真核翻譯起始因子3h和PTEN在胃腺癌組織中的表達及其臨床意義

劉愛東 劉 揚 馬 征

(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院病理科,河北 唐山 063000)

?

真核翻譯起始因子3h和PTEN在胃腺癌組織中的表達及其臨床意義

劉愛東 劉 揚1馬 征1

(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院病理科,河北 唐山 063000)

目的 檢測胃腺癌組織中真核翻譯起始因子(EIF)3h和PTEN的表達及其臨床意義。方法 選擇95例胃腺癌作為觀察組，70例正常胃黏膜組織作為對照組，采用免疫組化法檢測兩組中EIF3h和PTEN的表達。結(jié)果 觀察組中EIF3h表達的陽性率明顯高于對照組，觀察組中PTEN表達的陽性率明顯低于對照組，觀察組中EIF3h和PTEN表達的陽性率與腫瘤的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤、癌結(jié)節(jié)和Ki67增殖指數(shù)均密切相關(guān)，且EIF3h和PTEN的表達負相關(guān)，生存分析顯示EIF3h和PTEN的表達與預(yù)后相關(guān)。結(jié)論 胃腺癌組織中EIF3h高表達、PTEN低表達時，對腫瘤的進展有促進作用，兩者具有協(xié)同負向作用，術(shù)后聯(lián)合檢測EIF3h和PTEN的表達對判斷胃腺癌的預(yù)后有一定價值。

胃腺癌；真核翻譯起始因子3h；PTEN

近年研究顯示腫瘤在發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)明顯的基因和蛋白的異常表達〔1〕。真核翻譯起始因子(EIF)3h是一個含有10～13不同亞基的大翻譯起始復(fù)合物，可以使Met復(fù)合物穩(wěn)定地結(jié)合到40S核糖體亞基上，引起細胞的異型增生，同時能誘導(dǎo)腫瘤進展〔2〕。PTEN是較為經(jīng)典的抑癌基因，具有雙特異性磷酸酶的活性，可以廣泛作用于細胞信號通路中的信號分子，抑制腫瘤的發(fā)展〔3〕。本文探討胃腺癌組織中EIF3h和PTEN的表達及臨床意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2006年1～12月行胃腺癌根治手術(shù)后留取的蠟塊組織及患者的臨床資料作為觀察組，納入均符合WHO關(guān)于胃腺癌的診斷標準。觀察組95例，男54例，女41例，年齡42～79〔平均(60.6±5.9)〕歲，高分化39例，中分化35例，低分化21例，患者手術(shù)前均未進行放、化療。同時選取距腫瘤邊緣>3 cm切端為正常的胃黏膜組織70例作為對照組，男39例，女31例，年齡43～76〔平均(59.5±5.8)〕歲。

1.2 免疫組化檢測EIF3h和PTEN蛋白的表達 EIF3h蛋白的濃縮液購自Cell Signaling生物公司，按不同比例進行預(yù)實驗，選擇最佳配比濃度用于正式實驗。PTEN的工作液購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。EIF3h和PTEN的檢測應(yīng)用免疫組化技術(shù)SP法，DAB染色，嚴格實驗步驟，并均由同一技師操作，嚴格質(zhì)控。

1.3 EIF3h和PTEN蛋白檢測結(jié)果的判定方法 EIF3h和PTEN均以細胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞，每張切片選擇10個400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽性表達率，以陽性細胞≥5%定為陽性，以陽性細胞<5%定為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)分析和生存分析。

2 結(jié) 果

2.1 觀察組與對照組EIF3h和PTEN蛋白表達陽性率比較 觀察組EIF3h表達的陽性率明顯高于對照組(66.32% vs 12.86%，χ2=46.830 2，P<0.000 1)，PTEN表達的陽性率明顯低于對照組(42.11% vs 95.71%,χ2=50.812 4，P<0.000 1)。見圖1。

圖1 EIF3h、PTEN在胃腺癌及正常胃黏膜組織中的表達(DAB，×200)

2.2 觀察組不同臨床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表達陽性率的比較 觀察組中EIF3h和PTEN表達的陽性率均與腫瘤的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤、癌結(jié)節(jié)和Ki67增殖指數(shù)(圖2)密切相關(guān)(P<0.05)，見表1。

