自然流產(chǎn)次數(shù)與自然流產(chǎn)夫婦染色體異常的相關(guān)性研究

劉藍(lán)澤，張娜，李巖，史云芳，李曉洲，琚端，張穎

（天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科遺傳室，天津300052）

論著

自然流產(chǎn)次數(shù)與自然流產(chǎn)夫婦染色體異常的相關(guān)性研究

劉藍(lán)澤，張娜，李巖，史云芳，李曉洲，琚端，張穎

（天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科遺傳室，天津300052）

目的：探討自然流產(chǎn)次數(shù)與自然流產(chǎn)夫婦染色體異常的關(guān)系。方法：收集因自然流產(chǎn)進(jìn)行染色體檢查的1 784對(duì)夫婦的基本信息，其中1次流產(chǎn)者663對(duì)，2次流產(chǎn)者869對(duì)，≥3次者252對(duì)，行外周血染色體分析。結(jié)果：1次流產(chǎn)組檢出染色體異常夫婦27對(duì)，異常率為4.07%（27/663）；2次流產(chǎn)組檢出31對(duì)，異常率3.57%（31/869）；≥3次組檢出18對(duì)，異常率7.14%（18/252），比較不同流產(chǎn)次數(shù)組染色體異常構(gòu)成比，無(wú)顯著性差異（χ2分別為0.252、3.639、5.922，P均＞0.05）。1 784對(duì)（3 568例）自然流產(chǎn)夫婦中共發(fā)現(xiàn)染色體異常核型77例，占2.16%（77/3 568），其中結(jié)構(gòu)異常49例，占異常核型的63.64%（49/77），數(shù)目異常28例，占異常核型的36.36%（28/77），且結(jié)構(gòu)異常多于數(shù)目異常，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.79，P＜0.05）。結(jié)論：自然流產(chǎn)次數(shù)與夫婦雙方染色體異常之間無(wú)相關(guān)性，建議在1次自然流產(chǎn)后即行夫婦雙方染色體檢測(cè)。

自然流產(chǎn)；染色體核型；第三代試管嬰兒

在我國(guó)自然流產(chǎn)是指妊娠未達(dá)28孕周發(fā)生的胚胎和胎兒丟失，主要包括在此時(shí)期內(nèi)出現(xiàn)的胚胎及胎兒停止發(fā)育或自然排出［1］。引起自然流產(chǎn)的病因較復(fù)雜，遺傳因素尤其是染色體異常是重要原因之一。目前自然流產(chǎn)幾次需要進(jìn)行夫婦雙方染色體檢查，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。臨床上傾向于2次或2次以上自然流產(chǎn)后行夫婦雙方染色體檢查。隨著胚胎移植前遺傳學(xué)診斷的輔助生殖技術(shù)的不斷成熟，對(duì)于染色體異常的夫婦，可以選擇植入前對(duì)胚胎進(jìn)行染色體異常篩選或進(jìn)行贈(zèng)卵的輔助生殖技術(shù)，避免盲目受孕，降低因胚胎染色體異常造成的自然流產(chǎn)率，從而避免反復(fù)自然流產(chǎn)對(duì)夫婦身心帶來(lái)的巨大傷害，為此類家庭爭(zhēng)得擁有生育健康后代的機(jī)會(huì)。本研究分析自然流產(chǎn)次數(shù)與自然流產(chǎn)夫婦染色體異常之間的關(guān)系，探討檢查染色體的時(shí)機(jī)，為因染色體異常導(dǎo)致自然流產(chǎn)夫婦的遺傳咨詢、最佳受孕方式的選擇及產(chǎn)前診斷提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象自2004年1月1日-2014年12月31日在天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科醫(yī)學(xué)遺傳室因自然流產(chǎn)進(jìn)行染色體核型檢查的1 784對(duì)夫婦，女性年齡界于19～48歲，男性年齡界于20～56歲，自然流產(chǎn)次數(shù)界于1～6次之間：自然流產(chǎn)1次的夫婦為663對(duì)、2次為869對(duì)、≥3次為252對(duì)。

