牛樟芝腸溶片的最佳處方篩選

王瑾，王光磊，陳耀金，林雄，王宮

（1．福建省中醫(yī)藥研究院，福建福州350003；2．福建大醫(yī)本草醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司，福建福州350003）

牛樟芝腸溶片的最佳處方篩選

王瑾1，王光磊1，陳耀金1，林雄2，王宮1

（1．福建省中醫(yī)藥研究院，福建福州350003；2．福建大醫(yī)本草醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司，福建福州350003）

目的篩選牛樟芝腸溶片的最佳處方。方法用Box-Behnken法設(shè)計(jì)試驗(yàn)，考察影響牛樟芝腸溶片片芯質(zhì)量的MCC、L-HPC、糊精和乳糖的用量。結(jié)果Box-Behnken擬合方程得到的最佳處方為：牛樟芝浸膏50%、硬脂酸鎂1%、MCC 25%、L-HPC 6%、糊精18%。結(jié)論根據(jù)最佳處方制得的牛樟芝腸溶片片芯硬度較好，表面光潔，崩解時(shí)限符合藥典規(guī)定。

牛樟芝腸溶片；Box-Behnken法；最佳處方

牛樟芝Antrodia camphorata是原產(chǎn)于我國(guó)臺(tái)灣省的珍稀藥用菌，性寒，味辛、苦、微甘，歸肝、膽、肺經(jīng)［1］?，F(xiàn)代研究表明，牛樟芝含有多糖、三萜、超氧化物歧化酶、腺苷、免疫蛋白、維生素、固醇類(lèi)、木質(zhì)素、不飽和長(zhǎng)鏈脂肪酸、麥角甾醇、微量元素鍺、凝集素、氨基酸、薄孔菌酸等多種生理活性物質(zhì)［2-4］，具有廣泛的生理活性和臨床應(yīng)用價(jià)值，在多種癌癥的治療上具有顯著功效。目前，已有多種不同劑型的牛樟芝產(chǎn)品問(wèn)世。由于牛樟芝性寒，對(duì)胃有一定刺激性，不適合胃寒者長(zhǎng)期服用，限制了其臨床應(yīng)用。我們研制牛樟芝腸溶片，使其避免對(duì)胃部的刺激，以提高患者的依從性。

1　材料

1.1儀器CJY-2C型片劑脆碎硬度測(cè)定儀（上海市黃海藥檢儀器有限公司）；ZB-1C智能崩解儀（上海市安亭電子儀器廠(chǎng)）；LGJ-30FD型真空冷凍干燥機(jī)（北京市松源華興科技發(fā)展有限公司）。

1.2試藥固態(tài)培養(yǎng)牛樟芝（臺(tái)灣省亞新生物科技股份有限公司，批號(hào)：20150603）；維晶纖維素（Microcrystalline cellulose，MCC）（日本旭化成公司）；低取代羥丙纖維素（Low-Substituted Hydroxypropyl Cellulose，L-HPC）（日本旭化成公司）；糊精、乳糖、硬脂酸鎂、無(wú)水乙醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

2　方法

2.1牛樟芝浸膏的制備固態(tài)培養(yǎng)牛樟芝，無(wú)水乙醇回流提取2 h，提取液回收溶劑，經(jīng)冷凍干燥制得醇提干浸膏。殘?jiān)俅斡盟崛? h，提取液濃縮，經(jīng)冷凍干燥制得水提干浸膏。將2部分干浸膏合并打粉混勻制得牛樟芝干浸膏。

2.2制粒壓片按Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的比例混合浸膏及各種輔料，混勻后濕法制粒，壓片，每片直徑11 mm，每片質(zhì)量0.5 g。

2.3片芯硬度及崩解時(shí)間測(cè)定采用CJY-2C型片劑脆碎硬度測(cè)定儀測(cè)定片芯硬度，崩解時(shí)間按照2015年版中國(guó)藥典附錄崩解時(shí)限檢查法項(xiàng)下進(jìn)行。

2.4單因素考察

2.4.1填充劑固定片芯中的其它輔料的種類(lèi)及用量，分別用MCC、糊精、淀粉和乳糖作為填充劑，制粒壓片，測(cè)定所壓片芯硬度。結(jié)果表明，片芯以MCC為填充劑時(shí)硬度最大，而以淀粉為填充劑時(shí)硬度最小?？紤]到腸溶衣片片芯對(duì)硬度的要求及制劑成本，選擇MCC、糊精或乳糖混合作為片芯的填充劑。

