麝香保心丸薄層色譜一標(biāo)多測研究

王愛娜，崔宇宏

(山西省食品藥品檢驗所，山西太原　030001)

麝香保心丸薄層色譜一標(biāo)多測研究

王愛娜，崔宇宏

(山西省食品藥品檢驗所，山西太原030001)

目的:建立麝香保心丸薄層一標(biāo)多測方法。方法:采用薄層色譜法，將現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)6個獨立的TLC鑒別修訂為2個TLC鑒別控制6個藥味。結(jié)果:各薄層色譜斑點清晰，分離效果好，陰性對照無干擾。結(jié)論:該方法簡便易行，重現(xiàn)性好，可用于麝香保心丸的快檢技術(shù)。

麝香保心丸;一標(biāo)多測;薄層色譜

麝香保心丸具活血祛瘀、舒經(jīng)活絡(luò)、消腫止痛功效，用于各種跌打損傷、瘀血腫痛、風(fēng)濕瘀阻、關(guān)節(jié)腫痛。原標(biāo)準(zhǔn)鑒別項收載6個鑒別，包括5個薄層鑒別(鑒別蟾酥中華蟾酥毒基、酯蟾毒配基;人參中人參皂苷Rg1、Re、Rb1;肉桂中肉桂酸;牛黃中膽酸、去氧膽酸;冰片)及1個氣相色譜法(鑒別人工麝香中麝香酮)，方法費時費力［1］。為了達到快速、簡便、省時、省力的目的，從供試品溶液的制備、展開系統(tǒng)及薄層板的選擇多個方面考慮，將原標(biāo)的鑒別合并為2塊薄層板，鑒別了處方中的6味藥材。1塊薄層板鑒別人工麝香、蟾蜍、蘇合香、冰片4味藥材，另1塊同時鑒別人工牛黃、人參［2-3］。其中肉桂藥材的鑒別經(jīng)過多次實驗摸索，都未能與上述薄層鑒別合并，故除了處方中肉桂未鑒別外，其余6味藥材均建立了快速、簡便的方法。

1　試藥及試劑

對照藥材及對照品:麝香酮(110719-200613)、冰片(110743-200303)、華蟾酥毒基(1100803-200605)、酯蟾毒配基(110718-200507)、蘇合香(931-9402)、人工牛黃(121197-200903)、人參皂苷 Rg1(110703-200425)、人參皂苷Re(110754-200421)、人參皂苷Rb1(110704-200420)均購自中國藥品生物制品檢定所。

樣品:上海和黃藥業(yè)樣品。

試劑:硅膠G、硅膠GF254高效預(yù)制板(青島海洋化工廠、煙臺市化學(xué)工業(yè)研究所、merck板)，其余試劑均為分析純。

2　實驗與結(jié)果

2.1人工麝香、蟾蜍、蘇合香、冰片的薄層鑒別

將處方中4味藥材的薄層鑒別合并，以一塊薄層板、兩種展開系統(tǒng)同時鑒別人工麝香、蟾蜍、蘇合香、冰片4種藥材。

2.1.1供試品溶液的制備取本品2g，研細，加二氯甲烷15 mL，冰水浴超聲處理15 min，濾過(濾渣備用)，取濾液1 mL作為供試品溶液Ⅰ(鑒別冰片);其余濾液揮至近干，殘渣加乙酸乙酯1 mL轉(zhuǎn)移至具塞試管中，加1 mL二硝基苯肼試液，振搖使混勻，放置，取上層乙酸乙酯液作為供試品溶液Ⅱ(鑒別人工麝香、蟾蜍、蘇合香)。

2.1.2對照品溶液的制備取冰片對照品，加二氯甲烷制成每1 mL含3 mg的溶液;取酯蟾毒配基、華蟾酥毒基對照品，加乙酸乙酯制成每1 mL分別含1 mg的混合溶液作為對照品溶液。另取麝香酮對照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含2 mg的溶液，取溶液1 mL，加1 mL二硝基苯肼試液，振搖使混勻，放置，取上層乙酸乙酯液作為對照品溶液。另取蘇合香對照藥材，加二氯甲烷制成每1 mL含10 mg的溶液，作為對照藥材溶液。

2.1.3陰性對照品溶液的制備(所用藥材由生產(chǎn)單位提供)取處方中各藥味(除冰片、人工麝香、蟾蜍、蘇合香)1/100處方量，模擬制法，分別制備缺冰片、人工麝香、蟾蜍、蘇合香的對照溶液，按供試品溶液的制備方法制備，即得。

2.1.4薄層層析吸取上述供試品溶液Ⅰ及冰片對照品溶液各2 μL，供試品溶液Ⅱ、蘇合香對照藥材、酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及麝香酮對照品溶液各5 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷－乙酸乙酯(20∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置日光下檢視，在與麝香酮對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同的黃色斑點;置紫外光燈(254 nm)下檢視，在與蘇合香對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光淬滅斑點。再以環(huán)己烷－丙酮(20∶7)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，置日光下檢視，在與冰片及酯蟾毒配基、華蟾蜍毒基對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照品無干擾，經(jīng)驗證方法可行。(見圖1～3)