1.2方法所有受檢者行外周血淋巴細(xì)胞染色體核型檢查。對(duì)自然流產(chǎn)夫婦抽取外周血2～3 mL，置于肝素鈉抗凝采血管中，充分混勻，從中抽取0.5～0.6 mL血接種于含1640培養(yǎng)液的培養(yǎng)管內(nèi)混勻；按我室常規(guī)方法培養(yǎng)制片，G顯帶及染色；采用MetaSystems染色體自動(dòng)掃描分析系統(tǒng)進(jìn)行G顯帶血淋巴細(xì)胞染色體核型分析，按照人類細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制（I SCN1995、ISCN2009）至少計(jì)數(shù)20個(gè)細(xì)胞，分析2個(gè)細(xì)胞。對(duì)可疑有染色體嵌合的標(biāo)本，至少計(jì)數(shù)30個(gè)細(xì)胞，分析5個(gè)細(xì)胞。對(duì)染色體多態(tài)性，則用C顯帶技術(shù)確認(rèn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0軟件對(duì)3組流產(chǎn)組夫婦染色體分布做χ2檢驗(yàn)，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1自然流產(chǎn)次數(shù)與自然流產(chǎn)夫婦染色體異常的關(guān)系見(jiàn)表1。

表1　不同流產(chǎn)次數(shù)組中夫婦染色體異常的分布情況Tab 1 Distribution of chromosomal abnormalities in couples w ith different frequency of abortion

2.2自然流產(chǎn)夫婦外周血染色體核型基本情況對(duì)1 784對(duì)（3 568例）自然流產(chǎn)夫婦進(jìn)行染色體核型分析，檢出染色體結(jié)構(gòu)異常、數(shù)目異常與染色體多態(tài)性共148例。染色體異常核型77例，占所有受檢者的2.16%（77/3 568）。其中數(shù)目異常28例，占核型異常的36.36%（28/77），占總受檢人數(shù)的0.78%（28/3 568），包括性染色體三體2例、性染色體嵌合22例、常染色體嵌合1例、標(biāo)記染色體3例，見(jiàn)表2。結(jié)構(gòu)異常49例，占異常核型的63.64%（49/77），占總受檢人數(shù)的1.37%（49/3 568），包括平衡易位35例、羅伯遜易位10例、倒位3例及缺失1例。羅伯遜易位中包括非同源羅伯遜易位8例和同源羅伯遜易位2例。見(jiàn)表3。

表2　自然流產(chǎn)夫婦中染色體數(shù)目異常情況Tab 2 Numericalabnorm alitiesin coupleswith spontaneousabortion

2.3自然流產(chǎn)夫婦中染色體結(jié)構(gòu)異常與數(shù)目異常的差異比較1 784對(duì)（3 568例）自然流產(chǎn)夫婦檢出77例染色體異常核型，將染色體結(jié)構(gòu)異常與數(shù)目異常的構(gòu)成比差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.79，P＜0.05）。自然流產(chǎn)夫婦染色體異常中結(jié)構(gòu)異常多于數(shù)目異常。見(jiàn)表4。

表3　自然流產(chǎn)夫婦中染色體結(jié)構(gòu)異常情況Tab 3 Structuralabnormalitiesin couplesw ith spontaneousabortion

表4　染色體結(jié)構(gòu)異常與數(shù)目異常比較Tab 4 Comparison of structural abnormalities and numerical abnormalities

3　討論

近年來(lái)，隨著第三代試管嬰兒（preimplantation genetic diagnosis，PGD）技術(shù)的日趨成熟，為染色體異常及有遺傳病家族史的夫婦能生育正常后代爭(zhēng)得了機(jī)會(huì)。第三代試管嬰兒雖然與第一、二代試管嬰兒一樣要經(jīng)過(guò)體外受精獲得胚胎，但當(dāng)胚胎發(fā)育到8個(gè)細(xì)胞時(shí)在顯微鏡下取出1或2個(gè)細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢查，明確沒(méi)有遺傳病后再將胚胎植入子宮［2］。與以往產(chǎn)前診斷（絨毛、羊水及臍血染色體檢測(cè)）最大的不同點(diǎn)就是在植入前對(duì)胚胎進(jìn)行篩選，將染色體正常或者平衡易位的胚胎植入，從而避免因染色體異常導(dǎo)致自然流產(chǎn)或胎兒畸形給夫婦帶來(lái)的身心痛苦，有助于提高此類家庭生育正常后代的概率。Mardesic等［3］就提出對(duì)染色體易位者應(yīng)用胚胎植入前遺傳學(xué)診斷可以避免自然流產(chǎn)的發(fā)生。因此，及時(shí)了解自然流產(chǎn)夫婦染色體的情況，對(duì)選擇再次妊娠的受孕方式是非常必要的。