2.3 觀察組中EIF3h和PTEN表達的相關(guān)性 觀察組中EIF3h和PTEN的表達呈負相關(guān)(r=-0.53，P=0.019 2)。

2.4 觀察組中EIF3h和PTEN表達的生存分析 本組患者隨訪時間為7～60個月，平均24.9個月。經(jīng)檢驗，胃腺癌組織中EIF3h和PTEN的表達均與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.05)，即EIF3h高表達、PTEN低表達患者的預(yù)后差。見圖3，圖4。

表1 觀察組不同臨床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表達陽性率的比較〔n(%)〕

圖2 Ki67在胃腺癌中陽性表達(DAB，×200)

圖3 EIF3h蛋白表達與胃腺癌預(yù)后的關(guān)系

圖4 PTEN蛋白表達與胃腺癌預(yù)后的關(guān)系

3 討 論

胃腺癌病變發(fā)生和進展時細胞異常增生，同時存在復(fù)制被錯誤修復(fù)并表達到下一代細胞，引發(fā)腫瘤的傳代基因和細胞異常表達，此時參與增殖、翻譯和拮抗癌的相關(guān)基因均發(fā)生明顯變化。翻譯起始階段40S核糖體在發(fā)揮功能時需要相關(guān)因子的協(xié)助，尤其是其與mRNA結(jié)合時更加必要〔4〕。有研究認為EIF3是一個含有10～13不同亞基的大翻譯起始復(fù)合物，其亞基EIF3h對復(fù)合物的功能起到關(guān)鍵性作用，因此這些亞基稱為核心亞基〔5〕。近年學(xué)者也發(fā)現(xiàn)EIF3h可以使Met復(fù)合物穩(wěn)定地結(jié)合到40S核糖體亞基上，并有助于保存這個復(fù)合物在60S核糖體亞單位之上。當(dāng)外源性刺激或有絲分裂信號刺激細胞時，mTOR結(jié)合EIF3h復(fù)合物，并且使S6K1磷酸化〔6〕。此種作用可以引起細胞的異型增生，同時能誘導(dǎo)腫瘤進展。有研究認為真核細胞的細胞質(zhì)分子伴侶TCP-1結(jié)合到新合成的EIF3h時需正確折疊，最后的兩個亞基表達特定的基因〔7〕。在腫瘤進展過程中，此種作用可以使細胞微環(huán)境發(fā)生變化，有效的促進細胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞增殖和整個翻譯過程〔8〕。PTEN是一種腫瘤抑制基因，其所編碼的蛋白質(zhì)是一種磷酸酶。研究顯示PTEN可以引發(fā)細胞內(nèi)第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3)出現(xiàn)去磷酸化，不僅抑制細胞的增殖，還可以抑制腫瘤的轉(zhuǎn)化〔9〕。但是關(guān)于PTEN在腫瘤中的作用可能更趨于多向性，如其可能與P53的作用有關(guān)〔10〕，也可能與NEDD4-1基因和作用相關(guān)〔11〕。

本實驗結(jié)果提示兩種蛋白異常表達可以誘發(fā)正常細胞癌變，并引發(fā)腫瘤細胞出現(xiàn)異常增殖。EIF3h引發(fā)腫瘤細胞增殖、生長的功能與其調(diào)節(jié)翻譯有關(guān)。也有研究認為EIF3h可以快速地誘導(dǎo)NIH-SH3細胞出現(xiàn)惡性表型〔12〕。也有學(xué)者認為EIF3h的高表達可以抑制MYC依賴的凋亡抑制過程，進而直接引起細胞的失控性增生〔13〕。而PTEN在作用過程中也可以對MYC有一定影響〔14〕。PTEN的表達一旦丟失，可以引起明顯的細胞增殖作用，可以無限制地引起以Ki67陽性細胞為主細胞的增殖作用，此時腫瘤細胞失控性增生、分化障礙，進而癌變、浸潤和轉(zhuǎn)移。本研究提示EIF3h、PTEN兩種蛋白異常表達參與胃腺癌的進展。此時腫瘤向周圍浸潤生長能力提高，脈管浸潤的能力增強，周圍形成癌結(jié)節(jié)的能力增高，并破壞神經(jīng)。腫瘤細胞中EIF3h高表達、PTEN低表達意味著腫瘤呈高轉(zhuǎn)移和高風(fēng)險狀態(tài)，細胞間的黏附作用減弱，遷移及活動能力均增強，易于種植于其他部位形成轉(zhuǎn)移灶〔15,16〕。由于以上因素均為臨床判斷生物學(xué)行為的重要指標，因此EIF3h高表達、PTEN低表達提示不良的預(yù)后，而生存分析直接證實了此觀點。因此聯(lián)合檢測EIF3h和PTEN的表達可以作為判定胃腺癌預(yù)后的指標。