2.4.2崩解劑《中國(guó)藥典》一部中規(guī)定中藥浸膏片的崩解時(shí)限不超過(guò)60 min。在固定片芯中的其它輔料種類(lèi)及用量后，考察了L-HPC、CMC-Na及CMSNa在相同用量下的片芯崩解時(shí)間，均符合藥典規(guī)定?？紤]到腸溶衣片要在小腸中崩解釋放，選擇在胃液和腸液中膨潤(rùn)度幾乎相同的L-HPC作為崩解劑。

2.4.3潤(rùn)滑劑固定片芯中的其它輔料種類(lèi)及用量，分別以硬脂酸鎂、滑石粉和微粉硅膠作潤(rùn)滑劑，考察壓片過(guò)程及片芯外觀(guān)，實(shí)驗(yàn)表明壓片過(guò)程均無(wú)粘沖現(xiàn)象，以硬脂酸鎂和微粉硅膠作潤(rùn)滑劑的片面較為光潔美觀(guān)，外觀(guān)差別不大，故選擇硬脂酸鎂作為潤(rùn)滑劑。

2.5Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)單因素考察的結(jié)果，在固定牛樟芝浸膏含量50%、硬脂酸鎂添加量1%的情況下，采用Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)考察MCC、糊精、乳糖、L-HPC的用量，因素水平表見(jiàn)表1。

由于腸溶衣片對(duì)片芯的硬度要求較高，在考察確認(rèn)實(shí)驗(yàn)中不同處方所壓片芯的崩解時(shí)限均符合藥典規(guī)定后，選擇片芯硬度作為實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)指標(biāo)，用Design Expert對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。

表1　因素水平表

3　結(jié)果與討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果及方差分析，見(jiàn)表2、3。響應(yīng)面方程圖形，見(jiàn)圖1～圖3。

表2　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3　方差分析表

Box-Behnken擬合的二次多項(xiàng)式回歸方程為：

y＝44.56+7.51A+1.39B+8.54C－1.91AB+ 4.32AC+0.88BC－3.08A2+0.72B2+2.70C2 r＝0.9827

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果的方差分析中可知，模型項(xiàng)P＜ 0.01，說(shuō)明y與回歸方程的關(guān)系是極顯著的；Lack of Fit失擬項(xiàng)P＞0.05，說(shuō)明所得方程與實(shí)際擬合中非正常誤差所占比例很小，此回歸方程極顯著地表示了y與A、B、C因素的關(guān)系。此外，A、C因素的P＜0.01，B因素的P＞0.05，說(shuō)明因素A、C對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響極顯著，而因素B對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響較不顯著，因素A、B、C對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果y值的影響大小為A＞C＞B，通過(guò)響應(yīng)面方程圖形可直觀(guān)地看出這一結(jié)論。通過(guò)回歸方程擬合的最佳處方為MCC 25%，LHPC 6%，糊精18%，此處方預(yù)測(cè)硬度為65.63 N。根據(jù)此處方進(jìn)行3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，3次實(shí)測(cè)片芯硬度分別為67.89 N、66.78 N、63.95 N，非常接近預(yù)測(cè)值，3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)所測(cè)崩解時(shí)間分別為35、32、26 min，符合藥典規(guī)定，且片芯外觀(guān)光潔，無(wú)粘沖現(xiàn)象，說(shuō)明該處方合理可行。

4　結(jié)論

根據(jù)Box-Behnken法優(yōu)選的牛樟芝腸溶片片芯處方為：牛樟芝浸膏50%，MCC25%，L-HPC 6%，糊精18%，硬脂酸鎂1%。

［1］蘇志誠(chéng)，阮時(shí)寶.臺(tái)灣牛樟芝的性味、歸經(jīng)與功效的探討［J］.中醫(yī)臨床研究，2013，5（20）：26-27.

［2］蔡為明，金群力，蔡青松，等.牛樟芝人工培養(yǎng)及活性成分與藥理作用的研究進(jìn)展［J］.食藥用菌，2015，23（1）：17-23.

［3］馮路瑤，程顯好，李寅，等.培養(yǎng)皿培養(yǎng)對(duì)牛樟芝生長(zhǎng)特性及其總?cè)坪康挠绊懀跩］.中國(guó)食用菌，2015，34（4）：31-35.

［4］程利娟，郭琪。雷虹，等.高效液相色譜法測(cè)定牛樟芝中腺苷的含量［J］.解放軍醫(yī)藥雜志，2014，26（5）：76-78，85.

R284.2

B

1000-338X（2016）05-0026-03

2016-07-25

福建省科技廳省屬公益類(lèi)科研院所基本科研專(zhuān)項(xiàng)（2014R 1035-3）

王瑾（1979—），女，碩士，助理研究員，主要從事中藥保健品的研究。

通迅作者：王宮（1962—），男，副研究員。E-mail：1056563129@qq. com