3.1自然流產(chǎn)次數(shù)與自然流產(chǎn)夫婦染色體異常的相關(guān)性目前國(guó)內(nèi)外對(duì)自然流產(chǎn)幾次才需要進(jìn)行夫婦雙方染色體檢查尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)外有針對(duì)2次及以上自然流產(chǎn)的研究，如Kochhar等［4］對(duì)788例自然流產(chǎn)患者進(jìn)行染色體檢查，將自然流產(chǎn)2次、3次、4次夫婦中染色體異常構(gòu)成比差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。國(guó)內(nèi)有小樣本的針對(duì)1次自然流產(chǎn)的研究，如巫新春等［5］將50對(duì)自然流產(chǎn)夫婦分成流產(chǎn)1、2、3、4、5次組，分析染色體異常構(gòu)成比，結(jié)果差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究收集了1 784對(duì)自然流產(chǎn)夫婦的染色體數(shù)據(jù)，并將流產(chǎn)1次組、2次組、≥3次組之間染色體異常構(gòu)成比的差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究結(jié)果提示應(yīng)在自然流產(chǎn)1次后即行夫婦雙方染色體檢測(cè)，避免因胚胎染色體異常造成的自然流產(chǎn)，盡早選擇合適的受孕方式及產(chǎn)前診斷。

3.2夫婦雙方染色體核型與自然流產(chǎn)的關(guān)系本研究發(fā)現(xiàn)在自然流產(chǎn)夫婦中，染色體結(jié)構(gòu)異常較數(shù)目異常多見(jiàn)，與國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道一致［6-8］。染色體數(shù)目的改變對(duì)胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育有嚴(yán)重影響，所以常見(jiàn)于流產(chǎn)胚胎組織，能夠出生且存活的染色體數(shù)目異常者多為嵌合體核型，本研究在28例數(shù)目異常中就發(fā)現(xiàn)嵌合體核型26例。染色體結(jié)構(gòu)異常者以平衡易位攜帶者居多，本研究49例染色體結(jié)構(gòu)異常中發(fā)現(xiàn)平衡易位45例，包括羅伯遜易位10例，其中同源羅伯遜易位2例。

中著絲粒和亞中著絲粒的染色體平衡易位攜帶者，其生殖細(xì)胞減數(shù)分裂后產(chǎn)生18種配子，僅1種是正常的，1種是平衡易位，其余16種都是不平衡的，與正常配子受精后形成的合子，大部分將形成染色體不平衡易位而導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎或畸形兒［6］。發(fā)生在近端著絲粒的易位稱之為羅伯遜易位，其減數(shù)分裂產(chǎn)生6種配子，理論上生育染色體正常或羅伯遜易位攜帶者的概率為1/3，其余2/3為單體或三體。由此可見(jiàn)，平衡易位攜帶者通過(guò)自然受孕生育正常后代的概率較低，而且有些患者由于不知染色體異常而未做產(chǎn)前診斷，導(dǎo)致生育染色體異常的畸形兒。

羅伯遜易位中有一種特殊形式為同源羅伯遜易位，指2條同號(hào)染色體之間發(fā)生易位，其在減數(shù)分裂時(shí)不能形成正常的配子，與正常配子結(jié)合后形成的合子染色體或?yàn)閱误w或?yàn)槿w，臨床表現(xiàn)為流產(chǎn)、胎兒畸形，也就是說(shuō)同源羅伯遜易位幾乎不可能擁有健康的子代。本遺傳室曾報(bào)道［10］1對(duì)夫婦結(jié)婚3年發(fā)生自然流產(chǎn)13次后行雙方染色體檢查，發(fā)現(xiàn)女方染色體核型為45，XX，inv（9），der（15q15q）的同源羅伯遜易位。若該患者在自然流產(chǎn)1次后及時(shí)行雙方染色體檢測(cè)并行充分的遺傳咨詢，盡早選擇輔助生育技術(shù)如贈(zèng)卵試管嬰兒就能避免反復(fù)自然流產(chǎn)帶來(lái)的身心傷害，也能解除無(wú)子女之苦。

雖然國(guó)內(nèi)外對(duì)自然流產(chǎn)幾次才需要進(jìn)行夫婦雙方染色體檢查尚無(wú)定論，但本研究通過(guò)大樣本研究發(fā)現(xiàn)，自然流產(chǎn)次數(shù)與染色體異常之間沒(méi)有相關(guān)性，染色體核型異常尤其是平衡易位的夫婦通過(guò)自然受孕常表現(xiàn)為自然流產(chǎn)，其生育正常后代的概率較低，而且因受孕前不知染色體異常而錯(cuò)失產(chǎn)前診斷導(dǎo)致畸形兒出生。與其他檢查相比較，染色體核型分析具有終身性不需復(fù)查等特點(diǎn)。因此建議在醫(yī)療和經(jīng)濟(jì)條件允許的情況下，自然流產(chǎn)1次后即行夫婦染色體檢測(cè)。若發(fā)現(xiàn)染色體異常，需進(jìn)行充分的遺傳咨詢，進(jìn)行受孕方式及產(chǎn)前診斷方法、時(shí)機(jī)的選擇。

