm，5μm）；以乙腈為流動相A、0.1%磷酸為流動相B進行梯度洗脫；升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、甘草苷檢測波長為220nm；甘草酸檢測波長為250nm。

取升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸銨、綠原酸、木犀草苷適量，分別加50%甲醇配制成50μg·ml-1的參照物溶液。另分別按處方折算、取甘草、蒼耳子、菊花、板藍根對照藥材適量，加水150ml，煎煮約3小時（菊花煎煮1.5小時），濾過，濾液蒸干，精密加50%甲醇20ml使殘渣溶解并轉移至三角瓶中，超聲處理（功率320W，頻率40kHz）30分鐘，濾過，取續濾液，作為對照藥材溶液；再取鵝不食草、魚腥草、防風對照藥材適量，分別精密加入50%甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，作為對照藥材溶液。取本品適量，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇20ml，稱定重量，超聲處理30分鐘（功率320W，頻率40kHz），放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液、對照藥材溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品特征圖譜中應呈現19個與對照特征圖譜相對應的色譜峰，其中6個峰應分別與相應的參照物峰保留時間相同，見圖5。

圖5　高效液相對照特征圖譜

對52批辛夷鼻炎丸樣品進行氣相特征圖譜檢查，其中B企業和C企業14批樣品不符合規定，占26.9%，不合格項目為未檢出木犀草苷且其他藥味特征峰較小，表明以上2家生產企業未按處方規定投入菊花藥材，反映投料藥材的質量差。

2.1.4HPLC測定甘草和防風含量

在進行高效液相特征圖譜檢查的同時，以升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸為指標，采用波長切換方式，建立了制劑中防風和甘草的含量測定方法。測定了52批樣品，結果現行標準中設置的含量指標升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的總量均符合規定，而新增的甘草苷含量范圍為0.04～0.45mg·g、甘草酸含量范圍為0.48～1.28mg·g，以本品原研單位A企業的38批次樣品平均值的80%為限度，合格率僅為59.6%，B企業的12批次甘草苷含量均不合格，表明不同企業所用甘草藥材差異較大，同時不排除部分企業存在劣質藥材投料或少投料行為。

2.2安全性研究

2.2.1留蘭香的檢查

本品處方中含有薄荷，據文獻報道［4］，薄荷有留蘭香代用或混用的問題，兩者雖為同科同屬植物，但其主要成分、功能主治等存在差異。而薄荷、留蘭香的性狀、顯微相近，易發生摻偽、摻雜問題，為控制本品中薄荷的投料質量，結合氣相特征圖譜檢查方法，根據留蘭香含香芹酮、薄荷含薄荷腦不含香芹酮的特性，對本品是否使用摻偽薄荷進行了考察。結果C企業的2批樣品在檢出薄荷腦的同時，還檢出香芹酮，表明該企業薄荷藥材摻有偽品留蘭香投料。

圖6　留蘭香的檢查GC圖

2.2.2蒼耳子毒性成分的檢查

蒼術苷和羧基蒼術苷是蒼耳子的主要毒性成分［5］，為考察這2種成分是否會帶入制劑，帶來安全隱患，采用高效液相色譜法對蒼術苷和羧基蒼術苷進行了測定。結果52批樣品均未檢出。

2.2.3重金屬及有害元素檢查

中藥中重金屬及有害元素的殘留不容忽視，本品為鼻炎患者的常用藥，故對其的控制顯得尤為重要。研究中采用高靈敏度的ICP-MS法測定樣品鉛、鎘、砷、汞、銅的含量，并根據《中國藥典》2010年版一部部分藥材品種項下限度進行評價，結果鎘、鉛、砷等三種元素超標，超標率為57.7%，A、B、C三家生產企業均存在重金屬超標現象，提示生產企業應密切關注包衣輔料-黑氧化鐵和滑石粉的質量。

