太原市無償獻血者抗-HIV結果確認和帶型分析

陜柏峰，原維宇，馮 澤，張柳明

(山西省血液中心檢驗科，太原 030024)

?

·論 著·

太原市無償獻血者抗-HIV結果確認和帶型分析

陜柏峰，原維宇，馮 澤，張柳明

(山西省血液中心檢驗科，太原 030024)

目的 分析研究太原市無償獻血者人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體(抗-HIV)陽性標本的確認結果和帶型。方法 采用蛋白印跡(WB)對185例初篩陽性獻血者標本進行確認試驗，采用SPSS13.0分析試驗結果和帶型。結果 確認陰性128例，不確定15例、陽性42例。確認陽性標本中，gp120、gp160、p24帶型陽性率為100.00%，p31、p51和p66陽性率均大于90.00%。不確定標本中，p24陽性率最高，有12例，占80.00%；其次為gp160，有3例，占20.00%。隨著S/CO值增大，帶型出現率逐漸增高，最高為S/CO值>6.00組(χ2=35.16，P=0.009)。結論 HIV篩查試驗存在假陽性。確認陽性標本多為病毒感染期。初篩陽性標本必須進行追蹤確認試驗，確認其是否感染。

艾滋病病毒； 蛋白印跡； 確認試驗； 帶型

目前，我國無償獻血者人類免疫缺陷病毒(HIV)檢查方法主要有篩查和確認2種。無償獻血者血液標本必須經過篩查和確認試驗才能確定是否感染HIV。無償獻血是公益性服務，其發現HIV感染者的原因，一方面是患者自身被感染且不知情，另一方面可能其存在高危行為故意隱瞞但被發現。若感染HIV血液流向臨床，將產生重大損失。由于眾多檢測方法對人類感染HIV均存在檢測“窗口期”，易導致“漏檢”現象發生，所以要求血液中心提高檢測技術，并在獻血者招募和征詢中嚴格把關。因此，筆者對無償獻血者中確認HIV陽性標本進一步分析和研究，為血液安全提供理論基礎，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月至2015年6月山西省血液中心185例HIV抗體(抗-HIV)篩查結果為陽性的無償獻血者標本進行蛋白印跡(WB)確認研究。

1.2 方法 確認試驗采用WB進行。試劑為HIV 1+2型抗體檢測試劑盒 (IMT HIV-1/2 Blot確認試劑盒)，嚴格參照試劑說明書進行試驗。判斷標準參考《全國艾滋病檢測技術規范(2009年版)》。確認試劑由上海英旻泰生物技術有限公司提供，經國家食品藥品監督管理局注冊并在有效期內使用。

1.3 統計學處理 采用EXCEL 2003進行錄入，SPSS13.0進行統計分析，計數資料采用%表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 初篩陽性標本確認結果及帶型分布 185例初篩陽性標本確認陰性128例(69.19%)，陽性42例(22.71%)，不確定15例(8.11%)。42例陽性標本中gp120、gp160、p24帶型陽性率為100.00%，p31、p51、p66和gp41陽性率均大于90.00%。不確定標本中，p24陽性率最高，有12例，占80.00%；其次為gp160，有3例，占20.00%；gp41、p51、p31，p17各1例，各占6.67%。見表1。

表1 初篩陽性標本確認結果和帶型分布[n(%)]

2.2 不同S/CO值標本的確認結果和帶型分析 185例初篩陽性標本中出現陽性帶型共57例，其中有40例S/CO值大于6.00，有14例S/CO值大于1.00且小于或等于3.00，有3例S/CO值大于3.00且小于或等于6.00。陽性帶型出現率最高為S/CO值大于6.00組，不同S/CO值的3組間，帶型出現率差異有統計學意義(χ2=35.16，P=0.009)。見表2。

表2 不同S/CO值初篩陽性標本確認結果和帶型分布[n(%)]