［1］張建平.流產(chǎn)的基礎(chǔ)與臨床［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：5-5

［2］黃麗英.人類輔助生殖技術(shù)最優(yōu)化原則的思考［J］.醫(yī)學(xué)與社會(huì)雜志，2003，16（1）：30

［3］Mardesic T，Kosarova M，Zudova D，et al.Preimplantation genetic diagnosis（PGD）in carriers of chromosomal translocations：possibilities and results［J］.Ceska Gynekol，2011，76（2）：100

［4］Kochhar P K，Ghosh P.Reproductive outcome of couples with recurrent miscarriage and balanced chromosomal abnormalities［J］. Obstet Gynaecol Res，2013，39（1）：113

［5］巫新春，曹云霞.50對(duì)自然流產(chǎn)史夫婦染色體分析［J］.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2006，23（1）：112

［6］劉權(quán)章.臨床遺傳學(xué)彩色圖譜［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：69-70

［7］Dong Y，Li L L，Wang R X.Reproductive outcomes in recurrent pregnancy loss associated with a parental carrier of chromosome abnormalities or polymorphisms［J］.Genet Mol Res，2014，13（2）：2849

［8］胡亮，李浩賢，彭瑩，等.1770對(duì)自然流產(chǎn)夫婦的細(xì)胞遺傳學(xué)回顧性分析［J］.國(guó)際生殖健康/計(jì)劃生育雜志，2014，33（3）：168

［9］張香改，于俊榮，黃海燕，等.自然流產(chǎn)與染色體核型異常的關(guān)系［J］.中國(guó)婦幼保健，2012（27）：4244

［10］李巖，張秀玲，張穎.同源羅伯遜易位攜帶者導(dǎo)致習(xí)慣性流產(chǎn)三例［J］.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2006，23（4）：382

（2016-01-25收稿）

Correlation between the frequency of spontaneous abortion and chromosome abnoemality in couples w ith spontaneous abortion

LIU Lan-ze，ZHANG Na，LI Yan，SHI Yun-fang，LI Xiao-zhou，JU Duan，ZHANG Ying
（Department of Obstetrics and Gynecology，General Hospital，Tianjin Medical University，Tianjin 300052，China）

Objective：To investigate the relationship between the frequency of spontaneous abortion and the chromosome abnormality in couples with spontaneous abortion.M ethods：The information of 1 784 couples with the history of spontaneous abortion were collected and the chromosome from peripheral blood of this couples was detected.Six hundred and sixty-three couples experienced spontaneous abortion once.Eight hundred and sixty-nice couples experienced spontaneous abortion twice.Two hundred and fifty-two couples experienced spontaneous abortion 3 times or more.Results：In the group of the couples who had experienced spontaneous abortion once，27 couples showed abnormal karyotypes，accounting for 4.07%（27/663）.In the group of the couples who had experienced spontaneous abortion twice，31 couples were observed with abnormal karyotypes，accounting for 3.57%（31/869）.In the group of the couples who had experienced spontaneous abortion three times or more，18 couples had chromosome abnormality，accounting for 7.14%（18/252）.Statistical analysis was carried out on the chromosome abnormality rates among the three groups.Difference was not significant（χ2=0.252，3.639，5.922，P＞0.05）. In 1 784 couples，77 cases of abnormal karyotype were found，accounting for 2.16%（77/3 568）of all patient，with 49 cases of structural abnormalities and 28 cases of numerical abnormalities，accounting for 63.64%（49/77）and 36.36%（28/77），respectively.Conclusion：There is no correlation between the frequency of spontaneous abortion and the chromosome abnormality.If possible，the couples who have experienced spontaneous abortion once should have chromosome test.

spontaneous abortion；chromosome karyotype；preimplantation genetic diagnosis

R394

A

1006-8147（2016）05-0430-04

劉藍(lán)澤（1986-），女，碩士在讀，研究方向：婦產(chǎn)科優(yōu)生遺傳；通信作者：張穎，E-mail：tjzyyzy@aliyun.com。