2.2.4功能性化學藥品的非法添加

針對本品祛風宣竅，清熱解毒的功效并結合適應癥，對可能添加的抗組胺、抗炎、抗鼻塞、抗生素、抗病毒、糖皮質激素類等84種藥物，經過充分研究及驗證，建立了高通量、高靈敏性的篩查檢驗平臺，對全部52批樣品進行檢測，研究結果表明企業在生產時未非法加入上述功能性化學藥品。

3　討論

3.1對該品種現行檢驗標準的評價

現行質量標準包括了防風、鵝不食草的顯微鑒別項，甘草、防風、蒼耳子、魚腥草、鵝不食草和菊花的薄層鑒別項，防風的含量測定項。從標準檢驗結果分析，該標準雖然對本品起到一定的質量控制作用，但項目設置不夠完善，如未對提取揮發油的辛夷、廣藿香、紫蘇葉和薄荷等四味藥材予以控制，難以發現以次充好、偷工減料等問題；部分藥味檢測方法不合理，如魚腥草薄層鑒別的重現性較差，菊花的薄層鑒別陰性有干擾、專屬性差；防風含量測定的限度偏低，不能控制產品的質量。故現行標準還有待于進一步完善和提高，因此，總體評價為“基本可行”。

3.2該品種的質量評價

本次辛夷鼻炎丸評價抽驗共收到全國23個省（區）、市抽取的52批樣品，涵蓋了本品在生產的全部3家企業，在生產企業、經營企業、使用單位抽樣比例為3:43:6，抽樣覆蓋面較廣，代表性較強，樣品情況基本反映了辛夷鼻炎丸的總體水平。樣品法定標準檢驗合格率為100%，依探索性研究試驗方法檢驗合格率為26.9%，表明現行標準在安全性和有效性方面尚存在檢驗項目的缺失，難以全面控制藥品的質量。

4　建議

針對辛夷鼻炎丸在探索性研究中發現部分生產企業存在偷工減料、不投或少投料和藥材摻偽投料，重金屬殘留量較高等方面的問題，筆者提出以下建議：

4.1加強生產監管

建議生產企業嚴格按標準檢驗原藥材及輔料，控制原輔料的質量，關注重金屬殘留，采取措施保證揮發性成分的有效提取，從源頭上保證藥品質量和降低安全風險。

4.2加強質量監督

建議盡快完善辛夷鼻炎丸的質量標準，同時針對本品重金屬超標較嚴重的問題，建議對包衣輔料——黑氧化鐵和滑石粉開展研究，以確認是否為輔料帶入及為進一步制定限度提供合理的依據。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版［M］.第一增補本.北京:中國醫藥科技出版社，2012:29-30.

［2］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版［M］.第二增補本.北京:中國醫藥科技出版社，2013:128-129.

［3］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版［M］.第三增補本.北京:中國醫藥科技出版社，2014:79-80.

［4］ 崔宇宏，高天愛，安志強.薄荷及其偽品留蘭香的鑒別［J］.光明醫藥，2011，26（8）:1712.

［5］ 汪洋.中藥蒼耳子的毒性物質基礎及中毒機制研究［D］.上海:第二軍醫大學，2010.

Quality analysis for the Xinyibiyan Wan

Objective: To evaluate the quality of Xinyibiyan Wan and the feasibility of the current legal quality standards through 52 batches of samples from three factories.Method: Through the test with current standards and the exploratory research to evaluate its quality. Results: The qualified rate of the 52 batches of samples of Xinyibiyan Wan was 100% according to the current legal quality standards； The qualified rate by exploratory examination was 26.9%. Conclusion: The current standards of Xinyibiyan Wan are feasible，but Experimental results show that the quality of this drug in each enterprise is uneven. For some enterprises， there have been different problems in raw materials， auxiliary materials and production process. The results of the test indicate that exploratory research could increase the specificity， controllability， and safety of the standard. It would provide the reference for further revising the drug standard and monitoring the drug quality.

Xinyibiyan Wan； national assessment program； quality analysis

R285

A

1008-1151（2016）04-0081-04

2016-03-12

羅軼（1972－），女，廣西食品藥品檢驗所副主任藥師，從事中藥質量控制及安全性研究。