3 討 論

本次研究結果顯示，185例陽性標本中，確認陽性42例，真陽性比例為22.71%，低于遼陽、遵義等地的報道[1-2]，高于長治、邯鄲等周邊地區的報道[3-4]。這可能與本中心自2014年起縮小“灰區”設置，采用第4代酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑進行抗-HIV篩查有關。科學制訂“灰區”能有效減少假陽性發生，第4代ELISA試劑在檢測傳統抗體的同時，還能檢測p24抗原，提高敏感性和特異性，但存在交叉反應等非特異性反應，仍有一定假陽性[5]。

HIV感染人體后，不同抗體在人體內產生的時間和作用并不相同。原發性抗體水平在感染后2～4周開始上升，3～6個月后達到高峰并持續整個潛伏期。血清抗體種類包括中和抗體、抗-p24和針對病毒不同組分的抗體。本次研究顯示，WB確證陽性者均為HIV-1型感染，全帶型陽性為41例，占97.62%；出現8條及以上帶型者19例，占45.24%。其中，gp160、gp120、p24出現率為 100.00%，p31、p51、p66帶型出現率均大于90.00%，與俞根龍等[6]的報道相似。出現全帶型提示患者正處于感染期，且其將持續整個潛伏期，表明本地區無償獻血者抗-HIV陽性者多數處于感染期未進入獲得性免疫缺乏綜合征(AIDS)期。由于HIV結構蛋白水平、抗原性強弱和產生相應抗體時間不同，且不同個體對不同抗原成分的免疫應答強度存在差異，導致WB帶型存在一定差異，但也預示了疾病感染的進展程度。本次研究陽性標本中，Env gp41缺失率最高，有41例，占97.62%。gp41帶作為外膜蛋白帶，出現晚于gp160和gp120帶，在病毒侵入靶細胞時才會大量存在。gag p55帶型缺失22例，占52.38%。其可能因機體免疫功能嚴重受損，免疫應答能力減弱，使某些抗體產生量下降，缺失率增高，提示疾病進展速度較快[7]。p31缺失3例，占7.14%，其中2例為全帶型，1例僅出現gag基因表達的p17、p24和Env基因表達的gp120帶型。p31帶型缺失可能預示患者為早期感染[8]，尤其是伴隨Env區帶型的缺失。此外，陽性標本中還有2例出現p39帶，抗-p39出現可能與不同人群的免疫力差異有關[9]。

由于含有較ELISA試驗更全面的HIV特異性抗原成分，WB試驗可以確定參與反應的抗原，廣泛應用于HIV感染確認試驗。但是，由于病毒抗體產生時間和試驗敏感性等問題，該試驗結果存在不確定性，需要進一步追蹤確認。本次研究顯示，15例不確定結果中，p24帶型陽性率最高，為80.00%；其次為gp160和p17，為20.00%，與前期報道相似[10]。雖然有報道認為gag 類大部分為非特異性反應[11]，但也有部分為感染早期患者，需要進一步追蹤確認[12]。而本次試驗的不確定結果以p24帶最多，需引起進一步重視。

本結果還對S/CO值和帶型出現率的關系進行了研究，發現隨著S/CO值增高，確認符合率逐漸增高，除p24和gp41外，其余帶型出現率逐漸增高，表明隨著病毒增殖活躍，機體產生的抗體水平逐漸增高，ELISA和WB試驗對抗體的檢出率也逐漸增高。試驗中有5例單試劑陽性標本(S/CO值大于6.00)和2例雙試劑陽性結果(S/CO值為1.31、1.00，5.26、1.02)確認為陰性，2例單試劑陽性(S/CO值為3.89和1.73)確認為陽性，表明并不能以初篩S/CO值判斷是否感染，必須進行確認試驗。

綜上所述，山西省血液中心無償獻血者HIV篩查試驗存在一定假陽性結果，HIV陽性獻血者多數處于感染期，隨著初篩S/CO值增高，帶型出現率逐漸增高，但須進行追蹤確認試驗，確認其是否感染。

[1]魏微.遼陽市2011～2013年HIV抗體篩查實驗室確證符合率分析[J].中國衛生檢驗雜志,2015,25(12):1998-1999.

