丙烯腈誘導的氧化應激對大鼠睪丸NF-κB信號通路的影響

趙乾龍，羅波艷，潘麗，魏倩，張瑞萍，黨瑜慧，李芝蘭

蘭州大學公共衛生學院，蘭州 730000

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丙烯腈誘導的氧化應激對大鼠睪丸NF-κB信號通路的影響

趙乾龍，羅波艷，潘麗，魏倩，張瑞萍，黨瑜慧，李芝蘭*

蘭州大學公共衛生學院，蘭州 730000

為探索丙烯腈(acrylonitrile, ACN)誘導的氧化應激對大鼠睪丸NF-κB信號通路的影響，將50只SPF級健康SD雄性大鼠按體重隨機分為12.5、25、50 mg·kg-1ACN染毒組，50 mg·kg-1ACN+300 mg·kg-1N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)干預組(NAC干預組)，對照組(給予等體積玉米油)，每組10只，灌胃，1次/天，6天/周，共90 d。可見光分光光度法檢測睪丸組織中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)、還原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比值(glutathione/oxidized glutathione, GSH/GSSG)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)。免疫熒光染色法檢測睪丸核因子-κB(nuclear factor κB, NF-κB)激活及核轉移。Western Blot檢測睪丸p65、IκB蛋白表達。結果顯示，低、高劑量染毒組大鼠睪丸GSH/GSSG比值、GSH-Px酶活性與對照組比較降低(P<0.05)。中、高劑量染毒組大鼠睪丸MDA含量與對照組比較升高(P<0.05)。NAC干預組大鼠睪丸MDA含量與高ACN組比較降低(P<0.05)；NAC干預組大鼠睪丸GSH/GSSG比值與高ACN組比較升高(P<0.05)；免疫熒光結果顯示，高ACN組大鼠睪丸NF-κB被激活，并轉移入細胞核。NAC干預組與高ACN組比較p65蛋白表達及核轉移顯著減少。Western Blot結果顯示，高劑量染毒組大鼠睪丸p65蛋白表達與對照組比較升高(P<0.05)，IκB蛋白表達與對照組比較降低(P<0.05)；NAC干預組大鼠睪丸p65蛋白表達與高ACN組比較降低，IκB蛋白表達與高ACN組比較升高，差異有統計學意義(P<0.05)。結果表明丙烯腈引起的氧化應激激活了大鼠睪丸生殖細胞NF-κB信號通路。

丙烯腈；大鼠；睪丸；氧化應激；NF-κB；p65；IκB

Received 22 December 2015 accepted 4 June 2016

丙烯腈(acrylonitrile, ACN)，又稱乙烯基氰，無色易燃易揮發，具有特殊的杏仁氣味，微溶于水，是一種廣泛用于合成人造纖維、人造橡膠、塑料制造的化學單體[1]。

研究發現，長期接觸ACN的男工精子數量和精子密度顯著降低，精子性染色體畸變率升高，染色體二倍體百分率增高，精子DNA損傷嚴重[2]。耿江[3]研究發現，ACN接觸組男工精子總密度、運動精子密度、前向運動精子密度、精子運動速度、直線性及擺動降低。長期接觸ACN還可引起男工血清睪酮水平顯著下降[4]。

核轉錄因子κB(nuclear factor κB，NF-κB)是細胞核內重要的轉錄調節因子，不僅參與機體免疫、炎癥、組織損傷修復和胚胎發育等過程還可以調節凋亡相關基因的表達[5]。……