圖1　日光下檢視(鑒別人工麝香)Fig.1　The Sun Review(To identify artificial musk)

圖2　UV(254 nm)下檢視(鑒別蘇合香)Fig.2　UV(254nm)Review(To identify storax)

圖3　噴5%香草醛后(鑒別蟾蜍、冰片)Fig.3　After Spraying 5%Vanillin(To identify toad，borneol)

2.2人工牛黃、人參的薄層鑒別

2.2.1供試品溶液的制備取上述備用濾渣，揮干二氯甲烷，加甲醇10 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液作為供試品溶液。

2.2.2對照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Re對照品，加甲醇制成每1 mL分別含1 mg的對照品混合溶液。再取人工牛黃對照藥材，加甲醇制成每1 mL含3 mg的對照藥材溶液。

2.2.3陰性對照品溶液的制備(所用藥材由生產(chǎn)單位提供)分別取處方中各藥味(除人參、人工牛黃) 1/100處方量，模擬制法，分別制備缺人參、人工牛黃的對照溶液，按供試品溶液的制備方法制備，即得。

2.2.4薄層層析吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷－甲醇－水(13∶6∶2)下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，在與人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1及人參皂苷Re對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點;置紫外光燈(365 nm)下檢視，在與人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1及人參皂苷Re對照品及人工牛黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾，經(jīng)驗證方法可行。(見圖4～5)

圖4　日光下檢視Fig.4　The Sun Review

圖5　UV365 nm下檢視Fig.5　The UV365nm Review

3　討論

將處方中4味藥材的薄層鑒別合并，以1塊薄層板、2種展開系統(tǒng)，同時鑒別人工麝香、蟾蜍、蘇合香、冰片4種藥材;將處方中人參、人工牛黃的薄層鑒別合并，以1塊薄層板、1種展開系統(tǒng)，同時鑒別人參、人工牛黃2種藥材，為本藥品的快速鑒別參考提供了依據(jù)。

根據(jù)藥材中有效成分的性質(zhì)，經(jīng)過摸索確定了提取方法。人工麝香、蟾蜍、蘇合香、冰片4味藥材的有效成分均為脂溶性成分，且容易揮發(fā)，曾選擇乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯為提取溶劑，因蟾蜍中的成分不溶于乙醚，三氯甲烷毒性大，故選擇毒性相對小、對四味藥材的有效成分溶解性均好、沸點低、容易揮干的二氯甲烷作為最佳提取溶劑。二氯甲烷沸點低，故選擇在冰水浴中超聲處理。

處方中冰片的量大，故超聲提取后的溶液先取出1 mL作為冰片的供試品溶液。其余溶液室溫揮至近干后，加乙酸乙酯1 mL溶解后轉(zhuǎn)移至具塞試管中，加1 mL二硝基苯肼試液，原理為使樣品中的麝香酮與二硝基苯肼試液反應(yīng)生成黃色苯腙類化合物，以便麝香酮的檢出，因為如果二氯甲烷提取液直接點樣展開后，需噴二硝基苯肼試液才能檢出，噴二硝基苯肼試液后薄層板背景為黃色，不僅降低了麝香酮檢出靈敏度，也阻礙了蟾蜍、蘇合香、冰片的同時檢出。故選擇先使得麝香酮與二硝基苯肼試液反應(yīng)生成黃色苯腙類化合物，苯腙類化合物能溶于乙酸乙酯，蟾蜍、蘇合香、冰片的成分也能溶于乙酸乙酯，且乙酸乙酯液在上層，點樣也容易。實驗證明，這樣制備的供試品溶液，既能很好地檢出麝香酮，又不影響其他成分的同時檢出。

人參所含有的人參皂苷為水溶性成分，人工牛黃的部分有效成分也為水溶性成分，故將第1個薄層項下二氯甲烷提取后的濾渣，加甲醇超聲提取后作為鑒別人參及人工牛黃的供試品溶液。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(2010年版一部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［2］羅心平，施海明.麝香保心丸的基礎(chǔ)與臨床［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002，22(9):718-720.

［3］蔣艷玲，袁衛(wèi)梅，李宇翠.薄層掃描法測定麝香保心丸中麝香酮的含量［J］.河南中醫(yī)藥學(xué)刊，2002，17(4):21.

本文編輯:王知平

Study on TLC of Shexiangbaoxin PiLL by MuLti-Components Assay

WANG Aina，CUI Yuhong
(Shanxi Provincial Institute For Food and Drug Inspection，Taiyuan 030001，Shanxi，China)

Objective:To establish a TLC(thin-layer-chromatography)method in shexiangbaoxin piLL by multicomponents assay.Methods:Two TLC methods were used to identify the quality control standard of six ingredients of medical herbs instead of the current 6 individual TLC.Results:All spots of TLC were clear;the separation effect was good;there was no interference in the negative control.ConcLusion:The method is simple，easy to practise，and repeatable so that it can be used for quick test of shexiangbaoxin pill.

Shexiang Baoxin pill;Multi-components Assay;TLC

R917

A

1671-0126(2016)02-0001-03

王愛娜，女，主管藥師，從事中藥檢驗及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究