氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響

王習(xí)達(dá)， 陳煥根， 王勝男，吳其平

(1．江蘇省漁業(yè)技術(shù)推廣中心,江蘇南京 210036；2.北京眾合發(fā)生物科技發(fā)展有限公司，北京 100010)

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氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響

王習(xí)達(dá)1， 陳煥根1， 王勝男2，吳其平2

(1．江蘇省漁業(yè)技術(shù)推廣中心,江蘇南京 210036；2.北京眾合發(fā)生物科技發(fā)展有限公司，北京 100010)

[目的]探討氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響。[方法]通過(guò)在配合餌料中添加氨基多糖螯合鹽，研究其對(duì)扣蟹非特異性免疫力[堿性磷酸酶(AKP)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、溶菌酶活性]的影響。[結(jié)果]氨基多糖螯合鹽可以有效提高扣蟹AKP、ACP、SOD和溶菌酶活性。[結(jié)論]在飼料中添加氨基多糖螯合鹽對(duì)于增強(qiáng)扣蟹非特異性免疫力有一定功效。

氨基多糖螯合鹽；扣蟹；免疫力

河蟹養(yǎng)殖是江蘇省漁業(yè)的重要支柱產(chǎn)業(yè),隨著河蟹養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大,病害對(duì)河蟹養(yǎng)殖業(yè)的危害日益凸顯，因此提高河蟹自身免疫力與預(yù)防病害發(fā)生對(duì)于促進(jìn)河蟹產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要意義。近年來(lái)的營(yíng)養(yǎng)免疫學(xué)研究表明，免疫增強(qiáng)劑可以刺激河蟹免疫應(yīng)答，提高河蟹的抗病能力，從而預(yù)防河蟹養(yǎng)殖中后期疾病的暴發(fā)。目前，已報(bào)道的免疫增強(qiáng)劑有脂多糖、殼寡糖、殼聚糖等，但對(duì)氨基多糖螯合鹽的研究報(bào)道較少。

氨基多糖螯合鹽是一種新型生物材料，已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)用領(lǐng)域，但在水產(chǎn)上的應(yīng)用鮮見(jiàn)報(bào)道。研究表明，氨基多糖螯合鹽可以通過(guò)調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)的超氧化物岐化酶活性，來(lái)降低機(jī)體的脂質(zhì)過(guò)氧化水平[1-2]。通過(guò)殼糖胺可以刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答[3]，在飼料中添加氨基多糖螯合鹽可以提高鯽魚(yú)的超氧化物岐化酶和溶菌酶活性[4]。試驗(yàn)所用氨基多糖螯合鹽是以甲殼素為原料，經(jīng)脫乙酰基作用，再?gòu)?fù)配微量元素經(jīng)過(guò)特殊工藝制備而成。筆者通過(guò)在配合飼料中添加氨基多糖螯合鹽，探討其對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響，旨在為氨基多糖螯合鹽在河蟹生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，并為河蟹的疾病防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 氨基多糖螯合鹽。氨基多糖螯合鹽，由北京眾合發(fā)生物科技發(fā)展有限公司提供。

1.1.2 扣蟹。扣蟹購(gòu)自江蘇省海洋水產(chǎn)研究所如東育苗基地。選取平均體重5 g的扣蟹，按照15 000只/hm2的密度暫養(yǎng)于江蘇省漁業(yè)技術(shù)試驗(yàn)示范基地面積約0.33 hm2的試驗(yàn)池中，日投喂配合飼料2次，投喂氨基多糖螯合鹽30 d，待扣蟹穩(wěn)定后開(kāi)始試驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組：試驗(yàn)組Ⅰ,在配合飼料中添加1%氨基多糖螯合鹽，全程投喂；試驗(yàn)組Ⅱ，在配合飼料中添加1%氨基多糖螯合鹽，脫殼期投喂；試驗(yàn)組Ⅲ,在配合飼料中添加3%%氨基多糖螯合鹽,全程投喂；對(duì)照組中不添加氨基多糖螯合鹽，每組設(shè)3個(gè)平行。試驗(yàn)期90 d。1.2.2 測(cè)定項(xiàng)目與方法。分別在30、60、90 d提取扣蟹肝臟和肌肉組織，測(cè)定AKP、ACP、SOD和溶菌酶活性等非特異性免疫指標(biāo)。酶活性使用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定。1.2.3 數(shù)據(jù)處理。試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，采用單因子方差分析(ANOVA)中的LSD方法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 肌肉和肝臟中AKP活性 從圖1可以看出，90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中AKP活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中在肝臟中表現(xiàn)更明顯，且試驗(yàn)組ⅢAKP活性顯著高于其他組。

2.2 肌肉和肝臟中ACP活性 從圖2可以看出，60和90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中ACP活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中試驗(yàn)組Ⅲ扣蟹肝臟和肌肉中ACP活性顯著高于其他組。

2.3 肌肉和肝臟中SOD活性 從圖3可以看出，60和90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中SOD活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中試驗(yàn)組 Ⅰ、Ⅲ SOD活性顯著高于其他2組(P<0.05)。

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖1 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中AKP活性的影響Fig.1 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the AKP activity in liver and muscle of buckle crab

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖2 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中ACP活性的影響Fig.2 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the ACP activity in liver and muscle of buckle crab

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖3 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中SOD活性的影響Fig.3 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the SOD activity in liver and muscle of buckle crab