[2]趙明伍,田登菊,朱琳.遵義市2013年HIV確認實驗室檢測結果分析[J].中國艾滋病性病,2016,22(1):56.

[3]牛麗彬,楊濤,申玉麗.長治地區無償獻血者HIV篩查與確證分析[J].醫藥與保健,2015,9(9):257.

[4]魏淑梅,孫國棟,左志平,等.2002～2013年邯鄲市無償獻血人群HIV篩查及確證情況分析[J].中國輸血雜志,2014,27(8):856-858.

[5]Muhlbacher A,Schennach H,Helden J,et al.Performance evaluation of a new fourth-generation HIV combination antigen-antibody assay[J].Med Microbiol Immunol,2013,202(1):77-86.

[6]俞根龍,李鳳兒,葉智穎.HIV抗體初篩陽性與免疫印跡試驗結果對比性分析[J].中國公共衛生,2014,30(12):1592-1594.

[7]史曉林,王峰,劉雙輝,等.140例HIV-1抗體陽性者WB帶型及CD4+T細胞結果分析[J].中國衛生檢驗雜志,2009,19(11):2600-2602.

[8]Schupbach J,Bisset LR,Regenass S,et al.High specificity of line-immunoassay based algorithms for recent HIV-1 infection Independent of viral subtype and stage of disease[J].BMC Infect Dis,2011,11(1):254.

[9]鐘敏,馬莎,楊紹敏.367例HIV-1陽性樣本WB確認結果的帶型分析[J].檢驗醫學與臨床,2012(20):2529-2530.

[10]管改弟,李東,李向紅.2012～2013年太原市無償獻血人群 HIV 感染的流行病學調查[J].臨床醫藥實踐,2015(10):796-797.

[11]魏彬,豐姝,羅婭,等.2013年HIV抗體免疫印跡試驗確證不確定結果分析[J].現代預防醫學,2015,42(15):2788-2792.

[12]朱榮華,向信春.37例HIV不確定結果隨訪觀察及WB帶型分析[J].皮膚病與性病,2014,36(1):46-47.

Analysis of the confirmation results and banding patterns of the HIV antibody of unpaid blood donors in Taiyuan City

SHANBaifeng,YUANWeiyu,FENGZe,ZHANGLiuming

(DepartmentofClinicalLaboratory,ShanxiBloodCenter,Taiyuan,Shanxi030024,China)

Objective To analyze the confirmation results and banding patterns of the HIV antibody of unpaid blood donors in Taiyuan city.Methods Western blot was used to confirm the positive samples of 185 blood donors in primary screening.SPSS 13.0 analysis was used to analyze the experimental results and banding patterns.Results A total of 128 negative cases were confirmed,15 cases were not confirmed and 42 cases were positive.The positive rates of banding patterns of gp120,gp160 and p24 were all 100.00%,and which of p51,p66 and p31 were all higher than 90.00%.In the undetermined samples,there were 12 positive cases of p24,which accounted for 80.00%,followed by gp160,3 positive cases and accounted for 20.00%.With the increase of S/CO value,rates of banding patterns gradually increased,and the highest rate group was the S/CO higher than 6.00(χ2=35.16,P=0.009).Conclusion There are some false positive results in the HIV screening test.The specimens which are confirmed positive are mostly in the virus infection period.Positive samples in primary screening must be conducted confirmed test so as to determine whether the cases are infected.

HIV; Western blot; confirmed test; banding patterns

陜柏峰，男，主管技師，主要從事病原微生物及血液免疫學方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.025

A

1673-4130(2016)21-3017-03

2016-04-11

2016-06-22)