總之，胃腺癌組織中EIF3h高表達、PTEN低表達時對腫瘤的進展有促進作用，術(shù)后檢測EIF3h和PTEN的表達對判斷胃腺癌的預(yù)后有一定價值。

1 要瑞莉,劉愛東,龐久玲.Kiss-1和基質(zhì)金屬蛋白酶-9蛋白在胃癌中的表達及意義〔J〕.中國綜合臨床,2009；25(1):84-5.

2 Choudhuri A,Maitra U,Evans T.Translation initiation factor eIF3h targets specific transcripts to polysomes during embryogenesis〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA,2013；110(24):9818-23.

3 Wang H,Liu H,Chen K,etal.SIRT1 promotes tumorigenesis of hepatocellular carcinoma through PI3K/PTEN/AKT signaling〔J〕.Oncol Rep,2012；28(1):311-8.

4 Liu Y,Du F,Chen W,etal.EIF5A2 is a novel chemoresistance gene in breast cancer〔J〕.Breast Cancer,2014；18(2):365-8.

5 吳繼華,張建中,崔 彥,等.EIF3h在結(jié)直腸癌組織中的表達及臨床病理意義〔J〕.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2013；35(23):2582-4.

6 Komarova AV,Real E,Borman AM,etal.Rabies virus matrix protein interplay with eIF3,new insights into rabies virus pathogenesis〔J〕.Nucleic Acids Res,2007；35(5):1522-32.

7 Elvekrog MM,Gonzalez RL Jr.Conformational selection of translation initiation factor 3 signals proper substrate selection〔J〕.Nat Struct Mol Biol,2013；20(5):628-33.

8 Roobol A,Roobol J,Carden MJ,etal.The chaperonin CCT interacts with and mediates the correct folding and activity of three subunits of translation initiation factor eIF3:b,i and h〔J〕.Biochem J,2014；458(2):213-24.

9 Kaur M,Cole MD.MYC acts via the PTEN tumor suppressor to elicit autoregulation and genome-wide gene repression by activation of the Ezh2 methyltransferase〔J〕.Cancer Res,2013；73(2):695-705.

10 Tate G,Suzuki T,Nemoto H,etal.Allelic loss of the PTEN gene and mutation of the TP53 gene in choriocarcinoma arising from gastric adenocarcinoma:analysis of loss of heterozygosity in two male patients with extragonadal choriocarcinoma〔J〕.Cancer Genet Cytogenet,2009；193(2):104-8.

11 Kim SS,Yoo NJ,Jeong EG,etal.Expression of NEDD4-1,a PTEN regulator in gastric and colorectal carcinomas〔J〕.APMIS,2008；116(9):779-84.

12 Pittman AM,Naranjo S,Jalava SE,etal.Allelic variation at the 8q23.3 colorectal cancer risk locus functions as a cis-acting regulator of EIF3H〔J〕.PLoS Genet,2010；6(9):e1001126.

13 Cappuzzo F,Varella-Garcia M,Rossi E,etal.MYC and EIF3H coamplification significantly improve response and survival of non-small cell lung cancer patients (NSCLC) treated with gefitinib〔J〕.J Thorac Oncol,2009；4(4):472-8.

14 Yeh ES,Belka GK,Vernon AE,etal.Hunk negatively regulates C-myc to promote Akt-mediated cell survival and mammary tumorigenesis induced by loss of PTEN〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA,2013；110(15):6103-8.

15 Chen Y,Zheng H,Yang X,etal.Effects of mutation and expression of PTEN gene mRNA on tumorigenesis and progression of epithelial ovarian cancer〔J〕.Chin Med Sci J,2004；19(1):25-30.

16 Xia C,Wang YJ,Li WQ,etal.The arabidopsis eukaryotic translation initiation factor 3,subunit F (AteIF3f),is required for pollen germination and embryogenesis〔J〕.Plant J,2010；63(2):189-202.

〔2015-03-17修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

1 唐山職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)校區(qū)

劉愛東(1975-)，男，醫(yī)學(xué)碩士，副主任醫(yī)師，副教授，主要從事腫瘤分子病理學(xué)研究。

R735.1

A

1005-9202(2016)19-4815-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.065