2.4 肌肉和肝臟中溶菌酶活性 從圖4可以看出，90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中溶菌酶活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，60 d試驗(yàn)組 Ⅰ、Ⅲ 溶菌酶活性顯著高于其他2組(P<0.05)。

3 結(jié)論與討論

該試驗(yàn)結(jié)果表明，除了30 d各試驗(yàn)組一些指標(biāo)低于對(duì)照組外，60 d、90 d各試驗(yàn)組扣蟹肌肉和肝臟中AKP、ACP、SOD、溶菌酶活性均高于對(duì)照組，說(shuō)明氨基多糖螯合鹽可以提高扣蟹的免疫力。除了30 d試驗(yàn)組 Ⅰ 一些免疫指標(biāo)試驗(yàn)組Ⅲ 外，60 d和90 d試驗(yàn)組 Ⅲ 扣蟹的免疫指標(biāo)均高于試驗(yàn)組 Ⅰ，并且試驗(yàn)組Ⅲ均顯著高于對(duì)照組，這說(shuō)明在一定劑量的范圍內(nèi)扣蟹的免疫應(yīng)答水平與氨基多糖螯合鹽的添加量呈正相關(guān)。大量研究表明，高劑量的免疫增強(qiáng)劑不僅不能提高動(dòng)物機(jī)體免疫力，還會(huì)對(duì)機(jī)體造成免疫抑制[5-6]。研究表明，免疫增強(qiáng)劑的效果也會(huì)呈現(xiàn)前期一般、后期明顯的趨勢(shì)[7]。陳玉春等[8]研究表明飼喂藥餌15 d后頭腎溶菌酶活性與對(duì)照組相比升高不明顯，而30 d后頭腎溶菌酶活性則顯著升高(P>0.05)。因此，飼料中氨基多糖螯合鹽的添加量還不確定，有待進(jìn)一步試驗(yàn)。此外，30 d試驗(yàn)組 Ⅱ 扣蟹的免疫指標(biāo)低于對(duì)照組；60 d、90 d試驗(yàn)組 Ⅱ 扣蟹的免疫指標(biāo)則略高于對(duì)照組，但明顯低于試驗(yàn)組Ⅰ。這說(shuō)明全程投喂氨基多糖螯合鹽的效果最好。

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖4 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中溶菌酶活性的影響Fig.4 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the lysozyme activity in liver and muscle of buckle crab

有研究表明同一種免疫增強(qiáng)劑對(duì)不同器官的作用存在差異[9]。Mills等[10]研究表明水產(chǎn)動(dòng)物的免疫應(yīng)答在血液、肝臟中要比在肌肉中更加明顯，該試驗(yàn)也證實(shí)了這一點(diǎn)。

近年來(lái)，關(guān)于氨基多糖螯合鹽在水產(chǎn)免疫方面的研究主要體現(xiàn)在魚(yú)類上。張耀武等[4]研究發(fā)現(xiàn)在日糧中添加0.5%的氨基多糖螯合鹽，可提高異育銀鯽血清中溶菌酶的活力。王樹(shù)芹等[11]研究表明添加0.5%或1.0%的氨基多糖螯合鹽都可以提高異育銀鯽血清中溶菌酶的活性。劉軍等[12]研究發(fā)現(xiàn)稀土殼聚糖螯合鹽可以有效提高鯽魚(yú)腸道的酶活。常青等[13]在對(duì)花鱸的研究中發(fā)現(xiàn)氨基多糖螯合鹽可以短時(shí)間內(nèi)提高花鱸的免疫應(yīng)答水平。沈錦玉等[14]研究表明通過(guò)口服或注射免疫增強(qiáng)劑的方法都可以顯著提高河蟹血清中SOD的活性。

近年來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖逐漸趨向于高密度、高產(chǎn)量，加之養(yǎng)殖投入品(飼料、藥物等)的不當(dāng)使用，影響了水產(chǎn)品質(zhì)量安全和養(yǎng)殖效益。筆者通過(guò)將氨基多糖螯合鹽應(yīng)用在扣蟹生產(chǎn)上的臨床試驗(yàn)，獲得了一些免疫防病的基礎(chǔ)資料，為后續(xù)水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治提供了一些科學(xué)依據(jù)。

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Effects of the Amino Polysaccharide Chelate Salt on Nonspecific Immunity of Buckle Crab

WANG Xi-da1,CHEN Huan-gen1,WANG Sheng-nan2et al

(1.Fisheries Technology Promotion Center of Jiangsu Province,Nanjing,Jiangsu 210036; 2.Zhonghefa Biotechnology Development Co.,Ltd.,Beijing 100010)

[Objective] To discuss the effects of amino polysaccharide chelate salt on nonspecific immunity of buckle crab.[Method] Amino polysaccharide chelate salt was added into compound feed.We researched its effects on nonspecific immunity (AKP activity,ACP activity,SOD activity and lysozyme activity) of buckle crab.[Result] Amino polysaccharide chelate salt effectively enhanced the AKP activity,ACP activity,SOD activity and lysozyme activity.[Conclusion] Adding amino polysaccharide chelate salt into the feed has certain function on enhancing the nonspecific immunity of buckle crab.

Amino polysaccharide chelate salt; Buckle crab; Immunity

江蘇省水產(chǎn)三新工程項(xiàng)目(Y2015-21)。

王習(xí)達(dá)(1977- )，男，安徽宿松人，高級(jí)工程師，碩士，從事水產(chǎn)藥物臨床試驗(yàn)與水產(chǎn)品質(zhì)量安全研究。

2016-07-18

S 912

A

0517-6611(2016)28-0133-03